1.一種誘導(dǎo)骨骼肌肌源性干細(xì)胞成脂分化的培養(yǎng)基,其特征在于,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中包含3-異丁基-1-甲基黃嘌呤、胰島素、吲哚美辛、地塞米松、吡格列酮和FBS。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述培養(yǎng)基,其特征在于,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中包含0.1mM3-異丁基-1-甲基黃嘌呤、5mg/L胰島素、0.1mM吲哚美辛、1μM地塞米松、5-15μM吡格列酮、體積分?jǐn)?shù)10%的FBS。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述培養(yǎng)基,其特征在于,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中包含0.1mM3-異丁基-1-甲基黃嘌呤、5mg/L胰島素、0.1mM吲哚美辛、1μM地塞米松、5-15μM吡格列酮、體積分?jǐn)?shù)10%的FBS。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述培養(yǎng)基,其特征在于,所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基為高糖DMEM培養(yǎng)基。
5.權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述培養(yǎng)基在誘導(dǎo)骨骼肌肌源性干細(xì)胞成脂分化和/或制備誘導(dǎo)骨骼肌肌源性干細(xì)胞成脂分化培養(yǎng)基中的應(yīng)用。
6.一種誘導(dǎo)骨骼肌肌源性干細(xì)胞成脂分化的方法,其特征在于,將骨骼肌肌源性干細(xì)胞接種至權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述培養(yǎng)基中誘導(dǎo)分化。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述方法,其特征在于,所述誘導(dǎo)分化為在5%二氧化碳、37℃下誘導(dǎo)分化21天。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述方法,其特征在于,所述骨骼肌肌源性干細(xì)胞的接種密度為2×104cells/mL。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述方法,其特征在于,所述骨骼肌肌源性干細(xì)胞按照如下方法制備:
將肌肉組織剪成碎塊并清洗,然后加入2倍的體積的混合酶,包括2.4u/mL Dispase II、1%I型膠原酶,2.5mmol/L CaCl2,混勻后置37℃恒溫?fù)u床中消化60min左右,直到試管中的肌肉碎塊消化為肌糜,肉眼看不到肌塊;消化結(jié)束后,1000r/min離心5min,棄上清;加入2~3倍體積的0.25%胰蛋白酶-EDTA,混勻后置37℃恒溫?fù)u床中消化15min,消化結(jié)束后,1000r/min離心5min,棄上清;加入PBS重懸,1000r/min離心5min,棄上清;加入3倍肌糜體積的PBS反復(fù)吹打后經(jīng)200目濾網(wǎng)過(guò)濾,收集的濾液1000r/min離心5min,棄上清;含20%FBS的DMEM/F12重懸細(xì)胞,采用差速貼壁分離技術(shù)對(duì)MDSCs進(jìn)行分離,然后進(jìn)行正常培養(yǎng)、傳代。