亚洲成年人黄色一级片,日本香港三级亚洲三级,黄色成人小视频,国产青草视频,国产一区二区久久精品,91在线免费公开视频,成年轻人网站色直接看

一種丙型肝炎病毒(HCV)恒溫檢測試劑盒的制作方法

文檔序號:12779155閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種丙型肝炎病毒(HCV)恒溫檢測試劑盒,包括PCR反應液,PCR反應啟動液、PCR反應酶系,HCV特異性引物及探針,內(nèi)標18S RNA的特異性引物及探針,陰陽性質(zhì)控品,其特征在于:所述的HCV特異性引物及探針、內(nèi)標18S RNA的特異性引物及探針序列如下:

檢測HCV的上游引物F1的序列為:

CCTACTACCGCGGTCTTGACGTGTCTGTCATC;

檢測HCV的下游引物R1的序列為:CAGTCTATCACCGAGTCGAAATCGCCGGTAAAGCC;

檢測HCV的熒光探針P1序列為:FAM-CGGCCAGTG(dSpacer)CGATGTTGTCGTAGTGGCAAC-BHQ;

檢測內(nèi)標18SRNA的上游引物F1序列為:CCGATCGCACGCCCCCCGTGGCGGCGACGACC;

檢測內(nèi)標18SRNA的下游引物R1的序列為:CCCGTCACCCGTGGTCACCATGGTAGGCAC;

檢測內(nèi)標18SRNA的熒光探針P1序列為:

HEX-CGAACGTCT(dSpacer)CCCTATCAACTTTCGATGGTAGTC-BHQ。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丙型肝炎病毒(HCV)恒溫檢測試劑盒,其特征在于:其PCR反應液成分包括:

Tris-緩沖液 50~100mmol/L

KCl 20~60mmol/L

二硫蘇糖醇 2~5mmol/L

甜菜堿 0.5~2mol/L

海藻糖 1%~4%

PEG 2%~5%

BSA 0.1~0.6mg/mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種丙型肝炎病毒(HCV)恒溫檢測試劑盒,其特征在于:Tris-緩沖液可選自Tris-H2SO4、Tris-乙酸、Tris-HCl中的任意一種或多種,Tris-緩沖液的pH為7.0~9.0。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丙型肝炎病毒(HCV)恒溫檢測試劑盒,其特征在于:其PCR啟動液成分包括:

Mg2+ 8mM~30mM 。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種丙型肝炎病毒(HCV)恒溫檢測試劑盒,其特征在于:Mg2+來自于硫酸鎂、乙酸鎂、氯化鎂中的任意一種或多種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丙型肝炎病毒(HCV)恒溫檢測試劑盒,其特征在于:其PCR反應酶系成分包括:

dNTPs 180~250μmol/L

聚合酶Bsu 120~160ng/μl

單鏈結(jié)合蛋白 200~700ng/μl

重組酶 100~300ng/μl

逆轉(zhuǎn)錄酶 0.05~0.9U/μl。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種丙型肝炎病毒(HCV)恒溫檢測試劑盒,其特征在于:重組酶選自E.coli RecT蛋白;λ噬菌體β蛋白;啤酒酵母SepΙ/STPβ;啤酒酵母DPA蛋白;啤酒酵母STPα蛋白;粟酒裂殖酵母p140/Exo∥蛋白以及RrpΙ、HPP-Ι、v-SEP、ICP8蛋白。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丙型肝炎病毒(HCV)恒溫檢測試劑盒,其特征在于:HCV探針連接的熒光基團不同于內(nèi)標18SRNA探針連接的熒光基團。

9.根據(jù)權(quán)利要求1、2、4、6所述的一種丙型肝炎病毒(HCV)恒溫檢測試劑盒,其特征在于:恒溫擴增的擴增溫度為35℃~42℃。

當前第2頁1 2 3 
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
1