本發(fā)明涉及利福平中的遺傳毒性雜質(zhì)的量的控制，特別是亞硝胺的量的控制。特別地，本發(fā)明涉及用于制備基本上不含1-甲基-4-亞硝基哌嗪(menp)雜質(zhì)的利福平的方法。本發(fā)明還涉及基本上不含1-甲基-4-亞硝基哌嗪(menp)雜質(zhì)的利福平。

背景技術(shù)：

0、現(xiàn)有技術(shù)

1、亞硝胺是具有通式r1r2n-n＝o的有機(jī)化合物，由ema(歐洲藥品管理局(europeanmedicines?agency))ich?m7(r1)(評估和控制藥物中的dna反應(yīng)性(誘變性)雜質(zhì)以限制潛在致癌風(fēng)險)分類為1類雜質(zhì)，“已知誘變性致癌物”，并由國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(international?agency?for?research?on?cancer，iarc)分類為2a-“可能的致癌物”。

2、這樣的化合物是多種合成方法的已知副產(chǎn)物，例如在亞硝化劑(例如酸性條件下的亞硝酸鹽)和胺(仲、叔或季)的存在下，并且可以是難以分離的：因此，即使在純化之后，成品中也可存在這些痕量雜質(zhì)。

3、已經(jīng)在許多用于人的活性藥物成分中發(fā)現(xiàn)痕量亞硝胺。近年來，這導(dǎo)致全球監(jiān)管機(jī)構(gòu)(例如美國食品和藥品管理局(food?and?drug?administration，fda)和ema)對這些雜質(zhì)的耐受閾值施加了嚴(yán)格的限制。因此，持有包含化學(xué)或生物來源的活性藥物成分(activepharmaceutical?ingredient，api)的藥物的銷售許可的公司需要對其藥物產(chǎn)品及其生產(chǎn)方法進(jìn)行越來越準(zhǔn)確和嚴(yán)格的審查，以防止或限制亞硝胺含量。監(jiān)管機(jī)構(gòu)對遺傳毒性雜質(zhì)(特別是對于亞硝胺)問題的關(guān)注，代表了旨在保證患者安全和健康的預(yù)防方法(符合ema條例(ec)no?726/2004第5條第3款修訂所引入的措施，以限制用于人用途的藥品中亞硝胺的存在)。

4、利福平(如下圖所示)屬于利福霉素(rifamycin)類并且是抗生素，主要用于治療結(jié)核病，以及治療嚴(yán)重感染，例如血流感染和麻風(fēng)。

5、例如，利福平可以從利福霉素-s開始來獲得，通過通常不分離的嗪(oxazino)中間體，并隨后與1-氨基-4-甲基哌嗪(1-amino-4-methylpiperazine，1-amp)反應(yīng)以獲得利福平(參見下面的合成方案)。這種類型的合成方法在文獻(xiàn)中是已知的，參見例如us4174320和cn101486716。

6、

7、最近在市售的利福平批次中已經(jīng)檢測到亞硝胺(特別是1-甲基-4-亞硝基哌嗪(menp))的痕跡。已知這種遺傳毒性雜質(zhì)的存在來源于利福平生產(chǎn)方法中1-amp的使用，以及來源于利福平本身降解產(chǎn)物的氧化。

8、fda建議menp的最大日攝入量為96ng/天。特別是對于利福平，根據(jù)該數(shù)據(jù)，并考慮對應(yīng)于600mg/天的最大日劑量，活性成分中認(rèn)為可接受的最大menp閾值對應(yīng)于百萬分之0.16(ppm；sandrine?and?mike?frick,n-nitrosamines?and?tuberculosismedicines?rifampicin?and?rifapentine,february?2021)。

9、事實上，在2020年八月，fda發(fā)布了這樣的說明，其中將利福平中menp的可接受限度設(shè)定為0.16ppm，然而規(guī)定接受包含低于5ppm?menp的臨時分布的利福平，以維持患者可獲得這些挽救生命的藥物。

10、據(jù)申請人所知，用于獲得包含等于或低于0.16ppm的量的menp的利福平的方法在本領(lǐng)域中是未知的。

11、專利文獻(xiàn)cn111018887描述了利福平純化方法，其允許獲得純度約為99.5％并且單一雜質(zhì)含量低于0.1％的利福平。然而，該文獻(xiàn)完全沒有提及關(guān)于遺傳毒性雜質(zhì)(特別是menp)的存在，并因此也沒有提及關(guān)于對其量的控制。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、因此，本申請人已經(jīng)解決了獲得基本上不含1-甲基-4-亞硝基哌嗪(menp)的利福平，并且特別是具有等于或低于0.16ppm的menp含量的利福平的目標(biāo)。

2、本申請人還已經(jīng)解決了開發(fā)從遺傳毒性物質(zhì)(特別是從1-甲基-4-亞硝基哌嗪(menp))中純化利福平的方法的目標(biāo)。

3、因此，在第一方面中，本發(fā)明涉及用于制備基本上不含1-甲基-4-亞硝基哌嗪(menp)的利福平，并且優(yōu)選具有等于或低于0.16ppm的menp含量的利福平的方法，所述方法包括以下步驟：

4、a)提供粗制利福平在有機(jī)溶劑中的混合物，其中所述混合物是通過將固體粗制利福平溶解在有機(jī)溶劑中獲得的；

5、b)將所述混合物用ph為2至7的水溶液洗滌，以獲得有機(jī)層和水層，然后將其分離；

6、c)將至少一種抗氧化劑添加至從步驟b)獲得的經(jīng)分離的有機(jī)層；

7、d)在惰性氣氛下蒸餾所述有機(jī)溶劑；

8、e)在惰性氣氛下結(jié)晶；以及

9、f)在惰性氣氛下分離由此獲得的利福平。

10、本發(fā)明還涉及這樣的利福平，其具有1-甲基-4-亞硝基哌嗪(menp)的含量等于或低于0.16ppm。

技術(shù)特征：

1.用于制備基本上不含1-甲基-4-亞硝基哌嗪(menp)的利福平的方法，所述方法包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述利福平包含的1-甲基-4-亞硝基哌嗪的量低于或等于0.16ppm。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述利福平包含的1-甲基-4-亞硝基哌嗪的量為0.01ppm至0.16ppm，優(yōu)選0.01ppm至0.10ppm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的方法，其中步驟a)中使用的有機(jī)溶劑選自極性和非極性非質(zhì)子溶劑，例如二氯甲烷、乙酸乙酯、2-甲基四氫呋喃、甲基異丁基酮、甲苯及其混合物。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中所述有機(jī)溶劑是非極性非質(zhì)子溶劑，優(yōu)選二氯甲烷。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項所述的方法，其中所述至少一種抗氧化劑選自抗壞血酸、抗壞血酸-2-葡糖苷、抗壞血酸-6-辛酸酯、抗壞血酸-6-棕櫚酸酯、半胱氨酸、焦亞硫酸鈉、沒食子酸丙酯、丁基羥基茴香醚、丁基羥基甲苯(bht)及其組合。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述抗氧化劑是抗壞血酸。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項所述的方法，其中所述惰性氣氛是基本上氮飽和或氬飽和的氣氛，或者在真空下，優(yōu)選地o2的量低于3％體積。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項所述的方法，其中分離的步驟f)是通過過濾進(jìn)行的。

10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項所述的方法，其還包括步驟f’)，其中將步驟f)中獲得的利福平用非質(zhì)子極性溶劑洗滌，優(yōu)選地用丙酮洗滌，并分離。

11.根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項所述的方法，還包括步驟g)，其中將從步驟f)或從步驟f’)獲得的利福平進(jìn)行干燥。

12.可通過根據(jù)權(quán)利要求1至11所述的方法獲得的利福平，其特征在于包含的1-甲基-4-亞硝基哌嗪的量低于或等于0.16ppm。

13.利福平，其特征在于包含的1-甲基-4-亞硝基哌嗪的量低于或等于0.16ppm。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及利福平中的遺傳毒性雜質(zhì)的量的控制，特別是亞硝胺的量的控制。特別地，本發(fā)明涉及用于制備基本上不含1?甲基?4?亞硝基哌嗪(MeNP)雜質(zhì)的利福平的方法。本發(fā)明還涉及基本上不含1?甲基?4?亞硝基哌嗪(MeNP)雜質(zhì)的利福平。

技術(shù)研發(fā)人員：納特瓦爾·潘查爾,馬杜·薩達(dá)希瓦亞,維努·巴布·戈里帕蒂,桑賈尼·萬古樂,桑迪普·帕瓦爾
受保護(hù)的技術(shù)使用者：歐倫股份公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/23