本發(fā)明涉及含鹵素二氫楊梅素衍生物，及其在制藥中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

二氫楊梅素是一類重要的黃酮類化合物，具有抗癌、抗氧化、消炎、止咳、抑菌、鎮(zhèn)痛、消脂、抗高血壓等功效，在醫(yī)療保健方面有著廣泛的用途。但是，作為抗癌藥物，二氫楊梅素缺乏靶向性，溶解性和穩(wěn)定性較差，進(jìn)入體內(nèi)容易發(fā)生糖基化作用而導(dǎo)致活性下降，生物利用度降低，限制了其臨床應(yīng)用。

研究表明，將鹵素和甲氧基等親脂性取代基引入黃酮類化合物中，可明顯的增加其通過(guò)膜和組織等的穿透能力，提高它們?cè)谏矬w中的吸收和傳遞速度和藥物所作用靶標(biāo)的濃度，從而顯著提高生物活性。同時(shí)也有利于減少黃酮類化合物在體內(nèi)的糖基化作用。又由于碘（i）是增加有機(jī)化合物生理活性最為有效的官能團(tuán)之一，且已發(fā)現(xiàn)眾多含碘（i）的具有生物活性的化合物，因此本發(fā)明將鹵素引入到二氫楊梅素的a環(huán)上，以期得到高效、低毒的、靶向性好的抗腫瘤活性化合物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種含鹵素二氫楊梅素衍生物，其具有抗癌作用。

本發(fā)明的另一目的在于提供上述含鹵素二氫楊梅素衍生物的制備方法。

本發(fā)明的再一目的在于提供上述含鹵素二氫楊梅素衍生物的用途。

以下對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。

本發(fā)明提供的含鹵素二氫楊梅素衍生物或其藥學(xué)可接受的水合物，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體，結(jié)構(gòu)如下所示：

式中，r各自獨(dú)立為h，?；?，甲基；x各自獨(dú)立為h,br,i,no2；y各自獨(dú)立為h,br,i,no2。

所述的含鹵素二氫楊梅素衍生物具體結(jié)構(gòu)實(shí)例如下：

本發(fā)明還提供了上述化合物的制備方法：

式中，r各自獨(dú)立為h，?；?，甲基；x各自獨(dú)立為h,br,i,no2；y各自獨(dú)立為h,br,i,no2。

本發(fā)明的含鹵素二氫楊梅素衍生物或其藥學(xué)可接受的水合物，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體，具有抗腫瘤作用。

通過(guò)以下實(shí)施例進(jìn)一步舉例說(shuō)明本發(fā)明，但應(yīng)注意本發(fā)明的范圍并不受這些實(shí)施例的任何限制。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

中間體（iia）的制備

n2下，取二氫楊梅素200mg(0.62mmol)，溶于7ml無(wú)水dmf溶液中，加入無(wú)水690mg(3.1mmol)k2co3，緩慢加入710mg(3.1mmol)碘甲烷，40℃反應(yīng)24h，停止反應(yīng)，加1ml醋酸，過(guò)濾，減壓蒸干，回收溶劑，硅膠柱層析純化（v石油醚：v乙酸乙酯=6:1），得到3,7,3’,4’,5’-五甲氧基二氫楊梅素中間體（iia）。收率27.0%。

n2下，取二氫楊梅素200mg(0.62mmol)，溶于7ml無(wú)水dmf溶液中，加入無(wú)水828mg(3.8mmol)k2co3，緩慢加入852mg(3.8mmol)碘甲烷，其它操作同上，得到3,7,9,3’,4’,5’-六甲氧基二氫楊梅素中間體（iib）。收率36.2%。

n2下，取二氫楊梅素200mg(0.62mmol)，加入5ml醋酐中，超聲下混勻，避光放置2天，倒入冰水中研磨，過(guò)濾，干燥，乙酸乙酯-乙醇重結(jié)晶，得到3,7,3’,4’,5’-五乙?；錀蠲匪刂虚g體（iic），收率73%，m.p.163-165℃。

實(shí)施例2

化合物（1）的制備

取390mg(1mmol)中間體（iia）溶于5ml無(wú)水dmf與2mlhoac的混合溶液中，加入325mg(2mmol)icl，45℃反應(yīng)30h，將反應(yīng)液飽和硫代硫酸鈉溶液中，靜置，過(guò)濾，柱層析純化（v甲醇：v二氯甲烷=2:98），得到化合物（1）。收率68%；esi-ms(m/z):516[m]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：3.42(s,3h),3.90(s,3h),3.91(s,6h),3.93(s,3h),4.40(d,j=11hz,1h),4.89(d,j=11hz,1h),6.47(s,1h),6.40(s,2h),11.83(s,1h)。

實(shí)施例3

化合物（2）的制備

用650mg(4mmol)icl代替325mg(2mmol)icl，其它操作同實(shí)施例1，得到化合物（2）。收率71%；esi-ms(m/z):642[m]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：3.42(s,3h),3.90(s,3h),3.91(s,6h),3.93(s,3h),4.40(d,j=11hz,1h),4.89(d,j=11hz,1h),6.41(s,2h),11.84(s,1h)。

實(shí)施例4

化合物（3）的制備

取390mg(1mmol)中間體（iia）溶于5ml二氯甲烷中，加入15mg(0.1mmol)醋酸銀，滴入溶于10ml二氯甲烷中的381mg(1.5mmol)的i2溶液，室溫反應(yīng)36h，柱層析純化（v甲醇：v二氯甲烷=2:98），得到化合物（3）。收率75%；esi-ms(m/z):516[m]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：3.42(s,3h),3.90(s,3h),3.91(s,6h),3.93(s,3h),4.40(d,j=11hz,1h),4.89(d,j=11hz,1h),6.40(s,2h),6.67(s,1h),11.84(s,1h)。

實(shí)施例5

化合物（4）的制備

取530mg(1mmol)中間體（iic）溶于5ml無(wú)水dmf與2mlhoac的混合溶液中，加入325mg(2mmol)icl，45℃反應(yīng)30h，將反應(yīng)液飽和硫代硫酸鈉溶液中，靜置，過(guò)濾，柱層析純化（v甲醇：v二氯甲烷=2:98），得到化合物（4）。收率70%；esi-ms(m/z):656[m]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：2.28(s,6h),2.30(s,6h),2.34(s,3h),4.40(d,j=11hz,1h),4.89(d,j=11hz,1h),6.40(s,2h),6.47(s,1h),11.84(s,1h)。

實(shí)施例6

化合物（5）的制備

用650mg(4mmol)icl代替325mg(2mmol)icl，其它操作同實(shí)施例1，得到化合物（5）。收率76%；esi-ms(m/z):782[m]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：2.28(s,6h),2.30(s,6h),2.34(s,3h),4.40(d,j=11hz,1h),4.89(d,j=11hz,1h),6.40(s,2h),11.84(s,1h)。

實(shí)施例7

化合物（6）的制備

取530mg(1mmol)中間體（iic）溶于5ml二氯甲烷中，加入15mg(0.1mmol)醋酸銀，滴入溶于10ml二氯甲烷中的381mg(1.5mmol)的i2溶液，室溫反應(yīng)36h，柱層析純化（v甲醇：v二氯甲烷=2:98），得到化合物（6）。收率71%；esi-ms(m/z):656[m]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：2.28(s,6h),2.30(s,6h),2.34(s,3h),4.40(d,j=11hz,1h),4.89(d,j=11hz,1h),6.40(s,2h),6.68(s,2h),11.84(s,1h)。

實(shí)施例8

化合物（7）的制備

取404mg(1mmol)中間體（iib）溶于5ml二氯甲烷中，加入15mg(0.1mmol)醋酸銀，滴入溶于10ml二氯甲烷中的381mg(1.5mmol)的i2溶液，室溫反應(yīng)36h，柱層析純化（v甲醇：v二氯甲烷=2:98），得到化合物（7）。收率73%；esi-ms(m/z):530[m]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：3.42(s,3h),3.90(s,3h),3.91(s,6h),3.93(s,6h),4.40(d,j=11hz,1h),4.89(d,j=11hz,1h),6.40(s,2h),6.67(s,2h)。

實(shí)施例9

化合物（8）的制備

取320mg(1mmol)二氫楊梅素溶于50ml四氯化碳中，加入534mg(3mmol)n-溴代丁二酰亞胺，回流反應(yīng)12h，柱層析純化（v甲醇：v二氯甲烷=1:9），得到化合物（8）。收率76%；esi-ms(m/z):478[m]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：4.42(d,j=11hz,1h),4.93(d,j=11hz,1h),5.67(d,j=9hz,1h),6.40(s,2h),8.09(s,1h),8.80(s,2h),10.87(s,1h),11.85(s,1h)。

實(shí)施例10

化合物（9）的制備

取320mg(1mmol)二氫楊梅素溶于10ml醋酸中，加入254mg(1mmol)碘和548mg(1mmol)硝酸鈰銨，50℃反應(yīng)36h，柱層析純化（v甲醇：v二氯甲烷=1:9），得到化合物（9）。收率65%；esi-ms(m/z):365[m]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：4.42(d,j=11hz,1h),4.93(d,j=11hz,1h),5.67(d,j=9hz,1h),6.40(s,2h),6.51(s,1h),8.09(s,1h),8.80(s,2h),10.87(s,1h),11.85(s,1h)。

實(shí)施例11

含鹵素二氫楊梅素衍生物抗腫瘤活性

實(shí)驗(yàn)選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的人急性粒細(xì)胞白血病(hl-60)細(xì)胞、人胃癌(sgc-7901)細(xì)胞、人甲狀腺癌（sw579）細(xì)胞和人結(jié)腸癌(ht-29)細(xì)胞，分別將這些細(xì)胞濃度調(diào)整為5×10⁵/ml，按每孔100μl接種于96孔培養(yǎng)板中。置37℃、5%co2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h后，分別加入10μmol/l的5-氟尿嘧啶（5-fu,陽(yáng)性對(duì)照組）和含鹵素二氫楊梅素衍生物，空白對(duì)照組加等量的培養(yǎng)液。將培養(yǎng)板移入co2孵箱中，在37℃，5%co2及飽和濕度條件下，培養(yǎng)48小時(shí)。在96孔培養(yǎng)板中每孔加入20μlmtt溶液(5g/l)，將培養(yǎng)板移入co2孵箱中，在37℃，5%co2及飽和濕度條件下，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)，終止培養(yǎng)，小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的hl-60細(xì)胞，需離心后棄去孔內(nèi)培養(yǎng)液。每孔加入100μl二甲基亞砜，震搖10min，使紫藍(lán)色結(jié)晶物充分溶解。在酶標(biāo)儀下，以570nm波長(zhǎng)測(cè)定各組的吸光度a值。以mosmann法計(jì)算ic50值。