本發(fā)明涉及一種肝素鈉的提取工藝,具體涉及一種提高加工肝素鈉效率的工藝。
背景技術(shù):
目前肝素鈉已成為全球第一大生化藥物,我國是肝素鈉原料的主要出口國,大多數(shù)企業(yè)所得產(chǎn)品收率低,純度低,且在生產(chǎn)過程中樹脂再生困難,產(chǎn)生的廢水污染環(huán)境嚴(yán)重。本發(fā)明所對應(yīng)的現(xiàn)有技術(shù)中的動物腸衣肝素鈉的提取工藝有以下兩種:鹽解法提取、酶解法提取和酶解加鹽解法提取。這些工藝的缺點(diǎn)在于:分解不完全,殘留量比較大,分解后的雜質(zhì)比較多,純度低。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
為了解決以上技術(shù)問題,本發(fā)明的一種提高加工肝素鈉效率的工藝,所述肝素鈉的提取工藝步驟為:先對新鮮腸衣粘膜進(jìn)行酶解,然后進(jìn)行吸附、脫附處理,最后沉淀、烘干獲得肝素鈉,所述對新鮮腸衣的酶解工藝為超聲波酶解工藝,所述超聲波酶解工藝為將ph值為9的料液與單根小腸混合水在50℃的溫度下與5%體積比的蛋白酶在以超聲為介質(zhì)的條件下酶解,將肝素鈉與蛋白的結(jié)合部位快速切斷,獲得肝素鈉;所述介質(zhì)超聲的超聲時(shí)間為20-70min,超聲功率為240-360w,單次超聲時(shí)間為4s,超聲時(shí)間與間歇時(shí)間的比值為2-7∶2;所述工藝中料液與單根小腸混合水的體積比為1.6-7∶1;所述超聲時(shí)間優(yōu)選值為45min;所述超聲功率優(yōu)選360w;所述單次超聲時(shí)間優(yōu)選值為5s;所述超時(shí)間與間歇時(shí)間的優(yōu)選比值為2∶0.5。
本發(fā)明將超聲波酶解法應(yīng)用于肝素鈉提取,確定最佳工藝條件,市場需求量大,該工藝大大縮短生產(chǎn)周期,且產(chǎn)品得率高,純度高,經(jīng)濟(jì)效益十分顯著。
附圖說明
圖為本發(fā)明的工藝流程圖。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明的肝素鈉提取的整個(gè)工藝流程如附圖所示,首先進(jìn)行小腸粘膜溶液的ph值調(diào)試1,然后進(jìn)行超聲酶解2、以及過濾3、樹脂吸附4、樹脂吸附飽后進(jìn)行洗滌5、洗脫6、冷凍離心7、過濾取上清液8、乙醇沉淀9、冷凍干燥10、包裝11、保藏12。
具體工作時(shí),為了更快速、有效地將蛋白與肝素分解,將混合液與蛋白酶在超聲波為介質(zhì)的條件下酶解,即將超聲波導(dǎo)入溶液中。酶解原理與一般酶解相同。通過上述超聲酶解后,肝素與蛋白分離,肝素保留于溶液中形成母液,蛋白成為固體雜渣,通過過濾3的步驟,用100目的濾布將母液中的固體雜渣過濾,然后將過濾后的母液輸至吸附池。在吸附池中,將上述過濾后的母液進(jìn)行樹脂吸附4步驟的處理,接下來是樹脂吸附飽和后進(jìn)行洗滌5的步驟:將吸附后的溶液用150目的濾布過濾取出樹脂,先將樹脂用清水洗凈,然后加ph值為3的鹽水,鹽水的加入量與樹脂的重量比例為1∶1,加入后,攪拌半小時(shí)后放出,用清水將樹脂清洗干凈,接著將鹽水升溫至60℃,按重量比1∶1的比例加到已經(jīng)洗凈的樹脂中,加鹽控制放出的鹽度并攪拌,進(jìn)行一次洗脫,攪拌洗脫2小時(shí)。取出洗脫液,按重量比1∶1比樹脂加清水到經(jīng)2次洗脫的樹脂,加鹽控制放出鹽度進(jìn)行3次洗脫,洗脫時(shí)間為1小時(shí)。將待冷凍產(chǎn)品放入冷凍離心機(jī),在冷凍離心溫度為6℃,離心轉(zhuǎn)速為15000r/min的環(huán)境下離心20min后停止離心,完成冷凍過程。采用150目多層布篩進(jìn)行過濾取離心管中的上清液,加入等體積的100%冷乙醇,加入1/10體積的naac(3m,ph5.2)后上下顛倒混勻,-20度30分鐘,12000轉(zhuǎn)4℃離心10分鐘。倒掉上清,加入70%的冷乙醇,輕輕混勻,12000轉(zhuǎn)4℃離心10分鐘;倒掉上清,放在室溫中干燥,標(biāo)準(zhǔn)是聞不到乙醇的味道。加入適當(dāng)體積水或者te緩沖液溶解即可。先將準(zhǔn)備干燥的物品置于低溫冰箱或液氮中,使物品完全冰凍結(jié)實(shí),然后將已準(zhǔn)備好的待干燥物品置于干燥盤中,密封罩上有機(jī)玻璃筒,然后置于冷凍機(jī)中抽真空至-20pa以下,進(jìn)行冷凍干燥12-24小時(shí)完成該步驟。完成上述步驟后,就進(jìn)行包裝11、保藏12,該兩步驟為常規(guī)步驟,在此不再累述。
以上所述,僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已,并非是對本發(fā)明作其它形式的限制,任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容加以變更或改型為等同變化的等效實(shí)施例。但是凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容,依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對以上實(shí)施例所作的任何簡單修改、等同變化與改型,仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍。