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一種寡核苷酸染液及其應(yīng)用與用法的制作方法

文檔序號:12098012閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種寡核苷酸染液,所述染液包含四個寡核苷酸探針:

第一個寡核苷酸探針為YMPNS-CentC69-1,5′端由FAM修飾,其核苷酸序列為:

5′-CCCAATCCACTACTTTAGGTCCAAAACTCATGTTTGGGGTGGTTTCGCGCAATTTCGTT-3′;

第二個寡核苷酸探針為MKnob-2,5′端由FAM修飾,其核苷酸序列為:

5′-GAAGGCTAACACCTACGGATTTTTGACCAAGAAATGGTCTCCACCAGAAATCCAAAAAT-3′;

第三個寡核苷酸探針為YMPNS-MR68-3,5′端由TAMRA修飾,其核苷酸序列為:

5′-CTCTCGTGCGAATACAATGCCCTCAATATCATAGAAACACTATTCCTTTAGTGTGAATA-3′;

第四個寡核苷酸探針為(ACT)10,5′端由TAMRA修飾,其核苷酸序列為:

5′-ACTACTACTACTACTACTACTACTACTACTACTACT-3′。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的寡核苷酸染液,其特征在于:所述寡核苷酸染液包括YMPNS-CentC69-1、MKnob-2、YMPNS-MR68-3、(ACT)10和2×SSC,其中YMPNS-CentC69-1、MKnob-2、YMPNS-MR68-3、(ACT)10四種探針組成探針混合液;所述寡核苷酸染液按體積比計(jì),探針混合液︰2×SSC=22︰25;所述探針混合液由體積比YMPNS-CentC69-1:MKnob-2:YMPNS-MR68-3:(ACT)10=20:4:15:5混合所得,其中YMPNS-CentC69-1、MKnob-2、YMPNS-MR68-3、(ACT)10混合前均為1.0μg/μl的水溶液。

3.一種權(quán)利要求1或2所述寡核苷酸染液的應(yīng)用,其特征在于:用于玉米及其親緣物種中染色體快速鑒定。

4.一種權(quán)利要求1或2所述寡核苷酸染液的應(yīng)用,其特征在于:用于制備商品化染液。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的寡核苷酸染液的應(yīng)用,其特征在于:所述商品化染液為試劑盒及其由試劑盒衍生的其它商品。

6.一種權(quán)利要求3所述寡核苷酸染液的應(yīng)用的使用方法,所述寡核苷酸染液用于玉米及其親緣物種中染色體快速鑒定,其特征在于:將寡核苷酸染液加8μl在每張不經(jīng)變性的染色體制片上,并加入2.5μl50%w/v硫酸葡聚糖水溶液于37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行雜交2小時,然后在42℃2×SSC中洗5分鐘,用DAPI套染后在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察。

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