技術(shù)特征:
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種斜生柵藻原生質(zhì)體制備的方法,收集培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的斜生柵藻藻液,用超聲波振蕩器振蕩,離心收集斜生柵藻細(xì)胞,用BG11培養(yǎng)基重懸得到斜生柵藻細(xì)胞懸液;采用從大型溞中提取的混合消化酶液,加入少量纖維素酶、果膠酶和高滲溶劑甘露醇和膜穩(wěn)定劑CaCl2,與斜生柵藻細(xì)胞懸液混合,酶解消化斜生柵藻的細(xì)胞壁,獲取原生質(zhì)體。本發(fā)明方法應(yīng)用的大型溞混合消化酶活力高,能在短時(shí)間,溫和的條件下酶解斜生柵藻的細(xì)胞壁。通過(guò)該方法制備原生質(zhì)體的效率可達(dá)70%,且原生質(zhì)體活性較強(qiáng),再生能力強(qiáng)。本發(fā)明為以斜生柵藻為目標(biāo)的細(xì)胞融合及基因操作提供技術(shù)支持,亦可為研究微藻細(xì)胞的內(nèi)吞作用提供可靠的原材料。
技術(shù)研發(fā)人員:王長(zhǎng)海;何梅琳;顏永全;宋虹;顧傳坤
受保護(hù)的技術(shù)使用者:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:2017.08.22
技術(shù)公布日:2017.10.27