本發(fā)明涉及四氫甲基嘧啶羧酸,具體為一種通過(guò)發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法。
背景技術(shù):
1、根據(jù)中國(guó)專(zhuān)利網(wǎng)已公開(kāi)的專(zhuān)利,專(zhuān)利名稱(chēng)為:一種四氫甲基嘧啶羧酸發(fā)酵過(guò)程誘導(dǎo)劑的加入方法,專(zhuān)利號(hào)為:202310191372.6,本發(fā)明涉及氨基酸衍生物生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域,并提供一種四氫甲基嘧啶羧酸發(fā)酵過(guò)程誘導(dǎo)劑的加入方法,四氫甲基嘧啶羧酸發(fā)酵工藝流程包含斜面培養(yǎng)、種子瓶培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵罐培養(yǎng),具體步驟如下:先進(jìn)行斜面配方的制備;然后在種子瓶中培養(yǎng)種子培養(yǎng)基;將種子培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至種子罐中培養(yǎng),在種子罐進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)取樣測(cè)od值、ph值、殘?zhí)侵担蛔詈髮⒎N子罐中的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至發(fā)酵罐中進(jìn)行培養(yǎng),測(cè)量發(fā)酵培養(yǎng)罐中od含量,發(fā)酵培養(yǎng)罐中od含量到達(dá)50及以上時(shí)加入誘導(dǎo)劑進(jìn)行誘導(dǎo),進(jìn)行誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的同時(shí)將發(fā)酵培養(yǎng)罐中的溫度調(diào)節(jié)至26-30℃誘導(dǎo)4h,在8h、12h、16h分別向培養(yǎng)罐中加入誘導(dǎo)劑進(jìn)行誘導(dǎo)并測(cè)量發(fā)酵培養(yǎng)罐中的發(fā)酵物含量,最后得出最佳誘導(dǎo)時(shí)間;而上述中的四氫甲基嘧啶羧酸通過(guò)發(fā)酵法制備時(shí)過(guò)程過(guò)于復(fù)雜,并且成本較高,產(chǎn)物得到率也較低,影響了制備的質(zhì)量。
2、因此,需要對(duì)四氫甲基嘧啶羧酸進(jìn)行設(shè)計(jì)改造,有效的防止其制備時(shí)過(guò)程過(guò)于復(fù)雜,并且成本較高,產(chǎn)物得到率也較低的現(xiàn)象。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、為解決上述背景技術(shù)中提出的問(wèn)題,本發(fā)明的目的在于提供一種通過(guò)發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,具備可以高效制備的優(yōu)點(diǎn),解決了制備時(shí)過(guò)程過(guò)于復(fù)雜,并且成本較高,產(chǎn)物得到率也較低的問(wèn)題。
2、為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:一種通過(guò)發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,包括步驟a)準(zhǔn)備階段;步驟b)活化菌種;步驟c)種子培養(yǎng);步驟d)發(fā)酵處理;步驟e)提取純化;步驟f)干燥處理;步驟g)包裝處理;
3、步驟a)準(zhǔn)備階段:首先準(zhǔn)備斜面配方、種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基,種子培養(yǎng)基一般包括葡萄糖、酵母蛋白胨、酵母提取物、氯化鈉等,用于在種子罐中進(jìn)行培養(yǎng),發(fā)酵培養(yǎng)基則包括葡萄糖、磷酸氫二銨、磷酸二氫銨、氯化鉀、七水硫酸鎂、酵母蛋白胨、酵母提取物以及微量元素母液等;
4、步驟b)活化菌種:然后將大腸桿菌接種至固體平板培養(yǎng)基上,得到活化菌;
5、步驟c)種子培養(yǎng):將活化菌接種至種子培養(yǎng)基中,在種子罐中進(jìn)行培養(yǎng),得到種子培養(yǎng)液,種子培養(yǎng)基的配方和條件(如溫度、ph值等)需要精心選擇和優(yōu)化,以確保菌種的良好生長(zhǎng)和代謝;
6、步驟d)發(fā)酵處理:將種子培養(yǎng)液接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中,在發(fā)酵罐中進(jìn)行培養(yǎng),在發(fā)酵過(guò)程中,需要加入誘導(dǎo)劑和補(bǔ)料培養(yǎng)基,以促進(jìn)四氫甲基嘧啶羧酸的合成,同時(shí),發(fā)酵罐內(nèi)的溫度、ph值、攪拌速度等條件也需要嚴(yán)格控制,以保證發(fā)酵過(guò)程的順利進(jìn)行;
7、步驟e)提取純化:經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的發(fā)酵后,發(fā)酵液中會(huì)積累一定量的四氫甲基嘧啶羧酸,此時(shí),需要將發(fā)酵液進(jìn)行提取和純化,以得到高純度的四氫甲基嘧啶羧酸產(chǎn)品,具體的提取和純化方法可以根據(jù)實(shí)際需求和條件進(jìn)行選擇和優(yōu)化;
8、步驟f)干燥處理:將純化后的四氫甲基嘧啶羧酸進(jìn)行干燥處理,去除其中的水分和雜質(zhì);
9、步驟g)包裝處理:然后,將干燥后的產(chǎn)品進(jìn)行包裝和儲(chǔ)存,以便后續(xù)使用或銷(xiāo)售。
10、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述準(zhǔn)備階段時(shí)需要在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行分揀,并且各個(gè)培養(yǎng)基都需要按照比例進(jìn)行調(diào)配。
11、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述活化菌種時(shí)工作人員需要佩戴防護(hù)服和護(hù)目鏡,且在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行。
12、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述種子培養(yǎng)時(shí)得到的種子培養(yǎng)液需要放在玻璃容器內(nèi)進(jìn)行保存,避免接觸空氣。
13、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述發(fā)酵處理時(shí)在適當(dāng)?shù)臏囟取⑺釅A度、通氣等條件下進(jìn)行發(fā)酵,控制發(fā)酵過(guò)程中的各項(xiàng)參數(shù)以促進(jìn)thmpc的產(chǎn)生。
14、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述提取純化時(shí)采用結(jié)晶、溶劑洗滌、柱層析等步驟進(jìn)行操作處理。
15、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述干燥處理時(shí)需要反復(fù)干燥最少三次,且干燥溫度需要根據(jù)周?chē)鷾囟冗M(jìn)行實(shí)時(shí)調(diào)式。
16、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述包裝處理時(shí)采用耐腐蝕高強(qiáng)度的容器進(jìn)行包裝,確保了產(chǎn)品的質(zhì)量。
17、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果如下:
18、1、本發(fā)明四氫甲基嘧啶羧酸改變了傳統(tǒng)誘導(dǎo)培養(yǎng)的方式,采用了發(fā)酵法制備的方式,其制備過(guò)程就不會(huì)過(guò)于復(fù)雜,成本也不會(huì)較高,產(chǎn)物得到率也不會(huì)很低,更不會(huì)影響制備的質(zhì)量,并且通過(guò)準(zhǔn)備階段、活化菌種、種子培養(yǎng)、發(fā)酵處理、提取純化、干燥處理和包裝處理對(duì)四氫甲基嘧啶羧酸進(jìn)行發(fā)酵制備,同時(shí)在每個(gè)步驟之間都要進(jìn)行清潔處理,使其更加環(huán)保,從而具備高效制備的效果。
1.一種通過(guò)發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:包括步驟a)準(zhǔn)備階段;步驟b)活化菌種;步驟c)種子培養(yǎng);步驟d)發(fā)酵處理;步驟e)提取純化;步驟f)干燥處理;步驟g)包裝處理;
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述準(zhǔn)備階段時(shí)需要在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行分揀,并且各個(gè)培養(yǎng)基都需要按照比例進(jìn)行調(diào)配。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述活化菌種時(shí)工作人員需要佩戴防護(hù)服和護(hù)目鏡,且在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述種子培養(yǎng)時(shí)得到的種子培養(yǎng)液需要放在玻璃容器內(nèi)進(jìn)行保存,避免接觸空氣。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述發(fā)酵處理時(shí)在適當(dāng)?shù)臏囟?、酸堿度、通氣等條件下進(jìn)行發(fā)酵,控制發(fā)酵過(guò)程中的各項(xiàng)參數(shù)以促進(jìn)thmpc的產(chǎn)生。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述提取純化時(shí)采用結(jié)晶、溶劑洗滌、柱層析等步驟進(jìn)行操作處理。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述干燥處理時(shí)需要反復(fù)干燥最少三次,且干燥溫度需要根據(jù)周?chē)鷾囟冗M(jìn)行實(shí)時(shí)調(diào)式。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過(guò)發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述包裝處理時(shí)采用耐腐蝕高強(qiáng)度的容器進(jìn)行包裝,確保了產(chǎn)品的質(zhì)量。