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多通道多肽固相合成方法與流程

文檔序號:12707218閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.多通道多肽固相合成方法,其特征在于:該方法使用多通道多肽固相合成裝置來進行,多通道多肽固相合成裝置包括用于盛裝反應液的反應缸體,反應缸體底部連接有抽濾接管和氮氣接管,氮氣接管連接有氮氣軟管,氮氣軟管用于連接外置高壓氮氣瓶,氮氣接管上設有氮氣閥門,抽濾接管上設有抽濾閥門;

抽濾接管連接有抽真空軟管,抽真空軟管用于連接外置的抽濾裝置;反應缸體頂部設有氣體進出管,

反應缸體頂面連接有若干連接磨口,連接磨口的頂部呈上大下小的空心錐臺形;每一連接磨口內(nèi)分別插設有一多肽合成管,多肽合成管的底端插入反應缸體的下部且多肽合成管的底端設有砂芯濾芯;多肽合成管的中部設有磨砂連接部,磨砂連接部呈與連接磨口相適配的上大下小的空心錐臺形;

所述各多肽合成管的底端位于同一水平面,反應缸體內(nèi)于各多肽合成管的下方設有氮氣分氣箱,氮氣分氣箱的頂面與各多肽合成管一一對應設有若干氮氣分氣口,氮氣分氣口處設有由下至上單向?qū)ǖ膯蜗蜷y;所述氮氣接管伸入反應缸體內(nèi)并與氮氣分氣箱相連接;

本發(fā)明的多通道多肽固相合成方法按以下步驟來進行:

第一步驟是連接步驟,將氮氣軟管與外置高壓氮氣瓶相連接,將抽真空軟管與外置的抽濾裝置相連接;

第二步驟是樹脂分裝步驟,在多通道多肽固相合成裝置的各多肽合成管中分別裝入精確稱量后的連接有相同或不同氨基酸殘基的樹脂;

第三步驟是進行樹脂溶脹,具體是:

①將溶脹溶劑加入反應缸體;

②將裝有樹脂的每個多肽合成管分別通過連接磨口插入同一反應缸體進行溶脹,多肽合成管支撐在連接磨口上且其底端高于氮氣分氣箱并位于氮氣分氣口的正上方;

③打開高壓氮氣瓶的出氣閥和氮氣閥門,將氮氣送入氮氣分氣箱;氮氣分氣箱內(nèi)的氮氣通過單向閥后進入反應缸體,氮氣帶動部分反應缸體內(nèi)的液體通過砂芯濾芯進入多肽合成管,在反應中起到攪拌的作用,使液體與樹脂充分接觸;氮氣同時通過各多肽合成管的頂端開口或者反應缸體上的氣體進出管流出;溶脹30±10 分鐘,待樹脂充分溶脹后,關閉氮氣閥門;

④進行抽濾操作,抽濾操作具體是打開抽濾閥門,使用塞子封閉氣體進出管,啟動抽濾裝置,對反應缸體進行抽濾,將反應缸體內(nèi)的液體從反應缸體內(nèi)抽出;抽濾結(jié)束后關閉抽濾閥門;

第四步驟是進行脫保護反應,具體是:

①將脫保護溶液加入反應缸體;

②打開氮氣閥門,進行氮氣攪拌,使反應缸體內(nèi)的脫保護溶液與樹脂充分接觸;氮氣通過各多肽合成管的頂端開口或者反應缸體上的氣體進出管流出,本步驟持續(xù)進行30-40分鐘,關閉氮氣閥門,進行所述抽濾操作;

第五步驟是洗滌樹脂步驟,本步驟是將溶劑加入反應缸體中對樹脂進行洗滌,打開氮氣閥門,進行氮氣攪拌,使反應缸體內(nèi)的液體與樹脂充分接觸;氮氣通過各多肽合成管的頂端開口或者反應缸體上的氣體進出管流出,本步驟持續(xù)進行1分鐘,關閉氮氣閥門,進行所述抽濾操作;

本步驟重復進行六次;

第六步驟是檢測脫保護反應是否完成的步驟,具體是:

通過茚三酮顯色法檢測各多肽合成管中的樹脂的脫保護反應是否完成,對于未完成脫保護反應的樹脂,重復第四和第五步驟;

對于已完成脫保護反應的樹脂,若固相合成反應未全部結(jié)束,則進行下一步驟;若固相合成反應已全部結(jié)束,則將樹脂從各多肽合成管中取出,停止反應;

第七步驟是進行偶合反應,具體是:

①對各多肽合成管進行區(qū)分,根據(jù)進行下一步反應所需要的偶合溶液對各多肽合成管進行分組,將需要的偶合溶液相同的多肽合成管歸為同一組;

②對于同一組裝有樹脂的多肽合成管,將該組中的每個多肽合成管分別通過連接磨口插入同一反應缸體,將偶合溶液加入反應缸體;

③打開氮氣閥門,進行氮氣攪拌,使反應缸體內(nèi)的液體與樹脂充分接觸;氮氣通過各多肽合成管的頂端開口或者反應缸體上的氣體進出管流出,本步驟持續(xù)進行2-3小時;關閉氮氣閥門,進行所述抽濾操作;然后進行第五步驟即洗滌樹脂步驟,然后進行第八步驟;

第八步驟是檢測偶合反應是否完成的步驟,具體是:

通過茚三酮顯色法檢測各多肽合成管中的樹脂的偶合反應是否完成;對于未完成偶合反應的樹脂,重復第七步驟以重新進行偶合反應;對于已完成偶合反應的樹脂,則進行第四至第六步驟。

2.根據(jù)權利要求1所述的多通道多肽固相合成方法,其特征在于:所述溶脹溶劑為N,N-二甲基甲酰胺溶劑;所述樹脂采用Wang樹脂或Rink樹脂。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的多通道多肽固相合成方法,其特征在于:所述氣體進出管設有兩個,一個連接在反應缸體頂面中心處,另一個連接在反應缸體側(cè)壁頂部。

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