本發(fā)明涉及生物技術(shù)和植物基因工程技術(shù)領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及一種水稻茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子及其應(yīng)用，該啟動子能夠在水稻轉(zhuǎn)基因調(diào)控體系中驅(qū)動目標(biāo)基因在植株中表達(dá)。

背景技術(shù)：

茉莉酸(jasmonicacid,ja)及其甲酯為主的茉莉酸類是一類新型植物物質(zhì)，是通過硬脂酸途徑產(chǎn)生的脂肪酸衍生物。它廣泛存在于高等植物以及某些真菌之中，植物種子的萌發(fā)、生根和開花、果實成熟、胚胎發(fā)育、氣孔關(guān)閉、色素合成，衰老等各種生長發(fā)育過程均與的作用密切相關(guān)。有研究表明，茉莉酸甲酯(methyljasmonate,meja)可以抑制根的生長。茉莉酸甲酯還可以誘導(dǎo)穎花的開放，這在水稻、高粱、蘇丹草、小麥等作物中都得到了證實。曾曉春和周燮首次報道用0.04～4mmol/l的meja的對秈稻穗浸2min，即可在6～20min內(nèi)誘導(dǎo)漿片膨大而導(dǎo)致大量開穎。誘導(dǎo)開放的穎花數(shù)和的濃度相關(guān)，濃度越大，誘導(dǎo)開放的穎花數(shù)越多。張旺等在雜交粳稻制種中進(jìn)行了應(yīng)用研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，4mmol/l的meja的所處理的小區(qū)制種產(chǎn)量比對照小區(qū)增產(chǎn)幅度在182.3％-357.1％之間。此外，meja在對病、蟲、機(jī)械傷害等的反應(yīng)中可調(diào)節(jié)植物防衛(wèi)基因的表達(dá)，提高植物的抗逆性，并在植物的形態(tài)建成中起重要作用。

茉莉酸甲酯作為逆境信號物質(zhì)可以誘導(dǎo)植物抗逆響應(yīng)，當(dāng)植物受到創(chuàng)傷、昆蟲咬食或病原菌感染后引發(fā)的局部及系統(tǒng)性的傷害信號，產(chǎn)生茉莉酸甲酯。在此誘導(dǎo)過程中，茉莉酸甲酯一方面是在外部起作用，誘導(dǎo)植株間的防御反應(yīng)；另一方面經(jīng)氣孔進(jìn)入植物細(xì)胞，在細(xì)胞質(zhì)中被酯酶水解為茉莉酸(jasmonicacid,ja)。當(dāng)植物受到逆境脅迫時，體內(nèi)的茉莉酸能快速響應(yīng)脅迫信號，與植物體內(nèi)天然受體結(jié)合，受體蛋白激活再作用于相應(yīng)啟動子序列以驅(qū)動下游基因的表達(dá)，并將逆境信號傳遞到未受傷部位進(jìn)一步啟動抗逆基因表達(dá)，以抵御逆境脅迫傷害。

轉(zhuǎn)基因技術(shù)在農(nóng)作物和觀賞植物中的發(fā)展應(yīng)用是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的一個發(fā)展趨勢，實現(xiàn)外源基因在轉(zhuǎn)基因植株中的精確調(diào)控表達(dá)是必要的。誘導(dǎo)型啟動子雖然對外源基因的調(diào)控表達(dá)具有很強(qiáng)的時空控制性，但目前的研究多數(shù)停留在啟動子功能分析及表達(dá)調(diào)控上，且真正能在生產(chǎn)實踐上大規(guī)模使用的更是屈指可數(shù)。另外，很多誘導(dǎo)型啟動子都存在有背景表達(dá)，即在沒有誘導(dǎo)處理時出現(xiàn)較高的背景表達(dá)，影響了誘導(dǎo)調(diào)控的準(zhǔn)確性。目前，研究的受茉莉酸甲酯誘導(dǎo)的啟動子很少，利用該啟動子可以驅(qū)動一些功能基因在植物植株中的表達(dá)，從而提高植株的抗逆性，培育理想的轉(zhuǎn)基因植物品種。

但是，大部分研究人員并沒有意識到受茉莉酸甲酯誘導(dǎo)的啟動子的重要性，即便有人意識到了受茉莉酸甲酯誘導(dǎo)的啟動子，想要從數(shù)以億計的基因中找到受茉莉酸甲酯誘導(dǎo)的啟動子，也如同大海撈針。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種驅(qū)動外源基因在茉莉酸甲酯誘導(dǎo)條件下特異性表達(dá)的啟動子、獲得含有該啟動子序列的轉(zhuǎn)化子以及該啟動子的應(yīng)用。其中，本文中所涉及的“植物”是指單子葉植物，例如水稻、小麥、玉米、大麥、高粱或燕麥，優(yōu)選為水稻。

為了實現(xiàn)上述目的，一方面，本發(fā)明提供一種植物茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子，所述植物茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子包含序列表中seqidno:1所示的dna序列。序列表中seqidno:1所示的dna序列為來源于日本晴水稻(oryzasativalcv.nipponbare)的植物茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子，本文中稱為posmej1或啟動子posmej1。

另一方面，本發(fā)明提供一種植物茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子，其dna序列與seqidno:1所示的dna序列有至少80％同源性；或者，所述植物冷誘導(dǎo)表達(dá)啟動子為在seqidno:1所示的dna序列中添加、取代、插入或缺失一個或一個以上核苷酸生成的突變體或等位基因或衍生物；或者所述植物冷誘導(dǎo)表達(dá)啟動子具有與seqidno:1所示的dna序列雜交的產(chǎn)物。這些植物冷誘導(dǎo)表達(dá)啟動子序列與seqidno:1所示的dna序列具有相同功能，即驅(qū)動目標(biāo)基因在植物中特異性表達(dá)。

另一方面，本發(fā)明還提供一種包含上述植物茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子的表達(dá)盒和重組表達(dá)載體。

再一方面，本發(fā)明提供上述植物茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子在培育轉(zhuǎn)基因植物中的應(yīng)用。所述應(yīng)用包括將本發(fā)明提供的上述植物茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子連接于載體的待表達(dá)的基因序列上游，從而構(gòu)建重組表達(dá)載體，將所述重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到植物細(xì)胞、組織或器官中進(jìn)行培育。

并且優(yōu)選地，所述應(yīng)用可以用于改良植物生長特性，提高植物抗逆性。所述植物為單子葉植物，例如水稻、小麥、玉米、大麥、高粱或燕麥，優(yōu)選為水稻。

本發(fā)明中所提供的啟動子的dna序列為(與序列表中seqidno：1中相同)：

acgtctacccctacttcgcctacgtgggcaaccaggcccagatcgacatcaactacgcgctcttcacgtcgccgggcacggtggtgcaggacggcggcaacgcgtaccagaacctgttcgacgccatcgtcgacacgttctactccgcgctggagagcgccggcgccgggagcgtcccgatcgtggtgtcggagagcgggtggccgtcggccggcggcacggcggcgagcgccggcaacgcgcagacgtacaaccagaacctgatcaaccacgtcgggcaggggacgcccaagaggcccgggagcatcgagacctacattttcgccatgttcaacgagaaccagaagggaggcgacgagacggagaggcacttcggcctcttcaacccggaccagtcgccggcatactccatcaatttctaagaagattgttctgagaagagatcgatcgatgatgaattaaacgtcgatcgatatagatatatacatacacgcgttccatatatagtttgggtttgaataagctttctgcctgcatattgcaaagctcaatgcatgcatgtaacggtgcagagacaaataatatgaacttgaataaagtttaccagacctattttcgcgtagtatgattaatgtctcatacagagcagaccatgtagcatgttatatttctctcactcaacgatgcgcgttaatttgattcagtcgtaacgtacgtgatgatcttagtagtacaaacagtaccgtacgtgttgcacttgctagctagagtgccgtgcactttggcctatgttacggtgtggcgcacactctgacgcgtttgtctcaccgtgcaaaacggcggatgggagctagtgtgcacgtacaccggcctgtccagcaccaagcacgtatacgtacaagtaaaaagtcgaaccaagcaagacagcaacaaaaccgttgctgtttgaggccgccacgaccaaacaacgtcaaaaacaccggaattccacgagccggacaagcaactgctcgattttatcccgtcgtgcacgaacgcatgctcgcgcgcggctaacggtgcatgatgcgtgcgcgcgtcgtccggttttccaagcgagcacgactggtcgacgactggccagtggtggccatcgctagctagcgattgagtcgtcgtcgtcgtatgtgcaaattgtgcatgcgtggttgcgaattaggcttgaccagactgtgacaccgtcccgcgcacgttcatccagttggcttatttaaagcatgtacaatattagactataaaccagctataaacatattttaagaagataaaagaaaaaaataagagcagcgggctacagatttgtaaccacctacagcaaagactttaagatgcatgtgtgtataaatctatgacaggtgggaccagacgttaataatataatactccctccgtttcagcttataagacgttttgactttgatagaagtcaaattatttcaagtttaactaagtttataatatttataatactaaattagtttcatcaaatcaaattgaatatatttttataataaatttgtcttggttaaaaatggtactactttttttttacaaacttaattaaatttaaagcagtttgattttgactaaagtcaaaacgtcttataacttgaaacggaggaagtaaatgtttatagataactattaatattatatgaattggctattaaattgactataaatgatttagagccaatagtgggctaaacttgctcttagcgttaatttagttgggttggctgcgtagtgcggtggcggacacttggtccatcggtagtggagtactactggtggtgtggaaattggaaatcgatcagcaagctgctggagctagtgtcatggatgtgagaagaacgtgtgatgtaccgaactggataatgctacggacttgttgcatgcctaaatctctccatataaatagagagtgatcgtgactagagatacttgcagcagctgcaaaataagcgaagatgactacgcaaggatt

需要說明的是：上述啟動子的dna序列中，序列開頭以下劃線標(biāo)識的序列“acgtctacccctacttcgccta”為獲得啟動子過程中使用的正向引物的留存序列，共計22bp；序列末尾以下劃線標(biāo)識的序列“cgaagatgactacgcaaggatt”為獲得啟動子過程中使用的反向引物的留存序列(該留存序列與反向引物的相應(yīng)序列互補(bǔ))，共計22bp；該dna序列中剩余的部分則為獲自日本晴水稻中的dna序列。需要強(qiáng)調(diào)的是，本文中所提到的啟動子既可以指上述整個dna序列，也可以指去除上述引物留存序列后的dna序列。

綜上所述，本發(fā)明的發(fā)明人從日本晴水稻(oryzasativalcv.nipponbare)中分離克隆得到結(jié)構(gòu)包括轉(zhuǎn)錄起始位點在內(nèi)的2026bp的dna序列，并將其命名為posmej1(序列表中的seqidno:1)。將該序列經(jīng)酶切后連接到植物雙元表達(dá)載體pcambia1381上，獲得相應(yīng)的重組質(zhì)粒(即重組表達(dá)載體)，利用該重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化根癌農(nóng)桿菌菌株eha105，然后用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法進(jìn)行水稻的轉(zhuǎn)化，得到轉(zhuǎn)基因水稻植株。對獲得的轉(zhuǎn)基因水稻進(jìn)行組織化學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因植株在meja誘導(dǎo)處理前，各組織沒有藍(lán)色，而在meja誘導(dǎo)處理后，整體上的gus基因表達(dá)水平相對較高，各個組織顯現(xiàn)藍(lán)色，從而證明該2026bp的序列具有meja誘導(dǎo)表達(dá)活性。

技術(shù)效果

本發(fā)明所克隆的水稻啟動子posmej1是一個meja誘導(dǎo)表達(dá)啟動子。該啟動子可與植物雙元表達(dá)載體連接，用于取代組成型啟動子。該啟動子序列可以用于驅(qū)動靶標(biāo)基因如一些逆境響應(yīng)基因，構(gòu)建重組植物表達(dá)載體，經(jīng)轉(zhuǎn)化后，在meja誘導(dǎo)處理后可驅(qū)動靶標(biāo)基因在植株中特異性表達(dá)，從而提高外源靶標(biāo)基因在植物中的表達(dá)量，增加轉(zhuǎn)基因的效果，而在沒有meja誘導(dǎo)條件下，不影響植株的生長和發(fā)育，從而培育出理想的生物安全性高的轉(zhuǎn)基因植物品種。

附圖說明

以下，結(jié)合附圖來詳細(xì)說明本發(fā)明的實施方案，其中：

圖1為pcambia1381-posmej1表達(dá)載體示意圖，利用posmej1啟動子驅(qū)動位于其下游的gus基因表達(dá)；

圖2對本發(fā)明構(gòu)建pcambia1381-posmej1表達(dá)載體進(jìn)行酶切驗證的結(jié)果示意圖，其中箭頭所指posmej1啟動子片段。

圖3為gus染色分析posmej1的活性。其中，a、b、c分別代表meja處理前的10天轉(zhuǎn)基因植株的根、葉和莖的染色結(jié)果；d、e和f代表meja處理后的根、葉和莖的染色結(jié)果。

圖4為定量pcr分析posmej1啟動子受meja誘導(dǎo)后的活性變化。10天的轉(zhuǎn)基因植株在用2mmol/lmeja后，分別在4h、8h、12h和24h下posmej1啟動子驅(qū)動的gus基因表達(dá)量。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。

下面所涉及的實驗材料均為市售。

1、含有酶切位點的posmej1啟動子的獲得

(1)、引物的設(shè)計

根據(jù)ncbi中提供的水稻品種日本晴(oryzasativalcv.nipponbare)全基因組序列，依據(jù)水稻posmej1基因的序列設(shè)計擴(kuò)增引物，并根據(jù)選用的載體及靶標(biāo)基因的特點，設(shè)計引物的酶切位點。本實施例中以水稻雙元表達(dá)載體pcambia1381(圖1a，來自于pcambia，公開使用載體，安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)部轉(zhuǎn)基因生物產(chǎn)品成分監(jiān)督檢驗測試中心水稻組保存)為例，靶標(biāo)基因為gus基因，具體設(shè)計的引物為：正向引物(seqidno:2)5’端帶psti，酶切位點(ctgcag)，反向引物(seqidno:3)5’端帶bamhi，酶切位點(ggatcc)，引物序列如下：

正向引物：ctgcagacgtctacccctacttcgcctapsti

反向引物：ggatccaatccttgcgtagtcatcttcgbamhi(2)、啟動子的克隆

以水稻基因組dna為模板，采用kod高保真聚合酶進(jìn)行pcr擴(kuò)增。反應(yīng)體系(50μl)如下。擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行1％的瓊脂糖凝膠電泳。

(3)、加ploya及連接t載體

回收pcr產(chǎn)物，為其加上polya尾并連接t載體，獲得克隆載體。

加a體系：3.175μl回收產(chǎn)物和1.825μl的加a混合物(5×taqbuffer2μl，25mmmgcl20.5μl，100mmdatp0.5μl，taqpolymerase0.25μl)置于72℃，反應(yīng)30min。

連接t載體：4μl的加a產(chǎn)物和1μl的t載體，置于25℃反應(yīng)30min，即得到目的產(chǎn)物，后將產(chǎn)物轉(zhuǎn)入大腸桿菌感受態(tài)。

(4)、轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

①將加a連接t載體的連接液轉(zhuǎn)入含100μl感受態(tài)細(xì)胞的1.5mleppendorf管中，冰上放置30min；

②42℃熱激90s后，立即冰浴2min；

③加入lb液體培養(yǎng)基500μl，置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1h(120r/min)，使細(xì)菌恢復(fù)正常生長狀態(tài)；

④取上述菌液100μl涂布于含氨芐青霉素的lb篩選平板上，待菌液完全被培養(yǎng)基吸收后倒置培養(yǎng)皿進(jìn)行培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)16～24h。

⑤挑選菌落pcr及酶切驗證正確的克隆送北京六合華大基因科技股份有限公司進(jìn)行測序分析，獲得候選基因的啟動子。

(5)、啟動子表達(dá)載體的構(gòu)建

分別用相應(yīng)的雙酶切后回收啟動子片段片段和線性化處理pcambia1381質(zhì)粒。用t4連接酶連接回收的目的片段及線性化載體(1μl10×t4ligasebuffer，1μlt4ligase，2μl線性化載體，6μl目的片段)，pcr和雙酶切驗證菌落，獲得相應(yīng)啟動子的表達(dá)載體。

(6)、表達(dá)載體轉(zhuǎn)化根癌農(nóng)桿菌eha105

①取10μl表達(dá)載體質(zhì)粒dna加入從超低溫冰箱取出的農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞，混勻后冰浴30min；

②用液氮速凍1min；

③加入1mllb培養(yǎng)基，28℃120r/min培養(yǎng)4h；

④4000r/min離心1min，棄上清；加150μllb培養(yǎng)基重懸，將菌液涂布與含50μg/mlkan和10μg/mlrif的lb固體平板；

⑤28℃培養(yǎng)2～3d至單菌落長出，進(jìn)行菌落pcr鑒定。

⑥挑取陽性克隆，用50％甘油(1：1)保存。

2、轉(zhuǎn)基因植株的獲得

(1)水稻遺傳轉(zhuǎn)化

①愈傷組織誘導(dǎo)：消毒后的水稻種子用無菌水在30℃黑暗條件下浸泡過夜，用解剖刀將胚剝下置于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。每皿(規(guī)格為100×25mm的一次性塑料培養(yǎng)皿，內(nèi)含50ml誘導(dǎo)培養(yǎng)基)均勻放置12個胚，在30℃黑暗條件下放置2～3周誘導(dǎo)愈傷組織，至長出淡黃色顆粒狀愈傷。

②預(yù)培養(yǎng)：從誘導(dǎo)培養(yǎng)基上挑選顆粒狀的愈傷組織置于新的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，于30℃黑暗條件下培養(yǎng)3～5d。

③侵染及共培養(yǎng)：將預(yù)培養(yǎng)的愈傷組織轉(zhuǎn)移至50ml無菌管中，加入農(nóng)桿菌菌液(od600＝0.2)浸泡20min，倒出菌液，并用無菌濾紙將愈傷上的殘余菌液吸干。將愈傷均勻撒在共培養(yǎng)培養(yǎng)基上，于23℃黑暗下培養(yǎng)2～3d。

④恢復(fù)：將共培養(yǎng)的愈傷轉(zhuǎn)移至恢復(fù)培養(yǎng)基上，30℃黑暗培養(yǎng)3～5d。

⑤篩選：從篩選培養(yǎng)基上挑選不帶菌斑顏色鮮亮呈淡黃色顆粒狀的胚性愈傷組織，接種于篩選培養(yǎng)基上，每皿30粒。30℃黑暗培養(yǎng)2～3周，至長出新的抗性顆粒狀愈傷。

⑥分化：每一轉(zhuǎn)化事件挑選三個獨立的胚性愈傷到分化培養(yǎng)基某一區(qū)域，30℃光照培養(yǎng)室(16h光照/8h黑暗)條件下培養(yǎng)3～4周，待幼苗長出。

⑦生根：每一區(qū)域挑選兩棵健壯的幼苗移栽至生根培養(yǎng)基，30℃組織培養(yǎng)室光周期(16h光照/8h黑暗)培養(yǎng)三周左右，進(jìn)行鑒定并移栽至田間。

(2)轉(zhuǎn)基因植株鑒定

共獲得37株pcambia1381-posmej1植株(posmej1：：gus轉(zhuǎn)基因水稻植株)。采用常規(guī)方法提取轉(zhuǎn)基因植株的dna，用pcr擴(kuò)增潮霉素基因?qū)D(zhuǎn)化植株進(jìn)行檢測，獲得陽性植株30株。

3、啟動子活性鑒定

(1)gus組織化學(xué)染色

參照jefferson等的方法，對pcr檢測呈陽性的植株進(jìn)行meja處理前后的gus染色分析。將待測樣品浸到gus染液中，37℃保溫箱中放置24h。然后用100％乙醇浸泡直至完全脫色。然后進(jìn)行拍照。所需試劑及配方如下表所列。

染色結(jié)果如圖3所示。在meja未處理的轉(zhuǎn)基因植株的根(a)、葉(b)和莖(c)組織中，沒有明顯的著色；而當(dāng)用2mmol/lmeja處理后，轉(zhuǎn)基因植株的根(d)、葉(e)和莖(f)組織中有很深的藍(lán)色，這說明當(dāng)用meja處理后，posmej1啟動子能夠驅(qū)動gus基因的表達(dá)，證明該啟動子是一個meja誘導(dǎo)表達(dá)啟動子，且沒有背景表達(dá)。

(2)定量pcr分析啟動子活性

gus染色結(jié)果定性說明，posmej1是一個meja誘導(dǎo)表達(dá)啟動子。為進(jìn)一步定量檢測posmej1的誘導(dǎo)活性大小，我們采取提取meja誘導(dǎo)前后的10天的轉(zhuǎn)基因幼苗的rna，然后反轉(zhuǎn)錄成cdna，定量pcr(rt-qpcr)法檢測meja誘導(dǎo)前后posmej1驅(qū)動gus基因的表達(dá)變化。

采用天根公司(北京)植物總rna提取試劑盒(tiangen，離心柱型，dp432)。所獲rna按如下程序進(jìn)行cdna反轉(zhuǎn)錄：在rnase-free離心管中加入5μlrnase-freeddh2o，2μl5×gdnabuffer，3μlrna，置于42℃孵育3min，然后置于冰上放置；在上述反應(yīng)液中，依次加入5μlrnase-freeddh2o，2μlfq-rtprimermix，2μl10×fastrtbuffer，1μlrtenzymemix充分混勻，置于42℃孵育15min；95℃孵育3min，之后放于冰上，即為cdna。

rt-qpcr采用天根公司(北京)的superreal熒光定量預(yù)混液試劑盒(tiangen，sybrgreen，fp205)。以水稻actin基因作為內(nèi)參基因?qū)λ胷na模板量進(jìn)行定量。采用2–δδct(δct＝ct目標(biāo)基因–ct內(nèi)參基因；δδct＝δct處理后–δct對照)對獲得的信號和數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。每個基因做3次重復(fù)。本實驗中用到的基因的定量引物為：actin-fp5’-cctgacggagcgtggttac-3’；和

actin-rp，5’-ccagggcgatgtaggaaagc-3’用于actin的擴(kuò)增；gus-fp，5’-tacggcaaagtgtgggtcaataatca-3’

和gus-rp，5’-caggtgttcggcgtggtgtagag-3’用于gus的擴(kuò)增。

定量pcr結(jié)果如圖4所示，以meja未處理的10天轉(zhuǎn)基因幼苗中的gus基因表達(dá)量作為1，分別檢測了meja處理4h、8h、12h和24h的轉(zhuǎn)基因植株中的gus基因表達(dá)量變化。當(dāng)meja處理時間由4h延長至8h時，相比于未處理時，啟動子驅(qū)動的gus基因表達(dá)量由22.7倍提高至91.5倍，隨后，當(dāng)處理時間達(dá)到12小時時，活性降低至17.3倍，當(dāng)處理24h時，啟動子活性又提高至78.7倍。由此說明，該啟動子是一個meja誘導(dǎo)表達(dá)啟動子，活性是誘導(dǎo)前的幾十倍，且該啟動子的活性可能與節(jié)律有關(guān)。

基于此，申請人發(fā)明了一種可以利用本發(fā)明所獲得的植物茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子posmej1來調(diào)控目標(biāo)植株的局部生長的方法。

具體而言，若希望增強(qiáng)或抑制目標(biāo)植株的某一部位的生長，比如，在水稻生長到一定程度之后，希望抑制水稻莖部的生長，則將植物茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子posmej1連接至莖部生長抑制基因并整體轉(zhuǎn)入水稻植株，當(dāng)希望抑制莖部生長時，則對水稻莖部進(jìn)行植物茉莉酸甲酯處理，處理時間為8小時，這樣，將極大地提高莖部生長抑制基因的表達(dá)，進(jìn)而抑制植物莖部的生長。

以上對本發(fā)明具體實施方式的描述并不限制本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)本發(fā)明作出各種改變或變形，只要不脫離本發(fā)明的精神，均應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的范圍。

序列表

<110>安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所

<120>一種植物茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子posmej1及其應(yīng)用

<130>hci20170106

<160>3

<170>patentinversion3.3

<210>1

<211>2026

<212>dna

<213>一種植物茉莉酸甲酯誘導(dǎo)表達(dá)啟動子posmej1及其應(yīng)用

<400>1:

acgtctacccctacttcgcctacgtgggcaaccaggcccagatcgacatcaactacgcgc60

tcttcacgtcgccgggcacggtggtgcaggacggcggcaacgcgtaccagaacctgttcg120

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<210>2

<211>28

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<213>正向引物

<400>2:

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<213>反向引物

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