本發(fā)明涉及青杠菌多糖的提取，具體涉及一種青杠菌多糖的提取方法及其應(yīng)用。屬于食品加工領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

青杠菌是一種稀有、昂貴的野生保健真菌。青杠菌歷來被人們譽為“菌中之王”、“山中之珍”。其品質(zhì)可以與松茸媲美，食用歷史悠久。其營養(yǎng)價值和美味不亞于野生猴頭，靈芝的地位。野生青杠菌營養(yǎng)豐富，味道鮮美，深受人們的喜愛。

青杠菌中有效成分包括蛋白質(zhì)、氨基酸、多種維生素、碳水化全物、多糖等，而多糖是除病毒以外一切有生命的有機體必不可少的組成成分，與維持生物機能密切相關(guān)，和蛋白質(zhì)、脂類、核酸一起成為構(gòu)成生命的四大基本物質(zhì)。多糖不僅是細(xì)胞的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和能源物質(zhì)，更是具有多種生理功能的生物活性物質(zhì)，在生命現(xiàn)象中參與了細(xì)胞的各種活動。并且青杠菌多糖具有抗腫瘤、抗凝血、降血糖、提高機體免疫功能等生理活性。

傳統(tǒng)多糖一般采用水提法、酸堿溶液提取法等，得率較低，能量消耗大，而且由于提取溫度高，在提取的過程中容易造成多糖降解，多糖活性降低。超聲波技術(shù)目前已被廣泛應(yīng)用到植物活性成分的提取中，超聲波的振動能產(chǎn)生強烈的空化及攪拌作用，加速有效成分溶入溶劑，提高植物有效成分的得率。但目前利用超聲波輔助熱水浸提取青杠菌多糖技術(shù)目前還未有報道。

近幾年，對于食用菌在食品加工中的應(yīng)用逐漸增多，如黑木耳餅干（cn106070475a）、秀珍菇餅干（cn106472637a）、猴頭菇餅干（cn106577920a）、銀耳酸奶（cn105558031a）等，但都集中在一些大眾食用菌，且是直接利用食用菌本身，而對于食用菌多糖在食品工業(yè)中的應(yīng)用還較少。cn104886551a中是針對青杠菌本身制備即食食品，迄今為止，青杠菌多糖在食品開發(fā)中的研究還未見報道。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，本發(fā)明的目的在于提供一種青杠菌多糖的提取方法,解決了青杠菌多糖提取過程中降解的問題，以及提取活性和效率的問題。

本發(fā)明還提供了利用青杠菌多糖制備含有青杠菌多糖的餅干和飲料及其制備方法，解決了食用餅干和飲料無營養(yǎng)保健作用和口感不佳的問題；以及提供了含有青杠菌多糖餅干優(yōu)化加工工藝，解決了營養(yǎng)成份流失的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：一種青杠菌多糖的提取方法，其特征在于，包括如下步驟：

1）預(yù)處理：青杠菌烘干至恒重，超微植物粉碎機打粉，備用；

2）熱水超聲波浸提：準(zhǔn)確稱取步驟1）獲得的青杠菌粉末和蒸餾水，其中料液比1:20～1:40，置于50°c的超聲波清洗機內(nèi)超聲浸提，超聲波的功率為400～600w，提取時間為40～60min；

3）蒸發(fā)濃縮：將步驟2）得到的青桿菌溶液4000r/min下離心12min，取上清液濃縮，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)濃縮至原體積的1/5，所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的轉(zhuǎn)速為80～120r/min，溫度為50～60℃，蒸發(fā)時間10～13min；

4）乙醇沉淀：將步驟3）獲得的濃縮液中加入三倍體積的95%乙醇，4℃靜置過夜；

5）離心收集：將步驟4）過夜沉淀的濃縮液4000r/min，離心15min，棄上層溶液，沉淀即為青杠菌粗多糖。

進一步，用上述方法提取的青杠菌多糖制作含有青杠菌多糖的餅干，所述含有青杠菌多糖餅干由下列原料加工而成：面粉40～60g，黃油15～35g，糖粉4.5～22.5g，蛋液3～15g，青杠菌多糖0.4～0.6g；

所述含由青杠菌多糖餅干的制備方法，包括如下步驟：

(1)稱取黃油，40°c水浴加熱黃油，再稱取糖粉和蛋液，依次加入黃油中，用打蛋器攪拌均勻，所述黃油：糖粉：蛋液的質(zhì)量比為2.5：1.3：1；

(2)稱取面粉和青杠菌多糖，面粉和青杠菌多糖質(zhì)量比為100：1，并將其篩入步驟（1）得到的混合液中，用筷子上下攪拌均勻，用手揉成光滑的面團裝入保鮮袋；

(3)用搟面杖將步驟（2）獲得的面團搟成厚度為0.3cm，放入冰箱-20°c冷凍20min，至面團僵硬；

(4)將步驟（3）獲得的面團去掉保鮮袋，并在面坯上用叉子在搟好的面片上扎一些小孔，并用餅干模具將其造型制成一定形狀的餅干胚；

(5)將步驟（4）得到的餅干胚放入烤箱中進行烘烤，烘烤溫度為150～160°c，烘培時間為8～12min，自然冷卻、包裝。

進一步，用上述方法提取的青杠菌多糖制作含有青杠菌多糖的飲料，所述含有青杠菌多糖飲料由下列原料加工而成：青杠菌多糖0.4～0.6g、白砂糖4～8g、檸檬酸0.2～0.5g、黃原膠0.02～0.05g；

所述含有青杠菌多糖的飲料的制備方法，包括如下步驟：

①分別取青杠菌多糖0.4～0.6g、白砂糖4～8g、檸檬酸0.2～0.5g、黃原膠0.02～0.05g，加入100ml熱水，充分混勻并溶解；②將混合均勻的料液通過高壓均質(zhì)機，工作壓力為20～25mpa；③將均質(zhì)好的飲料進行裝灌，然后置于100℃沸水中殺菌20min，最后分段冷卻，以免造成灌裝容器爆裂。

相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有如下有益效果：

1、本發(fā)明利用超聲波熱水浸提法來提取青杠菌多糖，首先使用超聲波技術(shù)對青杠菌粉末進行前期處理，再用熱水浸提，可使青杠菌多糖充分溶出，但水浴溫度、超聲功率及超聲時間對不同多糖的提取率影響很大，本發(fā)明經(jīng)過大量實驗對關(guān)鍵因素進行優(yōu)化，提高了青杠菌多糖的提取率，其提取率達9.4%。另外本發(fā)明在50°c條件下浸提，所以大大的減少了青杠菌多糖的降解和活性降低。

2、青杠菌多糖具有較好的生物活性，含有青杠菌多糖餅干和飲料等產(chǎn)品，均具有口感良好，營養(yǎng)豐富，且富有青杠菌獨特的香氣，同時也具有一定的保健價值，容易被消費者喜歡和接受。

3、本發(fā)明青杠菌多糖餅干的制備方法，在成型和焙烤采用-20°c冷凍，一方面，冷凍會造成面團失水，造成質(zhì)構(gòu)發(fā)生改變，失水越多，青杠菌多糖濃度越高，會使餅干口感清脆和具咀嚼性；另外一方面，為了避免青杠菌多糖降解生成低分子量的碳水化合物和單糖，失去青杠菌多糖原有的生理活性和獨有的香氣。但要達到本發(fā)明以下指標(biāo)：形態(tài)上不收縮，不起泡，凹底少；色澤上色澤均勻，有光澤；滋味上口感松脆，不黏牙，帶有青杠菌多糖特有的香味；組織上斷面結(jié)構(gòu)呈細(xì)密多孔狀。本發(fā)明需要對冷凍溫度（-20°c）和冷凍時間（20min）進行了嚴(yán)格控制。

4、該發(fā)明制備的含有的青杠菌多糖食品的推廣和應(yīng)用，為含青杠菌多糖食品的工業(yè)化生產(chǎn)和青杠菌深加工食品的開發(fā)奠定理論基礎(chǔ)，提高青杠菌的附加值，創(chuàng)造良好的經(jīng)濟效益，也打破青杠菌多糖在食品開發(fā)中零報道的現(xiàn)狀。本發(fā)明發(fā)揮青杠菌多糖的應(yīng)用，應(yīng)用到人們?nèi)粘１阌跀y帶的餅干和飲料中，而且制備工藝簡單，值得推廣。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步詳細(xì)說明，下述實施例中所用原料如無特殊說明，即為普通市售。

實施例1：青杠菌多糖的提取流程及方法

1、流程：青杠菌→篩選→烘干至恒重→粉碎→準(zhǔn)確稱量→復(fù)水→熱水超聲波浸提→離心→濃縮→醇沉→離心→干燥→青杠菌多糖

將青杠菌烘干至恒重，超微植物粉碎機打粉，備用。稱取青杠菌粉末5.00g于燒杯中，再加入150ml蒸餾水。將燒杯置于50°c的超聲波清洗機內(nèi)超聲浸提，其中超聲波的功率為500w，提取時間為35min，取出后將青桿菌溶液4000r/min下離心12min，取上清液濃縮，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)濃縮至原體積的1/5，其中蒸發(fā)儀的轉(zhuǎn)速為100r/min，溫度為55℃，蒸發(fā)10min；向濃縮液中加入三倍體積的95%乙醇，4°c靜置過夜。最后將過夜沉淀的濃縮液4000r/min，離心15min，棄上層溶液，沉淀即為青杠菌多糖。

本發(fā)明解決了青杠菌多糖提取過程中降解的問題，以及提取活性和效率的問題。采用本實施例青杠菌多糖的提取率達9.4%，當(dāng)青杠菌多糖濃度為800μg/ml時，對?oh清除率達46.24%，對o2^－?的清除率為48.75%。

實施例2：含有青杠菌多糖餅干的制備流程及方法

1、流程：黃油軟化→加糖→蛋液→預(yù)混→調(diào)粉（低筋面粉、青杠菌多糖）→冷凍→成型→焙烤→成品→整理

2、含有青杠菌多糖餅干的制備方法，包括以下步驟：

(1)稱取黃油22.5g，40°c水浴加熱黃油，同時用手動打蛋器打至黃油顏色變淺，細(xì)膩均勻即可，不需要打發(fā)。再稱取糖粉11.5g放入黃油中，40°c水浴加熱，攪拌混合液體，至糖粉融化，二者融合后取出。再加入蛋液9g，其中將全蛋液分次加入，邊加蛋液邊用打蛋器攪拌混合液。

(2)稱取面粉50g和青杠菌多糖0.5g，并將其篩入步驟（1）得到的混合液中，用筷子上下攪拌均勻，用手揉成光滑的面團裝入保鮮袋，注意不要過度揉以免起筋。

(3)用搟面杖將步驟（2）獲得的面團搟成厚度為0.3cm，放入冰箱-20°c冷凍20min，至面團僵硬。

(4)將步驟（3）獲得的面團去掉保鮮袋，并在面坯上用叉子在搟好的面片上扎一些小孔，這樣有助于餅干的蓬松和起酥。用餅干模具將其造型制成厚薄均勻、形態(tài)完整、表面光滑的餅干胚，放在鋪好油紙的烤盤里。

(5)將步驟（4）得到的餅干胚放入烤箱中進行烘烤，烘烤溫度為160°c，烘培時間為9min，自然冷卻至45°c將形狀不規(guī)則及碎塊去除，然后進行包裝。

采用本實施例方法制的的青杠菌多糖餅干口感良好，營養(yǎng)豐富，且富有青杠菌多糖獨特的香氣，此時餅干的硬度為17.2n，脆性為16.5n。

實施例3：含有青杠菌多糖飲料的制備流程及方法

1、流程：原料調(diào)配→均質(zhì)→灌裝→殺菌→冷卻→成品2、含有青杠菌多糖飲料的制備方法，包括以下步驟：

（1）分別準(zhǔn)確稱取青杠菌多糖0.6g、白砂糖6g、檸檬酸0.3g、黃原膠0.04g，加入100ml熱水中，充分?jǐn)嚢璨⑷芙?。?）將混合均勻的料液通過高壓均質(zhì)機，工作壓力為20mpa。（3）將均質(zhì)好的飲料灌裝好并置于100℃沸水中殺菌20min，然后分段冷卻，以免造成灌裝容器爆裂。

采用該實施例方法制的的青杠菌多糖飲料具有青杠菌特有的香氣，飲料顏色呈紅褐色、透明均勻一致，汁液澄清透明、無懸浮物和沉淀，飲料成品中可溶性固形物7.5%，總酸0.2～0.3%，總糖7%，細(xì)菌總數(shù)≤100cfu/ml；大腸桿菌≤3cfu/100ml，致病菌未檢出，符合國家標(biāo)準(zhǔn)。

最后說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的宗旨和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。