1.海產(chǎn)品副溶血性弧菌toxR基因的實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)引物,其特征在于包括上游引物toxR-F和下游引物toxR-R,它們具有以下堿基序列:
上游引物toxR-F:CGCTCGCTGACCAACAAA,
下游引物toxR-R:CGCCAAACAAACTCGTGAA。
2.權(quán)利要求1所述PCR快速檢測(cè)引物在PCR擴(kuò)增副溶血性弧菌toxR基因方面的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性30s;95℃5s,60℃30s擴(kuò)增40個(gè)循環(huán),反應(yīng)耗時(shí)45min。
4.海產(chǎn)品副溶血性弧菌toxR基因的實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于該試劑盒包含A液、B液、C液和PCR反應(yīng)管;
所述A液為PCR反應(yīng)液,含SYBR Premix Ex TaqTM(2×)(Takara寶生物工程大連有限責(zé)任公司,規(guī)格:1ml×5,Code No.:RR820L,內(nèi)含TaKaRa Ex Taq HS DNA Polymerase,dNTP Mixture,Mg2+,Tli RNaseH,SYBR Green I)12.5μL和上游引物toxR-F(10μ mol/L)和下游引物toxR-R(10μ mol/L)各1μL,去離子水8.5μL;
所述B液為副溶血性弧菌toxR基因的DNA,作為陽(yáng)性對(duì)照;
上述C液為去離子水,作為陰性對(duì)照;
所述上游引物toxR-F和下游引物toxR-R具有以下堿基序列:
上游引物toxR-F:CGCTCGCTGACCAACAAA,
下游引物toxR-R:CGCCAAACAAACTCGTGAA。
5.權(quán)利要求1所述PCR快速檢測(cè)試劑盒在PCR擴(kuò)增副溶血性弧菌toxR基因方面的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性30s;95℃5s,60℃30s擴(kuò)增40個(gè)循環(huán),反應(yīng)耗時(shí)45min。