本發(fā)明涉及細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，更進(jìn)一步涉及一種細(xì)胞制備給料系統(tǒng)。

背景技術(shù)：

細(xì)胞培養(yǎng)是二十世紀(jì)初創(chuàng)立的一種研究動(dòng)物細(xì)胞行為的方法，是指從體內(nèi)組織取出細(xì)胞，模擬體內(nèi)生長(zhǎng)環(huán)境，在無(wú)菌、適當(dāng)?shù)臏囟?、酸堿度和營(yíng)養(yǎng)條件下，使細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖，并維持其結(jié)構(gòu)和功能。細(xì)胞制備是指科研人員運(yùn)用相對(duì)成熟的細(xì)胞培養(yǎng)方案培養(yǎng)出高純度的目的細(xì)胞終制品，通過(guò)功能和質(zhì)量檢測(cè)后可直接應(yīng)用于科研和臨床領(lǐng)域的過(guò)程。

細(xì)胞制備過(guò)程中給料操作至關(guān)重要，給料過(guò)多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，給料過(guò)少則導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)匱乏死亡，給料不及時(shí)會(huì)因?yàn)榧?xì)胞代謝物累積造成細(xì)胞生長(zhǎng)增殖和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受到抑制。目前細(xì)胞制備過(guò)程通常采用人工補(bǔ)給法補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

按照gmp相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的操作流程，每隔一段時(shí)間由專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行無(wú)菌操作，將營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)耗盡的細(xì)胞培養(yǎng)液經(jīng)過(guò)離心分離去除，并采集樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照細(xì)胞密度比例，將細(xì)胞生長(zhǎng)增殖必需的新鮮營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)添加到細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)器皿中，如培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)袋等，然后再放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。按照gmp標(biāo)準(zhǔn)需要建立一套完整的無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室，gmp(goodmanufacturingpractices)是藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范，藥品生產(chǎn)過(guò)程中用科學(xué)、合理、規(guī)范化的條件和方法保證生產(chǎn)優(yōu)良藥品的科學(xué)管理方法，gmp實(shí)驗(yàn)平臺(tái)一般包括平臺(tái)功能分區(qū)、平臺(tái)潔凈室基本要求、平臺(tái)儀器設(shè)備基本要求等各項(xiàng)規(guī)定；需要投入大量的資金，每次進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室都需要作嚴(yán)格的消毒，操作成本較高，而且人工操作無(wú)法實(shí)現(xiàn)大規(guī)模量產(chǎn)，難以滿足日益增長(zhǎng)的需求。

目前已經(jīng)存在通過(guò)輸液管路輸送營(yíng)養(yǎng)液的裝置，無(wú)需建造無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室，但給料的數(shù)量由操作人員根據(jù)經(jīng)驗(yàn)預(yù)估得到，并通過(guò)人工操作控制，受主觀因素的干擾較大，帶來(lái)污染風(fēng)險(xiǎn)的同時(shí)，還難以準(zhǔn)確匹配細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種細(xì)胞制備給料系統(tǒng)，根據(jù)細(xì)胞的實(shí)際生長(zhǎng)情況精確給料，為細(xì)胞提供合適的生長(zhǎng)環(huán)境，具體方案如下：

一種細(xì)胞制備給料系統(tǒng)，包括：

蠕動(dòng)泵，設(shè)置在管路上帶動(dòng)管內(nèi)液體流動(dòng)；

原料袋，用于盛裝營(yíng)養(yǎng)液；

培養(yǎng)罐，內(nèi)部盛裝被培養(yǎng)的細(xì)胞，為細(xì)胞提供生長(zhǎng)環(huán)境；所述培養(yǎng)罐與所述原料袋分別連接在所述蠕動(dòng)泵的兩端；所述原料袋與所述蠕動(dòng)泵、所述培養(yǎng)罐與所述蠕動(dòng)泵之間分別設(shè)置管壓閥；所述蠕動(dòng)泵能夠?qū)⑺鲈洗鼉?nèi)的營(yíng)養(yǎng)液泵送入所述培養(yǎng)罐；

計(jì)數(shù)池，與所述培養(yǎng)罐分別連接于所述蠕動(dòng)泵的兩端，所述計(jì)數(shù)池與所述蠕動(dòng)泵、所述培養(yǎng)罐與所述蠕動(dòng)泵之間分別設(shè)置管壓閥；所述蠕動(dòng)泵能夠?qū)⑺雠囵B(yǎng)罐內(nèi)的細(xì)胞泵送至所述計(jì)數(shù)池；

處理器，信號(hào)連接所述計(jì)數(shù)池，根據(jù)所述計(jì)數(shù)池的計(jì)數(shù)檢測(cè)結(jié)果計(jì)算所述培養(yǎng)罐內(nèi)的細(xì)胞總數(shù)，并根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型控制各管壓閥的開(kāi)閉，控制所述蠕動(dòng)泵將所述原料袋內(nèi)相應(yīng)體積的營(yíng)養(yǎng)液泵送至所述培養(yǎng)罐。

可選地，所述計(jì)數(shù)池包括兩塊緊貼的透明蓋板，兩個(gè)透明蓋板之間預(yù)留僅容許一層細(xì)胞經(jīng)過(guò)的通道；還包括用于拍攝透明蓋板的顯微拍照裝置，所述顯微拍照裝置信號(hào)連接所述處理器。

可選地，所述計(jì)數(shù)池的透明蓋板上劃分多個(gè)面積為0.01cm²的計(jì)數(shù)格；按以下公式計(jì)算給料數(shù)量：

細(xì)胞懸液細(xì)胞數(shù)/ml＝數(shù)次計(jì)數(shù)平均值×計(jì)數(shù)區(qū)體積換算比×稀釋倍數(shù)

細(xì)胞總數(shù)＝細(xì)胞懸液細(xì)胞數(shù)/ml×細(xì)胞懸液體積

所需給料體積＝細(xì)胞總數(shù)÷細(xì)胞最適生長(zhǎng)密度

所述計(jì)數(shù)區(qū)體積換算比為10000。

可選地，所述蠕動(dòng)泵和所述原料袋之間設(shè)置第一傳感器，所述第一傳感器為氣泡傳感器；所述第一傳感器信號(hào)連接于所述處理器；所述原料袋的出液管路上設(shè)置過(guò)濾除菌濾器。

可選地，還包括通過(guò)所述蠕動(dòng)泵與所述培養(yǎng)罐連通的中轉(zhuǎn)袋，以及通過(guò)所述蠕動(dòng)泵與所述培養(yǎng)罐連通的細(xì)胞袋；所述中轉(zhuǎn)袋與所述蠕動(dòng)泵、所述細(xì)胞袋與所述蠕動(dòng)泵之間分別設(shè)置管壓閥。

可選地，所述中轉(zhuǎn)袋和所述細(xì)胞袋之間相互連通，在兩者間的管路上設(shè)置第二傳感器和磁分選裝置，所述第二傳感器為氣泡傳感器，信號(hào)連接于所述處理器。

可選地，連接所述計(jì)數(shù)池的管路上設(shè)置第三傳感器，所述第三傳感器為氣泡傳感器，信號(hào)連接于所述處理器。

可選地，所述蠕動(dòng)泵和所述培養(yǎng)罐之間設(shè)置第四傳感器組；所述第四傳感器組包括顏色傳感器和氣泡傳感器，信號(hào)連接于所述處理器，能夠根據(jù)顏色判斷細(xì)胞種類(lèi)。

可選地，連接所述蠕動(dòng)泵的管路上設(shè)置第五傳感器，所述第五傳感器為壓力傳感器，信號(hào)連接于所述處理器，用于檢測(cè)管路內(nèi)壓力變化；還包括通過(guò)管壓閥連接于所述培養(yǎng)罐的氣罐，用于向所述培養(yǎng)罐輸送生長(zhǎng)氣體；所述氣罐的管路上連接疏水通氣濾器。

可選地，還包括與所述細(xì)胞袋并聯(lián)于所述蠕動(dòng)泵的廢料袋，所述蠕動(dòng)泵將所述培養(yǎng)罐內(nèi)的廢料泵送到所述廢料袋中；還包括分別連通所述培養(yǎng)罐和所述細(xì)胞袋的備用袋；所述廢料袋的管路上連接單向止回閥和疏水通氣濾器。

本發(fā)明提供了一種細(xì)胞制備給料系統(tǒng)，其包括蠕動(dòng)泵、原料袋、培養(yǎng)罐、計(jì)數(shù)池、處理器等裝置，蠕動(dòng)泵設(shè)置在管路上，通過(guò)擠壓轉(zhuǎn)動(dòng)帶動(dòng)管內(nèi)液體流動(dòng)，是整個(gè)系統(tǒng)的動(dòng)力裝置，不與管內(nèi)液體接觸；原料袋用于盛裝營(yíng)養(yǎng)液，培養(yǎng)罐內(nèi)部盛裝被培養(yǎng)的細(xì)胞，為細(xì)胞提供生長(zhǎng)環(huán)境；培養(yǎng)罐與原料袋分別連接在蠕動(dòng)泵的兩端；原料袋與蠕動(dòng)泵、培養(yǎng)罐與蠕動(dòng)泵之間分別設(shè)置管壓閥；通過(guò)蠕動(dòng)泵將原料袋內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)液泵送入培養(yǎng)罐；計(jì)數(shù)池與培養(yǎng)罐分別連接于蠕動(dòng)泵的兩端，計(jì)數(shù)池與蠕動(dòng)泵、培養(yǎng)罐與蠕動(dòng)泵之間分別設(shè)置管壓閥；蠕動(dòng)泵能夠?qū)⑴囵B(yǎng)罐內(nèi)的細(xì)胞泵送至計(jì)數(shù)池；處理器信號(hào)連接計(jì)數(shù)池，根據(jù)計(jì)數(shù)池的計(jì)數(shù)檢測(cè)結(jié)果計(jì)算培養(yǎng)罐內(nèi)的細(xì)胞總數(shù)，并根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型控制各管壓閥的開(kāi)閉，控制蠕動(dòng)泵將原料袋內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)液泵送至培養(yǎng)罐。

蠕動(dòng)泵與管壓閥均不與管路內(nèi)部接觸，從而避免了細(xì)胞受到污染；通過(guò)計(jì)數(shù)池檢測(cè)得到培養(yǎng)罐內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量，由處理器控制使適量的營(yíng)養(yǎng)液從原料袋泵送到培養(yǎng)罐內(nèi)，根據(jù)細(xì)胞的實(shí)際生長(zhǎng)情況精確給料，可以避免人工操作導(dǎo)致送料過(guò)量或不足的問(wèn)題，為細(xì)胞提供合適的生長(zhǎng)環(huán)境。

附圖說(shuō)明

為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，顯而易見(jiàn)地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本申請(qǐng)細(xì)胞制備給料系統(tǒng)的一種管路結(jié)構(gòu)圖。

其中包括：

蠕動(dòng)泵1、原料袋2、過(guò)濾除菌濾器21、培養(yǎng)罐3、氣罐31、疏水通氣濾器32、計(jì)數(shù)池4、備用袋5、第一傳感器61、第二傳感器62、第三傳感器63、第四傳感器組64、第五傳感器65、中轉(zhuǎn)袋7、細(xì)胞袋8、廢料袋81、單向止回閥82、磁分選裝置9。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明的核心在于提供一種細(xì)胞制備給料系統(tǒng)，根據(jù)細(xì)胞的實(shí)際生長(zhǎng)情況精確給料，為細(xì)胞提供合適的生長(zhǎng)環(huán)境。

為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面將結(jié)合附圖及具體的實(shí)施方式，對(duì)本申請(qǐng)的細(xì)胞制備給料系統(tǒng)進(jìn)行詳細(xì)的介紹說(shuō)明。

如圖1所示，為本申請(qǐng)細(xì)胞制備給料系統(tǒng)的一種管路結(jié)構(gòu)圖，該系統(tǒng)包括蠕動(dòng)泵1、原料袋2、培養(yǎng)罐3、計(jì)數(shù)池4、處理器等結(jié)構(gòu)，蠕動(dòng)泵1設(shè)置在管路上帶動(dòng)管內(nèi)液體流動(dòng)，蠕動(dòng)泵是一種通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)擠壓非接觸的方式迫使軟管中的液體朝一個(gè)方向流動(dòng)的裝置，蠕動(dòng)泵1可保持管路內(nèi)液體潔凈，不產(chǎn)生污染；原料袋2用于盛裝營(yíng)養(yǎng)液；培養(yǎng)罐3的內(nèi)部盛裝被培養(yǎng)的細(xì)胞，為細(xì)胞提供生長(zhǎng)環(huán)境，具有合適的溫度、營(yíng)養(yǎng)、氣體等條件；培養(yǎng)罐3與原料袋2分別連接在蠕動(dòng)泵1的兩端，培養(yǎng)罐3與原料袋2的管路連通，原料袋與蠕動(dòng)泵1之間設(shè)置管壓閥，培養(yǎng)罐3與蠕動(dòng)泵1之間設(shè)置管壓閥；管壓閥是一種通過(guò)夾緊和松開(kāi)軟管的方式來(lái)控制管內(nèi)液體是否流動(dòng)的閥門(mén)，不與管內(nèi)液體接觸，本申請(qǐng)中以v1～v21表示管壓閥；打開(kāi)管壓閥，蠕動(dòng)泵1能夠?qū)⒃洗?內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)液泵送入培養(yǎng)罐3，以供細(xì)胞生長(zhǎng)所需。

計(jì)數(shù)池4與培養(yǎng)罐3分別連接于蠕動(dòng)泵1的兩端，計(jì)數(shù)池4與蠕動(dòng)泵1之間設(shè)置管壓閥，培養(yǎng)罐3與蠕動(dòng)泵1之間設(shè)置管壓閥；打開(kāi)管壓閥，蠕動(dòng)泵1能夠?qū)⑴囵B(yǎng)罐3內(nèi)的細(xì)胞泵送至計(jì)數(shù)池4；計(jì)數(shù)池4檢測(cè)得到樣本中的細(xì)胞數(shù)量，處理器信號(hào)連接計(jì)數(shù)池4，計(jì)數(shù)池4將信號(hào)傳遞至處理器，根據(jù)計(jì)數(shù)池4的計(jì)數(shù)檢測(cè)結(jié)果，通過(guò)樣本的體積與培養(yǎng)罐3內(nèi)的培養(yǎng)液體積的相對(duì)關(guān)系計(jì)算培養(yǎng)罐3內(nèi)的細(xì)胞總數(shù)；得到細(xì)胞當(dāng)前的數(shù)量后，并根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型控制各管壓閥的開(kāi)閉，控制蠕動(dòng)泵1將原料袋2內(nèi)的特定體積的營(yíng)養(yǎng)液泵送至培養(yǎng)罐3。

本申請(qǐng)通過(guò)實(shí)時(shí)檢測(cè)的方式確定營(yíng)養(yǎng)液的輸送量，使?fàn)I養(yǎng)液的含量恰好滿足細(xì)胞生長(zhǎng)系列所需，維護(hù)細(xì)胞正常生長(zhǎng)繁殖。細(xì)胞數(shù)量檢測(cè)的過(guò)程均在管路內(nèi)部完成，不需取出到外部，與外界不發(fā)生接觸，因此避免出現(xiàn)污染，不需要單獨(dú)設(shè)置無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室，降低生長(zhǎng)的成本。

本申請(qǐng)采用灌流式細(xì)胞培養(yǎng)，將細(xì)胞和培養(yǎng)基一起加入反應(yīng)器后，在細(xì)胞增長(zhǎng)和產(chǎn)物形成過(guò)程中，不斷地將部分培養(yǎng)基取出，同時(shí)又連續(xù)不斷地灌注新的培養(yǎng)基的細(xì)胞培養(yǎng)方式。這樣培養(yǎng)的細(xì)胞處于比較穩(wěn)定的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境中，有害的代謝廢物濃度積累較低，細(xì)胞密度更高，細(xì)胞狀態(tài)更健康，細(xì)胞培養(yǎng)周期較長(zhǎng)以及對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境能夠更好地控制，還可以用于生產(chǎn)獲得大量的細(xì)胞分泌型蛋白質(zhì)藥物或抗體。

在上述方案的基礎(chǔ)上，本申請(qǐng)中的計(jì)數(shù)池4包括兩塊緊貼的透明蓋板，兩個(gè)透明蓋板之間預(yù)留僅容許一層細(xì)胞經(jīng)過(guò)的通道，兩透明蓋板之間保持密封，僅由兩端與管路連接；計(jì)數(shù)池4還包括用于拍攝透明蓋板的顯微拍照裝置，通過(guò)顯微拍照裝置信號(hào)連接處理器，將拍攝的圖像信號(hào)傳遞給處理器作判斷，得到被測(cè)樣本中所含的細(xì)胞數(shù)量?？刹捎帽容^法判斷，將圖像與沒(méi)有細(xì)胞的圖像進(jìn)行比較，細(xì)胞處產(chǎn)生陰影，計(jì)算陰影的數(shù)量得到細(xì)胞總數(shù)。因透明蓋板僅可通過(guò)一層細(xì)胞，因此視野內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量即為當(dāng)前樣本的細(xì)胞數(shù)量，不存在相互遮擋的問(wèn)題。

更進(jìn)一步，在計(jì)數(shù)池4的透明蓋板上劃分多個(gè)面積為0.01cm²的計(jì)數(shù)格，以0.1×0.1cm的正方形網(wǎng)格為佳，按以下公式計(jì)算給料數(shù)量：

細(xì)胞懸液細(xì)胞數(shù)/ml＝數(shù)次計(jì)數(shù)平均值×計(jì)數(shù)區(qū)體積換算比×稀釋倍數(shù)；

細(xì)胞總數(shù)(個(gè))＝細(xì)胞懸液細(xì)胞數(shù)/ml×細(xì)胞懸液體積(ml)

所需給料體積(ml)＝細(xì)胞總數(shù)(個(gè))÷細(xì)胞最適生長(zhǎng)密度(個(gè)/ml)

上述計(jì)算式中計(jì)數(shù)區(qū)體積換算比為10000，細(xì)胞懸液細(xì)胞數(shù)/ml是指每升細(xì)胞懸液中所含的細(xì)胞數(shù)。

蠕動(dòng)泵1和原料袋2之間設(shè)置第一傳感器61，第一傳感器61為氣泡傳感器，氣泡傳感器用于判定管路中流動(dòng)的是液體還是空氣；第一傳感器61信號(hào)連接于處理器。原料袋2的出液管路上設(shè)置過(guò)濾除菌濾器21，也即在管壓閥v1～v5所在的管路上設(shè)置過(guò)濾除菌濾器，本發(fā)明附圖所示僅在管壓閥v1、v3、v4、v5與原料袋2之間設(shè)置了過(guò)濾除菌濾器21。

還包括中轉(zhuǎn)袋7和細(xì)胞袋8，中轉(zhuǎn)袋7通過(guò)蠕動(dòng)泵1與培養(yǎng)罐3連通，細(xì)胞袋8通過(guò)蠕動(dòng)泵1與培養(yǎng)罐3連通；中轉(zhuǎn)袋7用于暫時(shí)存儲(chǔ)細(xì)胞，細(xì)胞袋8用于存儲(chǔ)最終所需的目的細(xì)胞，蠕動(dòng)泵1可將培養(yǎng)罐3內(nèi)的細(xì)胞分別泵送到中轉(zhuǎn)袋7或細(xì)胞袋8中。中轉(zhuǎn)袋7與蠕動(dòng)泵1之間設(shè)置管壓閥，細(xì)胞袋8與蠕動(dòng)泵1之間設(shè)置管壓閥，用于控制管路的通斷。

中轉(zhuǎn)袋7和細(xì)胞袋8之間相互連通，中轉(zhuǎn)袋7中的細(xì)胞可直接送入細(xì)胞袋8中，在中轉(zhuǎn)袋7和細(xì)胞袋8間的管路上設(shè)置第二傳感器62和磁分選裝置9，第二傳感器62為氣泡傳感器，信號(hào)連接于處理器。磁分選裝置9為一種電磁元件，通電產(chǎn)生磁場(chǎng)，當(dāng)帶有磁性的細(xì)胞經(jīng)過(guò)時(shí)會(huì)被吸附，其他細(xì)胞流過(guò)，當(dāng)無(wú)其他細(xì)胞后解除磁場(chǎng)，磁性細(xì)胞就可以流動(dòng)被收集，因此中轉(zhuǎn)袋7可用于盛裝具有磁性的細(xì)胞。

連接計(jì)數(shù)池4的管路上設(shè)置第三傳感器63，第三傳感器63為氣泡傳感器，信號(hào)連接于處理器。

蠕動(dòng)泵1和培養(yǎng)罐3之間設(shè)置第四傳感器組64；第四傳感器組64包括顏色傳感器和氣泡傳感器，圖中所示上方為氣泡傳感器，下方為顏色傳感器，信號(hào)連接于處理器，通過(guò)顏色傳感器判斷細(xì)胞種類(lèi)。培養(yǎng)罐3的頂部呈錐形，開(kāi)口位于錐頂，排出細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)罐高速旋轉(zhuǎn)，種類(lèi)不同的細(xì)胞在離心力的作用下處于不同位置，細(xì)胞從培養(yǎng)罐3中流出時(shí)，最內(nèi)層的液體先流出，越靠外側(cè)的液體越晚流出，兩種細(xì)胞的顏色不同，可根據(jù)顏色判斷是哪種細(xì)胞，紅細(xì)胞為紅色，白細(xì)胞為白色，血漿為黃色，鹽水和分離液為透明色，從而改變管壓閥的通斷，以收集純度較高的細(xì)胞。

連接蠕動(dòng)泵1的管路上設(shè)置第五傳感器65，第五傳感器65為壓力傳感器，信號(hào)連接于處理器，用于檢測(cè)管路內(nèi)壓力變化，根據(jù)管路內(nèi)液體壓力變化確定各管壓閥開(kāi)啟正確。

還包括通過(guò)管壓閥連接于培養(yǎng)罐3的氣罐31，用于向培養(yǎng)罐3輸送生長(zhǎng)氣體，為培養(yǎng)罐3提供合適的含量的氣體；氣罐31的管路上連接疏水通氣濾器32，如圖所示，在氣罐31與管壓閥v16之間設(shè)置疏水通氣濾器32。

還包括與細(xì)胞袋8并聯(lián)于蠕動(dòng)泵1的廢料袋81，蠕動(dòng)泵1將培養(yǎng)罐3內(nèi)的廢料泵送到廢料袋81中，培養(yǎng)罐3的廢料排出后可提供新鮮的營(yíng)養(yǎng)液。還包括分別連通培養(yǎng)罐3和細(xì)胞袋8的備用袋5，備用袋5與中轉(zhuǎn)袋7的作用相似，可用于暫時(shí)存儲(chǔ)細(xì)胞。廢料袋81的管路上連接單向止回閥82和疏水通氣濾器32，如圖所示，在廢料袋81與管壓閥v17之間設(shè)置單向止回閥82，在廢料袋81與外界連通的位置設(shè)置疏水通氣濾器32。

細(xì)胞制備給料系統(tǒng)的自動(dòng)化給料操作具體實(shí)施過(guò)程如下：

a、在處理器和內(nèi)部控制分系統(tǒng)作用下，開(kāi)啟細(xì)胞計(jì)數(shù)操作，先運(yùn)轉(zhuǎn)培養(yǎng)罐3將細(xì)胞混勻，然后開(kāi)啟蠕動(dòng)泵1和管壓閥v8、v13、v18，采集部分混勻的細(xì)胞樣品，進(jìn)入管路系統(tǒng)流經(jīng)計(jì)數(shù)池4，啟動(dòng)設(shè)備的質(zhì)量檢測(cè)功能，進(jìn)行包括細(xì)胞計(jì)數(shù)，獲得樣本的細(xì)胞密度數(shù)據(jù)，按照細(xì)胞的培養(yǎng)總體積計(jì)算出細(xì)胞總數(shù)，然后根據(jù)不同類(lèi)型細(xì)胞所設(shè)置的生長(zhǎng)最適密度參數(shù)，計(jì)算出需要給料的體積。

此處獲得的細(xì)胞密度數(shù)據(jù)和設(shè)備內(nèi)設(shè)的細(xì)胞生長(zhǎng)最適密度參數(shù)進(jìn)行對(duì)比，當(dāng)細(xì)胞密度數(shù)據(jù)大于設(shè)置的最適密度參數(shù)，才進(jìn)行換液和給料的下一步操作，否則,則維持原態(tài)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，為的是將培養(yǎng)液的作用最大化，避免浪費(fèi)。

b、運(yùn)轉(zhuǎn)培養(yǎng)罐3將細(xì)胞和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)耗盡的培養(yǎng)液進(jìn)行分離，離心力600g，5-10分鐘，然后啟動(dòng)蠕動(dòng)泵1和管壓閥v8、v11、v12、v17，將廢棄培養(yǎng)液轉(zhuǎn)至廢液袋81中。

c、啟動(dòng)蠕動(dòng)泵1和管壓閥v5、v15、v14，將原料袋2中的新鮮培養(yǎng)液添加至培養(yǎng)罐3，運(yùn)轉(zhuǎn)培養(yǎng)罐3將細(xì)胞混勻，然后提供維持細(xì)胞生長(zhǎng)的溫濕度和氣體環(huán)境繼續(xù)培養(yǎng)。

對(duì)所公開(kāi)的實(shí)施例的上述說(shuō)明，使本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)或使用本發(fā)明。對(duì)這些實(shí)施例的多種修改對(duì)本領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員來(lái)說(shuō)將是顯而易見(jiàn)的，本文中所定義的一般原理，可以在不脫離本發(fā)明的精神或范圍的情況下，在其它實(shí)施例中實(shí)現(xiàn)。因此，本發(fā)明將不會(huì)被限制于本文所示的這些實(shí)施例，而是要符合與本文所公開(kāi)的原理和新穎特點(diǎn)相一致的最寬的范圍。