技術特征:
技術總結
本發(fā)明屬于分子生物學領域,具體涉及一種表達PEDV的M+N雙基因的真核表達載體。通過PEDV的M和N基因片段,利用Blunt?M2表達載體,通過無縫克隆技術,構建出表達PEDV的M+N雙基因的真核表達載體,并在工程細胞中表達M+N雙基因融合蛋白。本發(fā)明是直接將純化PEDV的M基因片段連接到Blunt?M2哺乳動物真核表達載體中,不需要連接至單克隆載體PMD19?T中,然后M+Blunt?M2質粒通過同源重組技術,無縫拼接N基因片段,從而獲得M+N雙基因融合表達載體,其質粒通過PCR技術進行鑒定,測序準確后再轉染在細胞中獲得成功表達。因此,該真核表達載體的制備比較其他真核表達技術,具有操作步驟簡單、反應時間短等特點,適合雙基因融合蛋白表達。
技術研發(fā)人員:王隆柏;周倫江;吳學敏;陳秋勇;王晨燕;車勇良;劉玉濤
受保護的技術使用者:福建省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所
技術研發(fā)日:2017.07.17
技術公布日:2017.09.15