本發(fā)明涉及保健品生產(chǎn)領(lǐng)域，特別涉及一種辣木籽蛋白多肽制備方法。
背景技術(shù)：
辣木樹，學(xué)名moringatreeoleiferalamarch，屬于辣木樹（moringaceae），英文名moringatree，或稱鼓槌樹（drumsticktree），日名山葵木（山葵樹）。原產(chǎn)于印度北部的次喜瑪拉雅山麓、紅海沿岸（包沙特阿拉伯），非洲東北部和西南以及馬達(dá)加斯加。
辣木堪稱是一種神奇的健康植物。辣木葉片、果莢富含多種礦物質(zhì)、維生素，作為蔬菜和食品有增進(jìn)營(yíng)養(yǎng)、食療保健功能，也可用于醫(yī)藥、保健、工業(yè)等方面，因此被譽(yù)為“神奇之樹”、“生命之樹”。根據(jù)測(cè)定，辣木干葉粉所含的鈣質(zhì)是牛奶的4倍，蛋白質(zhì)是牛奶的2倍，鉀是香蕉的3倍，鐵是菠菜的3倍，維生素c是柑橘的7倍，維生素a(b胡蘿卜素)是胡蘿卜的4倍，只要3湯匙的辣木葉粉，就含有幼兒每日所需的270％維生素a、42％的蛋白質(zhì)、125％的鈣、70％的鐵及22％的維生素c。它豐富的蛋白質(zhì)、維生素及氨基酸，不但對(duì)先進(jìn)國(guó)家素食者有極大益處，而且對(duì)抗?fàn)I養(yǎng)不良及提升免疫力也功效顯著。在印度，辣木常被用于傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的配方，辣木子還具有凈化水質(zhì)的功能。辣木葉、花、果可作為蔬菜直接食用，可以加工制作多種功能性營(yíng)養(yǎng)保健品，也可以開發(fā)作為豬、牛、羊飼料，種子可以提煉油脂。
辣木的食用價(jià)值：辣木根和皮合生物堿不可食用。辣木果莢、嫩葉在印度是夏季的主要蔬菜。辣木鮮葉嫩果莢可以炒、煮、涼食。干種子、幼苗根、花有辣味，可作為調(diào)味料?？晒┦秤貌课?，如嫩頁(yè)味道有點(diǎn)像菠菜，果莢外形類似菜豆味如蘆筍，開水燙熱加佐料涼拌或煮湯皆宜。辣木花蒸熟后涼拌即可食用。
辣木的醫(yī)療保健功能：傳統(tǒng)印度醫(yī)師常用辣木配方治療糖尿病、高血壓、心血管病、肥胖癥、皮膚病、眼疾、免疫力低下、壞血病、貧血、佝僂、抑郁、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕、結(jié)石、消化器官腫瘤、癱瘓、間歇性發(fā)熱、慢性風(fēng)濕、精神失常、眼花、腸道痙攣病等。樹枝有壯陽(yáng)作用，果實(shí)可以用來(lái)治療肝臟、脾、經(jīng)脈、等特殊部位的疾病和破傷風(fēng)，葉片和果莢中有降壓作用的成分。
辣木的其他應(yīng)用價(jià)值：辣木種子含有豐富的油脂，提取的辣木油黃色鮮亮，含有76%的不飽和脂肪酸，主要是油酸。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是針對(duì)以上問(wèn)題，提供一種辣木籽蛋白多肽制備方法，
包括：
(1)把精選干凈的辣木籽在陽(yáng)交下曬3—4小時(shí)或在高溫度40℃—50℃條件下烘烤2小時(shí)，除去辣木籽表皮的水份，使表皮變硬，用研磨式粉碎機(jī)破殼去外皮，使皮和籽仁分離，得干凈的籽仁；
(2)將籽仁分通過(guò)粉碎機(jī)，粉碎至100目篩，得辣木仁粉備用；
(3)將辣木仁粉按固液比1:15用無(wú)離子水稀釋成懸浮液，用稀naoh油懸浮液ph值到9.0，投入微波頻率2450nhz微波罐中，微波處理20-25分鐘，控溫60℃，并在55℃—60℃保溫40分鐘；
(4)將經(jīng)過(guò)微波處理并保溫的溶液排出，用200目濾布三足離心機(jī)過(guò)濾，得到不溶于稀堿液的蛋白質(zhì)及其他物質(zhì)為濾渣和溶于稀堿液的蛋白質(zhì)物質(zhì)及其他物的溶液，濾渣收集作酶解原料，濾液作下一步高速離心機(jī)處理。
(5)將三足離心機(jī)過(guò)濾所得的濾液，用高速離心機(jī)離心2次，第1次離心，離心機(jī)轉(zhuǎn)速≥8000r/min,得到重液和少量細(xì)微顆粒渣作酶解原料，輕液進(jìn)行第2次離心，離心轉(zhuǎn)速≥10000r/min,重液作酶解原料，輕液為油水混合液，將輕液分裝在容器內(nèi)，液體深度小于150mm，置于能深度冷凍到-36℃的冰柜中冷凍，冷凍溶液達(dá)到-32℃并保持2個(gè)小時(shí)，然后取出自然解凍。
(6)將第1次離心所得的濾渣，第2次第3次高速離心所得的重液合伴，充分混合，此時(shí)溶液的濃度為6.7%—7.0%，調(diào)ph值為9.0，投入微波頻率為2450mhz的微波罐中，按底物量添加3.5%的堿性酶，酶活度20萬(wàn)u/g，進(jìn)行微波輔助酶解，微波時(shí)間15-20分鐘,控溫60℃,檢測(cè)酶解液ph值,當(dāng)ph值≤8.0時(shí),待酶解溫度下降至45℃后,按底物量添加3%大豆酶解復(fù)合酶，微波輔助酶解15-20min，控溫60℃，在55℃—60℃保溫30min，檢酶解液ph值，當(dāng)ph值下降至≤7.2時(shí)結(jié)束酶解，啟動(dòng)微波罐最大功率升溫至85-90℃滅酶活，得到滅酶活的酶解液備用。
(7)將自然解凍后的濾液用能提截2000da超濾膜超濾，透過(guò)液用反滲透膜濃縮，2000da超濾的濃液和反滲透膜的濃縮液混合，微波干燥機(jī)進(jìn)行干燥，控制真空度0.04mpa-0.08mpa,控溫60℃，得辣木籽蛋白多肽。
(8)將微波干燥的辣木籽蛋白多肽，冷卻后進(jìn)行粉碎，得微紅色的辣木籽多肽粉。
所述的大豆酶解復(fù)合酶為堿性酶與中性酶復(fù)合,酶活10萬(wàn)u/g。
所述的油水混合液，用分液漏斗將油與水分離，得辣木籽粗油，粗油用大容量試管離心機(jī)離心，離心機(jī)轉(zhuǎn)速≥6000r/min，離心15min—20min，除去殘余水份和雜質(zhì)，得到淡橄欖色的辣木籽精油。
將經(jīng)滅酶活的酶解液取出，用045um真空纖維膜進(jìn)行微濾，透過(guò)液用能提截10000da的超濾膜超濾，濃液與微濾之濃液混合，進(jìn)行減壓低溫≤60℃蒸發(fā)干燥得脫脂辣木籽蛋白粉。
辣木種籽是高蛋白高脂肪的原料，因品種和種植地區(qū)的環(huán)境及管理操作的不同，其蛋白質(zhì)和脂肪的含量差異較大，蛋白質(zhì)的含量從23%—36%，脂肪含量從20%—32%，特別高的達(dá)40%。此外，還含有黃銅類，多糖類活性物質(zhì)。
據(jù)分析，辣木籽粙的飽和脂肪酸約占20%左右，不飽和脂肪酸占80%左右，辣木籽粙的脂肪酸組成，據(jù)某項(xiàng)檢測(cè)的組成如下：棕櫚酸7.0%，棕櫚油酸2.0%，硬脂酸4.0%，油酸78.0%，亞油酸1.0%，花生酸4.0%，二十二碳酸4.0%，在食用效果方面，辣木籽油優(yōu)于橄欖油，辣木籽油還有如下生理作用，可增加機(jī)體附多價(jià)不飽和脂肪酸的攝入，促進(jìn)膽固醇和膽酸的排泄，從而降低血清膽固醇的含量，提高對(duì)超氧化物岐化酶（sod）的活性。使機(jī)體抗氧化作用更佳，降低血液凝固有明顯作用。因此，以辣木籽蛋白制備多肽時(shí)將油分離出很有必要。
所有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)全部被人體吸收和利用，不會(huì)有任何營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩和副作用，具有防癌抗癌，增強(qiáng)人體免疫力：減輕癌癥患者因放、化療引起的毒副作用；保肝解毒作用。
本發(fā)明的顯著有益效果是：
（1）本發(fā)明改進(jìn)辣木籽蛋白質(zhì)的酶解工藝與技術(shù)，通過(guò)釆用微波輔助酶解技術(shù)制備獲得更多具有生物活性的寡肽，不僅提高辣木葉蛋白酶的轉(zhuǎn)化率，而且更為重要的是提高辣木葉蛋白肽的活力，使辣木葉從單純食用拓展到人類保健品行業(yè)和領(lǐng)域，提高辣木產(chǎn)業(yè)綜合效益，實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)增效農(nóng)民增收農(nóng)村繁榮。
（2）本發(fā)明充分利用辣木籽豐富蛋白質(zhì)資源，利用現(xiàn)代生物酶解技術(shù)將辣木籽中蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為小分子的蛋白質(zhì)片段的具有生物活性的小肽。小分子辣木葉蛋白肽不僅有很好的溶解性、低粘度、抗凝膠形成性，而且在體內(nèi)消化吸收快，蛋白質(zhì)利用率高，具有低抗原性，不會(huì)產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)。微波輔助生物酶解技術(shù)反應(yīng)條件溫和、易操作、能耗低、酶解時(shí)間短，產(chǎn)品安全、品質(zhì)好,對(duì)改善蛋白質(zhì)的適口性，提高消化率有積極作用。
（3）辣木籽蛋白多肽，可增加機(jī)體附多價(jià)不飽和脂肪酸的攝入，促進(jìn)膽固醇和膽酸的排泄，從而降低血清膽固醇的含量，提高對(duì)超氧化物岐化酶（sod）的活性。使機(jī)體抗氧化作用更佳，具有防癌抗癌作用和降低血液凝固有明顯作用。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1：
(1)把精選干凈的辣木籽在陽(yáng)交下曬3—4小時(shí)或在高溫度40℃—50℃條件下烘烤2小時(shí)，除去辣木籽表皮的水份，使表皮變硬，用研磨式粉碎機(jī)破殼去外皮，使皮和籽仁分離，得干凈的籽仁；
(2)將籽仁分通過(guò)粉碎機(jī)，粉碎至100目篩，得辣木仁粉備用；
(3)將辣木仁粉按固液比1:15用無(wú)離子水稀釋成懸浮液，用稀naoh油懸浮液ph值到9.0，投入微波頻率2450nhz微波罐中，微波處理20-25分鐘，控溫60℃，并在55℃—60℃保溫40分鐘；
(4)將經(jīng)過(guò)微波處理并保溫的溶液排出，用200目濾布三足離心機(jī)過(guò)濾，得到不溶于稀堿液的蛋白質(zhì)及其他物質(zhì)為濾渣和溶于稀堿液的蛋白質(zhì)物質(zhì)及其他物的溶液，濾渣收集作酶解原料，濾液作下一步高速離心機(jī)處理。
(5)將三足離心機(jī)過(guò)濾所得的濾液，用高速離心機(jī)離心2次，第1次離心，離心機(jī)轉(zhuǎn)速≥8000r/min,得到重液和少量細(xì)微顆粒渣作酶解原料，輕液進(jìn)行第2次離心，離心轉(zhuǎn)速≥10000r/min,重液作酶解原料，輕液為油水混合液，將輕液分裝在容器內(nèi)，液體深度小于150mm，置于能深度冷凍到-36℃的冰柜中冷凍，冷凍溶液達(dá)到-32℃并保持2個(gè)小時(shí)，然后取出自然解凍。
(6)將第1次離心所得的濾渣，第2次第3次高速離心所得的重液合伴，充分混合，此時(shí)溶液的濃度為6.7%—7.0%，調(diào)ph值為9.0，投入微波頻率為2450mhz的微波罐中，按底物量添加3.5%的堿性酶，酶活度20萬(wàn)u/g，進(jìn)行微波輔助酶解，微波時(shí)間15-20分鐘,控溫60℃,檢測(cè)酶解液ph值,當(dāng)ph值≤8.0時(shí),待酶解溫度下降至45℃后,按底物量添加3%大豆酶解復(fù)合酶，微波輔助酶解15-20min，控溫60℃，在55℃—60℃保溫30min，檢酶解液ph值，當(dāng)ph值下降至≤7.2時(shí)結(jié)束酶解，啟動(dòng)微波罐最大功率升溫至85-90℃滅酶活，得到滅酶活的酶解液備用。
(7)將自然解凍后的濾液用能提截2000da超濾膜超濾，透過(guò)液用反滲透膜濃縮，2000da超濾的濃液和反滲透膜的濃縮液混合，微波干燥機(jī)進(jìn)行干燥，控制真空度0.04mpa-0.08mpa,控溫60℃，得辣木籽蛋白多肽。
(8)將微波干燥的辣木籽蛋白多肽，冷卻后進(jìn)行粉碎，得微紅色的辣木籽多肽粉。
實(shí)施例2：
(1)把精選干凈的辣木籽在陽(yáng)交下曬3—4小時(shí)或在高溫度40℃—50℃條件下烘烤2小時(shí)，除去辣木籽表皮的水份，使表皮變硬，用研磨式粉碎機(jī)破殼去外皮，使皮和籽仁分離，得干凈的籽仁；
(2)將籽仁分通過(guò)粉碎機(jī)，粉碎至100目篩，得辣木仁粉備用；
(3)將辣木仁粉按固液比1:15用無(wú)離子水稀釋成懸浮液，用稀naoh油懸浮液ph值到9.0，投入微波頻率2450nhz微波罐中，微波處理20-25分鐘，控溫60℃，并在55℃—60℃保溫40分鐘；
(4)將經(jīng)過(guò)微波處理并保溫的溶液排出，用200目濾布三足離心機(jī)過(guò)濾，得到不溶于稀堿液的蛋白質(zhì)及其他物質(zhì)為濾渣和溶于稀堿液的蛋白質(zhì)物質(zhì)及其他物的溶液，濾渣收集作酶解原料，濾液作下一步高速離心機(jī)處理。
(5)將三足離心機(jī)過(guò)濾所得的濾液，用高速離心機(jī)離心2次，第1次離心，離心機(jī)轉(zhuǎn)速≥8000r/min,得到重液和少量細(xì)微顆粒渣作酶解原料，輕液進(jìn)行第2次離心，離心轉(zhuǎn)速≥10000r/min,重液作酶解原料，輕液為油水混合液，將輕液分裝在容器內(nèi)，液體深度小于150mm，置于能深度冷凍到-36℃的冰柜中冷凍，冷凍溶液達(dá)到-32℃并保持2個(gè)小時(shí)，然后取出自然解凍。
(6)將第1次離心所得的濾渣，第2次第3次高速離心所得的重液合伴，充分混合，此時(shí)溶液的濃度為6.7%—7.0%，調(diào)ph值為9.0，投入微波頻率為2450mhz的微波罐中，按底物量添加3.5%的堿性酶，酶活度20萬(wàn)u/g，進(jìn)行微波輔助酶解，微波時(shí)間15-20分鐘,控溫60℃,檢測(cè)酶解液ph值,當(dāng)ph值≤8.0時(shí),待酶解溫度下降至45℃后,按底物量添加3%大豆酶解復(fù)合酶，微波輔助酶解15-20min，控溫60℃，在55℃—60℃保溫30min，檢酶解液ph值，當(dāng)ph值下降至≤7.2時(shí)結(jié)束酶解，啟動(dòng)微波罐最大功率升溫至85-90℃滅酶活，得到滅酶活的酶解液備用。
(7)將自然解凍后的濾液用能提截2000da超濾膜超濾，透過(guò)液用反滲透膜濃縮，2000da超濾的濃液和反滲透膜的濃縮液混合，微波干燥機(jī)進(jìn)行干燥，控制真空度0.04mpa-0.08mpa,控溫60℃，得辣木籽蛋白多肽。
(8)將微波干燥的辣木籽蛋白多肽，冷卻后進(jìn)行粉碎，得微紅色的辣木籽多肽粉。
實(shí)施例3：
(1)把精選干凈的辣木籽在陽(yáng)交下曬3—4小時(shí)或在高溫度40℃—50℃條件下烘烤2小時(shí)，除去辣木籽表皮的水份，使表皮變硬，用研磨式粉碎機(jī)破殼去外皮，使皮和籽仁分離，得干凈的籽仁；
(2)將籽仁分通過(guò)粉碎機(jī)，粉碎至100目篩，得辣木仁粉備用；
(3)將辣木仁粉按固液比1:15用無(wú)離子水稀釋成懸浮液，用稀naoh油懸浮液ph值到9.0，投入微波頻率2450nhz微波罐中，微波處理20-25分鐘，控溫60℃，并在55℃—60℃保溫40分鐘；
(4)將經(jīng)過(guò)微波處理并保溫的溶液排出，用200目濾布三足離心機(jī)過(guò)濾，得到不溶于稀堿液的蛋白質(zhì)及其他物質(zhì)為濾渣和溶于稀堿液的蛋白質(zhì)物質(zhì)及其他物的溶液，濾渣收集作酶解原料，濾液作下一步高速離心機(jī)處理。
(5)將三足離心機(jī)過(guò)濾所得的濾液，用高速離心機(jī)離心2次，第1次離心，離心機(jī)轉(zhuǎn)速≥8000r/min,得到重液和少量細(xì)微顆粒渣作酶解原料，輕液進(jìn)行第2次離心，離心轉(zhuǎn)速≥10000r/min,重液作酶解原料，輕液為油水混合液，將輕液分裝在容器內(nèi)，液體深度小于150mm，置于能深度冷凍到-36℃的冰柜中冷凍，冷凍溶液達(dá)到-32℃并保持2個(gè)小時(shí)，然后取出自然解凍。
(6)將第1次離心所得的濾渣，第2次第3次高速離心所得的重液合伴，充分混合，此時(shí)溶液的濃度為6.7%—7.0%，調(diào)ph值為9.0，投入微波頻率為2450mhz的微波罐中，按底物量添加3.5%的堿性酶，酶活度20萬(wàn)u/g，進(jìn)行微波輔助酶解，微波時(shí)間15-20分鐘,控溫60℃,檢測(cè)酶解液ph值,當(dāng)ph值≤8.0時(shí),待酶解溫度下降至45℃后,按底物量添加3%大豆酶解復(fù)合酶，微波輔助酶解15-20min，控溫60℃，在55℃—60℃保溫30min，檢酶解液ph值，當(dāng)ph值下降至≤7.2時(shí)結(jié)束酶解，啟動(dòng)微波罐最大功率升溫至85-90℃滅酶活，得到滅酶活的酶解液備用。
(7)將自然解凍后的濾液用能提截2000da超濾膜超濾，透過(guò)液用反滲透膜濃縮，2000da超濾的濃液和反滲透膜的濃縮液混合，微波干燥機(jī)進(jìn)行干燥，控制真空度0.04mpa-0.08mpa,控溫60℃，得辣木籽蛋白多肽。
(8)將微波干燥的辣木籽蛋白多肽，冷卻后進(jìn)行粉碎，得微紅色的辣木籽多肽粉。
病例1：
李某，47歲，15年確診肝癌后進(jìn)行化療，化療15天后出現(xiàn)惡心嘔吐、心律失常、厭食、脫發(fā)和面色蠟黃的副作用，在朋友介紹下服用本發(fā)明制備的辣木籽蛋白多肽粉，沖水飲用每日2次，堅(jiān)持12天后，化療副作用現(xiàn)象減輕，食欲增加。
病例2：
趙某某，51歲，14年出現(xiàn)高燒不退，白血球指數(shù)超標(biāo)，后確診為白血病，在醫(yī)生介紹下服用相關(guān)抗癌藥物并配合本發(fā)明制備的辣木籽蛋白多肽粉輔助治療，堅(jiān)持服藥15天，白血球指數(shù)得到控制，體溫恢復(fù)正常。