本發(fā)明屬于植物化學(xué)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一種萜類化合物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：紫莖澤蘭(eupatoriumadenophorumspreng)，主要分布于我國(guó)西南地區(qū)，其生活力強(qiáng)，適應(yīng)性廣，易成為群落中的優(yōu)勢(shì)種，甚至成為單一優(yōu)勢(shì)群落，被稱為惡性雜草。藥理研究表明，紫莖澤蘭的提取物具有殺蟲(chóng)、殺螨和抗癌等生理活性。李兵等人(李兵，趙平，陳娟,等，紫莖澤蘭浸泡液對(duì)椎實(shí)螺殺滅效果觀察，安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)[j]，2009,37(9)：4069-4070)報(bào)道了紫莖澤蘭水提取液液對(duì)椎實(shí)螺有殺滅效果；李釗君等人(李釗君，李萍，陳華保，等，紫莖澤蘭葉水提液對(duì)蛞蝓的毒殺作用，西北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)[j]，2012,21(12)：177-180)發(fā)現(xiàn)紫莖澤蘭葉水提液對(duì)蛞蝓有毒殺作用；張瓊芬等人(張瓊芬，李樹(shù)榮，紫莖澤蘭須根液對(duì)豬蛔蟲(chóng)的離體殺滅試驗(yàn)，中國(guó)獸藥雜志[j]，2007，41(1):3-4)發(fā)現(xiàn)紫莖澤蘭須根液對(duì)豬蛔蟲(chóng)具有殺滅作用；西南林學(xué)院的譚文彪等人(譚文彪，楊美兵，黃高峰，等，紫莖澤蘭花第一級(jí)提取物治療雞球蟲(chóng)病的效果，西南林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)[j]，2009，29(5):54-58)發(fā)現(xiàn)紫莖澤蘭葉的提取物對(duì)雞球蟲(chóng)病具有一定的治療作用；農(nóng)向等人(農(nóng)向、陳封政，等，aphicidalactivityofanageraphoroneextractfromeupatoriumadenophorumagainstpseudoregmabambucicolahomoptera:aphididae,takahashisciejournalofinsectscience[j]，2015，15(1)：81)發(fā)現(xiàn)紫莖澤蘭葉的提取物具有殺滅多種昆蟲(chóng)作用。專利一種倍半萜及其制備方法和用途(申請(qǐng)?zhí)枺?01410097711.5，申請(qǐng)日：2014-06-25，公開(kāi)號(hào)：cn103880620a，公開(kāi)日：2014.06.25)從紫莖澤蘭發(fā)現(xiàn)了萜類化合物化合物eupatoriumadenophorumb。現(xiàn)有的萜類化合物的制備分離方法主要采用醇提取，石油醚或乙酸乙酯萃取，然后通過(guò)硅膠柱層析，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，溶劑耗量大，周期長(zhǎng)，得率低。目前還未見(jiàn)有從紫莖澤蘭中提取、分離和鑒定出如結(jié)構(gòu)式(ⅰ)所示的萜類化合物eupatoriumadenophoruma的報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明針對(duì)上述的問(wèn)題，提供了一種萜類化合物及其制備方法和應(yīng)用，本發(fā)明從該植物中分離得到了揮發(fā)性萜類化合物eupatoriumadenophorumb的異構(gòu)體eupatoriumadenophoruma，其結(jié)構(gòu)與我們報(bào)道的化合物eupatoriumadenophorumb極其類似但絕不相同，主要區(qū)別在于結(jié)構(gòu)中橋環(huán)的位置與方向不同。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明公開(kāi)了一種揮發(fā)性萜類化合物，其結(jié)構(gòu)式(ⅰ)如下所示：本發(fā)明還提供一種萜類化合物的制備方法，包括以下步驟：1)取紫莖澤蘭植物干粉，用有機(jī)溶劑回流提取，離心過(guò)濾，得到提取液；然后再用有機(jī)溶劑回流提取，離心過(guò)濾，得到第二次回流液；2)將步驟1)制得的回流液合并，并減壓濃縮，得到浸膏；3)將步驟2)制得的浸膏置于真空精餾裝置中，啟動(dòng)真空泵至恒定，進(jìn)行精餾處理，強(qiáng)揮發(fā)性萜類化合物先精餾出來(lái)，再進(jìn)行精餾處理，中等揮發(fā)性萜類化合物隨后精餾出來(lái)，再進(jìn)行精餾處理，得到本發(fā)明的萜類化合物粗品；4)將萜類化合物粗品溶于30℃的乙醚溶液中制成飽和溶液，待乙醚部分揮發(fā)后，析出晶體，制備得到上述的揮發(fā)性萜類化合物。進(jìn)一步地，步驟1)中的有機(jī)溶劑為石油醚、環(huán)己烷、苯、乙醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、及1-4個(gè)碳的醇以及它們的混合物。進(jìn)一步地，步驟1)中的離心處理轉(zhuǎn)速為500-1500r/min，離心處理時(shí)間為8-12min，回流提取溫度為50-100℃，每次回流時(shí)間均為1-2小時(shí)。進(jìn)一步地，步驟2)中的減壓濃縮的溫度為40-60℃。進(jìn)一步地，步驟3)中真空泵的真空度為10-1000帕。進(jìn)一步地，步驟3)中的強(qiáng)揮發(fā)性萜類化合物的精餾溫度為50-60℃，精餾時(shí)間為1-2小時(shí)；中等揮發(fā)性萜類化合物的最佳精餾溫度為70-80℃，精餾時(shí)間為1-2小時(shí)；粗品萜類化合物的最佳精餾溫度為100-120℃，精餾時(shí)間為1-2小時(shí)。進(jìn)一步地，步驟3)中的強(qiáng)揮發(fā)性萜類化合物的精餾溫度為60℃，精餾時(shí)間為1-2小時(shí)；中等揮發(fā)性萜類化合物的精餾溫度為80℃，精餾時(shí)間為1-2小時(shí)；粗品萜類化合物的精餾溫度為120℃，精餾時(shí)間為1-2小時(shí)。進(jìn)一步地，強(qiáng)揮發(fā)性萜類化合物為單萜烯類化合物，所述中等揮發(fā)性萜類化合物為單萜含氧化合物。本發(fā)明還公開(kāi)了一種上述的萜類化合物在制備抗菌藥物、抗菌藥物前體或先導(dǎo)化合物的應(yīng)用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明可以獲得包括以下技術(shù)效果：1)本發(fā)明將紫莖澤蘭的醇提取物采用真空精餾法分離萜類化合物，節(jié)約溶劑，減少時(shí)間。2)本發(fā)明真空精餾后得到的粗品通過(guò)乙醚重結(jié)晶法得到純品，減少了硅膠柱層析法的試劑消耗，節(jié)約了時(shí)間。當(dāng)然，實(shí)施本發(fā)明的任一產(chǎn)品并不一定需要同時(shí)達(dá)到以上所述的所有技術(shù)效果。附圖說(shuō)明此處所說(shuō)明的附圖是對(duì)本發(fā)明目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)解析和鑒定，用來(lái)提供對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解，構(gòu)成本發(fā)明的一部分，本發(fā)明的示意性實(shí)施例及其說(shuō)明用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的不當(dāng)限定。在附圖中：圖1是本發(fā)明目標(biāo)化合物eupatoriumadenophoruma的單晶衍射圖；圖2是本發(fā)明目標(biāo)化合物eupatoriumadenophoruma的核磁共振氫譜圖；圖3是本發(fā)明目標(biāo)化合物eupatoriumadenophoruma的核磁共振碳譜圖。具體實(shí)施方式以下將配合實(shí)施例來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施方式，藉此對(duì)本發(fā)明如何應(yīng)用技術(shù)手段來(lái)解決技術(shù)問(wèn)題并達(dá)成技術(shù)功效的實(shí)現(xiàn)過(guò)程能充分理解并據(jù)以實(shí)施。本發(fā)明提供一種萜類化合物，該化合物具有揮發(fā)性，其結(jié)構(gòu)式(ⅰ)如下所示：本發(fā)明還提供一種結(jié)構(gòu)式(ⅰ)所示的萜類化合物的制備方法，包括以下步驟：步驟1)、取紫莖澤蘭植物干粉，用有機(jī)溶劑50-100℃條件下回流提取1-2小時(shí)，在室溫條件下進(jìn)行離心處理，離心處理轉(zhuǎn)速為500-1500r/min，離心處理時(shí)間為8-12min，得到提取液；然后再用有機(jī)溶劑50-100℃條件下回流提取1-2小時(shí)過(guò)濾，得到第二次回流液；所述有機(jī)溶劑為石油醚、環(huán)己烷、苯、乙醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、及1-4個(gè)碳的醇以及它們的混合物。步驟2)、將步驟1)制得的回流液合并，在40-60℃條件下減壓濃縮，得到浸膏；步驟3)、將步驟2)制得的浸膏置于真空精餾裝置中，啟動(dòng)真空泵至真空恒定在10-1000帕之間，升溫到60℃，持續(xù)精餾1-2小時(shí)，強(qiáng)揮發(fā)性萜類化合物揮發(fā)性萜類化合物先精餾出來(lái)，再將溫度升到80℃，持續(xù)精餾1-2小時(shí)，中等揮發(fā)性萜類化合物隨后精餾出來(lái)，最后將溫度升到120℃，持續(xù)精餾1-2小時(shí)，得到本發(fā)明的粗品萜類化合物，將該粗品于溶于30℃的乙醚溶液中制成飽和溶液，待乙醚部分揮發(fā)后，析出晶體；其中，強(qiáng)揮發(fā)性萜類化合物為半萜類化合物，所述中等揮發(fā)性萜類化合物為單萜類化合物。與現(xiàn)有技術(shù)中的硅膠柱層析法相比，本發(fā)明改用真空精餾法，具有經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)單，節(jié)約成本等技術(shù)優(yōu)勢(shì)。本發(fā)明的真空精餾的真空度設(shè)定恒定到10-1000帕之間，太高的真空度，實(shí)驗(yàn)設(shè)備難以達(dá)到，太低的真空度則會(huì)需要提高精餾溫度，而提高溫度會(huì)增加能耗，也可能導(dǎo)致化合物受熱后發(fā)生變化；本發(fā)明是先在恒定真空度的情況下，在50-60℃下精餾1-2小時(shí)，使揮發(fā)性強(qiáng)的萜類化合物(單萜烯類化合物)精餾出來(lái)，然后將精餾溫度升到70-80℃，持續(xù)精餾1-2小時(shí)，中等揮發(fā)性的萜類化合物(單萜含氧化合物)隨后精餾出來(lái)，最后將溫度升到100-120℃，持續(xù)精餾1-2小時(shí)，得到本發(fā)明的粗品萜類化合物；該溫度的采用，具有明顯的優(yōu)勢(shì)：通過(guò)50-60℃和70-80℃的兩次精餾，除去了大部分揮發(fā)性強(qiáng)和中等的萜類化合物，然后將精餾溫度升到120℃精餾時(shí)，則很容易得到本發(fā)明的萜類化合物粗品。本發(fā)明還提供一種結(jié)構(gòu)式(ⅰ)所示的萜類化合物在制備抗菌藥物、抗菌藥物前體或先導(dǎo)化合物的應(yīng)用。實(shí)施例1取干燥的紫莖澤蘭全草干粉，用乙醚回流提取1.5小時(shí)，在室溫條件下進(jìn)行離心處理，離心處理轉(zhuǎn)速為1000r/min，離心處理時(shí)間為10min，得到回流液；然后再用乙醚回流提取1.5小時(shí)，過(guò)濾，得到第二次回流液；合并兩次回流液，50℃溫度條件下濃縮至干，得到浸膏。然后將得到的浸膏置于真空精餾裝置中，啟動(dòng)真空泵至真空度恒定200帕，升溫到60℃，持續(xù)精餾1.5小時(shí)，強(qiáng)揮發(fā)性萜類化合物先精餾出來(lái)，再將溫度升到80℃，持續(xù)精餾1.5小時(shí)，中等揮發(fā)性萜類化合物隨后精餾出來(lái)，最后將溫度升到120℃，持續(xù)精餾1.5小時(shí)，得到本發(fā)明的粗品萜類化合物，將該粗品于溶于30℃的乙醚溶液中制成飽和溶液，待乙醚部分揮發(fā)后，析出晶體即本發(fā)明的目標(biāo)化合物eupatoriumadenophoruma，其單晶衍射圖如圖1所示，核磁氫譜如圖2所示，核磁碳譜如圖3所示。實(shí)施例2取干燥的紫莖澤蘭全草干粉，用乙酸乙酯回流提取1小時(shí)，在室溫條件下進(jìn)行離心處理，離心處理轉(zhuǎn)速為500r/min，離心處理時(shí)間為12min，得到回流液；然后再用乙酸乙酯回流提取1小時(shí)，過(guò)濾，得到第二次回流液；合并兩次回流液，40℃溫度條件下濃縮至干，得到浸膏。然后將得到的浸膏置于真空精餾裝置中，啟動(dòng)真空泵至真空度恒定1000帕左右，升溫到50℃，持續(xù)精餾2小時(shí)，強(qiáng)揮發(fā)性萜類化合物先精餾出來(lái)，再將溫度升到70℃，持續(xù)精餾2小時(shí)，中等揮發(fā)性萜類化合物隨后精餾出來(lái)，最后將溫度升到100℃，持續(xù)精餾2小時(shí)，得到本發(fā)明的粗品萜類化合物，將該粗品于溶于乙醚溶液中制成飽和溶液，待乙醚部分揮發(fā)后，析出晶體即本發(fā)明的目標(biāo)化合物eupatoriumadenophoruma，其單晶衍射圖如圖1所示，核磁氫譜如圖2所示，核磁碳譜如圖3所示。實(shí)施例3取干燥的紫莖澤蘭全草干粉，用乙酸乙酯回流提取2小時(shí)，在室溫條件下進(jìn)行離心處理，離心處理轉(zhuǎn)速為1500r/min，離心處理時(shí)間為8min，得到回流液；然后再用乙酸乙酯回流提取2小時(shí)，過(guò)濾，得到第二次回流液；合并兩次回流液，60℃溫度條件下濃縮至干，得到浸膏。然后將得到的浸膏置于真空精餾裝置中，啟動(dòng)真空泵至真空度恒定10帕左右，升溫到55℃，持續(xù)精餾1小時(shí)，強(qiáng)揮發(fā)性萜類化合物先精餾出來(lái)，再將溫度升到75℃，持續(xù)精餾1小時(shí)，中等揮發(fā)性萜類化合物隨后精餾出來(lái)，最后將溫度升到110℃，持續(xù)精餾1小時(shí)，得到本發(fā)明的粗品萜類化合物，將該粗品于溶于乙醚溶液中制成飽和溶液，待乙醚部分揮發(fā)后，析出晶體即本發(fā)明的目標(biāo)化合物eupatoriumadenophoruma，其單晶衍射圖如圖1所示，核磁氫譜如圖2所示，核磁碳譜如圖3所示。結(jié)構(gòu)式(ⅰ)所示的揮發(fā)性萜類化合物為無(wú)色柱狀晶體，分子式為c15h20o2，其核磁共振數(shù)據(jù)如下表1所示：表1化合物的nmr數(shù)據(jù)(incdcl3)(δ，ppm)下面用實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)說(shuō)明本發(fā)明的效果：藥效實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)菌種：金黃色葡糖球菌(staphylococcusaureus)、枯草芽孢桿菌(bacillussubtilis)、大腸桿菌(escherichiacoli)均由樂(lè)山師范學(xué)院微生物室提供。mic的測(cè)定：從生長(zhǎng)良好的培養(yǎng)基中，用無(wú)菌環(huán)取2-3個(gè)菌落的細(xì)菌團(tuán)塊加入到1ml無(wú)菌水中，混勻后加入到液體培養(yǎng)基中備用。菌液濃度約為1.0×105/ml。取紫外線消毒后的96孔板，每孔加入190μl菌液，然后每孔加入10μl藥液，樣品終濃度分別為0.125、0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、2.5mg/ml，每一濃度作3個(gè)復(fù)孔，設(shè)對(duì)照組3個(gè)復(fù)孔，未加藥液。細(xì)菌37℃培養(yǎng)18-24h，以濁度為指標(biāo)檢查試管中有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，以不顯示濁度，肉眼觀察未見(jiàn)菌體生長(zhǎng)的藥物濃度為mic。表2化合物eupatoriumadenophoruma的抗菌活性大腸桿菌枯草芽孢桿菌金色葡萄球菌mic2.0mg/ml1.5mg/ml2.5mg/ml上述說(shuō)明示出并描述了發(fā)明的若干優(yōu)選實(shí)施例，但如前所述，應(yīng)當(dāng)理解發(fā)明并非局限于本文所披露的形式，不應(yīng)看作是對(duì)其他實(shí)施例的排除，而可用于各種其他組合、修改和環(huán)境，并能夠在本文所述發(fā)明構(gòu)想范圍內(nèi)，通過(guò)上述教導(dǎo)或相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)或知識(shí)進(jìn)行改動(dòng)。而本領(lǐng)域人員所進(jìn)行的改動(dòng)和變化不脫離發(fā)明的精神和范圍，則都應(yīng)在發(fā)明所附權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)12