1.一種低氧輔助熱療殺滅腫瘤細(xì)胞的方法,其特征在于,該方法包括如下步驟:
(1)取腫瘤細(xì)胞凍存液若干,復(fù)蘇后加入1ml,DMEM培養(yǎng)基,各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基,在1000轉(zhuǎn)/min的速率下離心3-5分鐘后,倒掉上清液,再加入1ml新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)皿中,繼續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基5-6ml,將培養(yǎng)瓶放置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
(2)在培養(yǎng)箱孵育24小時后,待細(xì)胞完全貼壁后,再將貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)移至低氧濃度的三氣培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)一定時間,將細(xì)胞取出,然后用激光器照射細(xì)胞一段時間;
(3)照射后,吸出多余的培養(yǎng)基,加入100微升10%的2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽(CCK-8)試劑,在37℃恒溫培養(yǎng)箱中孵育2-4小時后,用酶標(biāo)儀檢測其吸光度。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低氧輔助熱療殺滅腫瘤細(xì)胞的方法,其特征在于所述的步驟(2)中,低氧濃度為0.5%-20%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低氧輔助熱療殺滅腫瘤細(xì)胞的方法,其特征在于所述的步驟(2)中,培養(yǎng)時間為4-48小時。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低氧輔助熱療殺滅腫瘤細(xì)胞的方法,其特征在于所述的步驟2中,激光器波長為780-980 nm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低氧輔助熱療殺滅腫瘤細(xì)胞的方法,其特征在于所述的步驟(2)中,輻照時間為5-15分鐘。