本發(fā)明屬于結(jié)核桿菌檢測(cè)
技術(shù)領(lǐng)域:
,具體涉及一種使用方便的快速痰液溶解保存液。
背景技術(shù):
:結(jié)核桿菌,是引起結(jié)核病的病原菌,以肺結(jié)核為最多見(jiàn)。結(jié)核病至今仍為重要的傳染病。據(jù)who報(bào)道,每年約有800萬(wàn)新病例發(fā)生,至少有300萬(wàn)人死于該病。我國(guó)建國(guó)前死亡率達(dá)200-300人/10萬(wàn),居各種疾病死亡原因之首,建國(guó)后人民生活水平提高,衛(wèi)生狀態(tài)改善,特別是開(kāi)展了群防群治,兒童普遍接種卡介苗,結(jié)核病的發(fā)病率和死亡率大為降低。但應(yīng)注意,世界上有些地區(qū)因艾滋病、吸毒、免疫抑制劑的應(yīng)用、酗酒和貧困等原因,發(fā)病率又有上升趨勢(shì)。結(jié)核分枝桿菌為細(xì)長(zhǎng)略帶彎曲的桿菌,大小1~4x0.4μm。牛分枝桿菌則比較粗短。分枝桿菌屬的細(xì)菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量較高,約占干重的60%,特別是有大量分枝菌酸包圍在肽聚糖層的外面,可影響染料的穿入。分枝桿菌一般用齊尼抗酸染色法,以5%石炭酸復(fù)紅加溫染色后可以染上,但用3%鹽酸乙醇不易脫色。若再加用美藍(lán)復(fù)染,則分枝桿菌呈紅色,而其他細(xì)菌和背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。本菌無(wú)芽孢、無(wú)鞭毛。目前,檢驗(yàn)科還在沿用傳統(tǒng)的手工涂片的方法檢驗(yàn)病人痰液中的結(jié)核桿菌,不僅感官上令人惡心,操作上主觀性強(qiáng),且存在被感染的風(fēng)險(xiǎn),造成檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率低。采用薄層液基細(xì)胞制片技術(shù),可以解決上述問(wèn)題,但是,該技術(shù)需要將痰液快速液化,目前,尚沒(méi)有一種能夠快速液化痰液的溶解保存液。中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)201510784562.4公開(kāi)了一種用于結(jié)核桿菌的痰液處理液,雖然能夠溶解痰液,但是溶解速度太慢,結(jié)核桿菌容易破裂損害,達(dá)不到快速檢測(cè)的要求。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:為了克服現(xiàn)有技術(shù)中保存液對(duì)痰液溶解速度慢,不能快速、準(zhǔn)確檢測(cè)痰液中結(jié)核桿菌的缺陷,本發(fā)明的提供了一種使用方便的快速痰液溶解保存液及其使用方法。本發(fā)明是通過(guò)以下的技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的。一方面,本發(fā)明提供了一種快速痰液溶解保存液,包含如下重量份數(shù)的組分:乙醇10-20份,甘油10-20份,植物油1-5份,分支酸0.1-1.5份,edta二鈉0.01-0.2份,sds(十二烷基硫酸鈉)0.001-0.15份,硫代糖2-12份,蒸餾水50-100份。優(yōu)選地,本發(fā)明的快速痰液溶解保存液,包含如下重量份數(shù)的組分:乙醇12-18份,甘油12-18份,植物油1-2份,分支酸0.1-1份,edta二鈉0.01-0.15份,sds0.001-0.1份,硫代糖2-10份,蒸餾水50-80份。在本發(fā)明的快速痰液溶解保存液中,所述植物油為花生油,大豆油,蓖麻油,棉籽油,玉米油,芝麻油中的一種或一種以上。所述硫代糖為5-硫代-d-葡萄糖,二硫代蘇糖醇,硫代葡萄糖苷,甲磺酞基-3,3-丁烯基硫代葡萄糖中的一種或一種以上。更優(yōu)選地,本發(fā)明的快速痰液溶解保存液,由如下重量份數(shù)的組分組成:乙醇15份,甘油15份,花生油1.5份,分支酸0.5份,黑曜石粉0.4份,edta二鈉0.1份,sds0.05份,5-硫代-d-葡萄糖6份,蒸餾水60份。另一方面,本發(fā)明還提供了一種快速溶解痰液的方法,包括以下步驟:將保存液在-20-10℃的溫度貯存;使保存液的溫度為4-60℃,然后將保存液與痰液混合均勻,其中保存液與痰液的質(zhì)量比為(1-10):1。優(yōu)選地,所述快速痰液溶解保存液在-10-10℃的溫度貯存,在10-30℃的溫度與痰液混合均勻。較優(yōu)的,所述快速痰液溶解保存液與痰液的質(zhì)量比為2.5:1。與本領(lǐng)域已有的技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果:(1)本發(fā)明的快速痰液溶解保存液可以快速溶解痰液,并防止結(jié)核桿菌的破裂;(2)該溶解保存液在低溫下儲(chǔ)存時(shí)間長(zhǎng),連續(xù)儲(chǔ)存3-5年仍然可以使用,活性未明顯減弱;(3)本發(fā)明痰液保存液的制備工藝簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,適合工業(yè)化生產(chǎn)的需要。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1一種快速痰液溶解保存液,由如下重量份數(shù)的組分組成:乙醇15份,甘油15份,花生油1.5份,分支酸0.5份,edta二鈉0.1份,sds0.05份,5-硫代-d-葡萄糖6份,蒸餾水60份。該痰液溶解保存液在-4℃條件下儲(chǔ)存2年,活性不降低,在-20℃條件下儲(chǔ)存3年,活性不降低。實(shí)施例2一種快速痰液溶解保存液,由如下重量份數(shù)的組分組成:乙醇10份,甘油10份,蓖麻油1份,分支酸0.1份,edta二鈉0.01份,sds0.001份,二硫代蘇糖醇2份,蒸餾水50份。該痰液溶解保存液在-4℃條件下儲(chǔ)存2年,活性不降低,在-20℃條件下儲(chǔ)存3年,活性不降低。實(shí)施例3一種快速痰液溶解保存液,由如下重量份數(shù)的組分組成:乙醇20份,甘油20份,棉籽油2份,分支酸1份,edta二鈉0.2份,sds0.1份,硫代葡萄糖苷10份,蒸餾水80份。該痰液溶解保存液在-4℃條件下儲(chǔ)存2年,活性不降低,在-20℃條件下儲(chǔ)存3年,活性不降低。實(shí)施例4一種快速痰液溶解保存液,由如下重量份數(shù)的組分組成:乙醇18份,甘油16份,玉米油1.6份,分支酸0.6份,edta二鈉0.12份,sds0.02份,甲磺酞基-3,3-丁烯基硫代葡萄糖7份,蒸餾水78份。該痰液溶解保存液在-4℃條件下儲(chǔ)存2年,活性不降低,在-20℃條件下儲(chǔ)存3年,活性不降低。實(shí)施例5一種快速痰液溶解保存液,由如下重量份數(shù)的組分組成:乙醇15份,甘油15份,花生油1.5份,分支酸0.5份,紅柱石粉0.1份,edta二鈉0.1份,sds0.05份,5-硫代-d-葡萄糖6份,蒸餾水60份。該痰液溶解保存液在-4℃條件下儲(chǔ)存3年,活性不降低,在-20℃條件下儲(chǔ)存4年,活性不降低。實(shí)施例6一種快速痰液溶解保存液,由如下重量份數(shù)的組分組成:乙醇15份,甘油15份,花生油1.5份,分支酸0.5份,黑曜石粉0.4份,edta二鈉0.1份,sds0.05份,5-硫代-d-葡萄糖6份,蒸餾水60份。該痰液溶解保存液在-4℃條件下儲(chǔ)存2年,活性不降低,在-20℃條件下儲(chǔ)存3年,活性不降低。對(duì)比試驗(yàn)例:為了考察本發(fā)明痰液溶解保存液的溶解速度,將本發(fā)明實(shí)施例1-6的保存液溶解速度與對(duì)比例(中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)201510784562.4具體實(shí)施方式中的處理液)的溶解速度進(jìn)行了對(duì)比。結(jié)果見(jiàn)表1。表1本發(fā)明組和對(duì)比組的痰液溶解時(shí)間對(duì)比數(shù)據(jù)組別實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3實(shí)施例4實(shí)施例5實(shí)施例6對(duì)比例溶解時(shí)間20秒22秒21秒23秒20秒15秒4分23秒結(jié)果表明,本發(fā)明痰液溶解保存液的痰液溶解速度要顯著大于對(duì)比例的溶解速度,達(dá)到了本發(fā)明聲稱(chēng)的目的。當(dāng)前第1頁(yè)12