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過表達(dá)尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因及其重組大腸桿菌的構(gòu)建方法和純化方法與流程

文檔序號:12056449閱讀:來源:國知局
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了過表達(dá)尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因及其重組大腸桿菌PLY127?2的構(gòu)建方法和純化方法,特點(diǎn)是通過克隆嗜酸乳桿菌ATCC4356的UGPase基因LBA0625片段連接到pET?28a表達(dá)載體上,轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3)中,通過紅霉素抗性篩選并鑒定獲得帶有目的基因的重組菌,即過表達(dá)尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因的重組大腸桿菌,對重組大腸桿菌進(jìn)行誘導(dǎo)后,并利用Ni?NTA瓊脂糖親和層析成功純化出UGPase,優(yōu)點(diǎn)是誘導(dǎo)后的UGPase酶活為456.14IU/L,是對照組的2.34倍,獲得的UGPase的活性回收率為53.55%,蛋白純化倍數(shù)為12.96倍。

技術(shù)研發(fā)人員:彭劉楊;曾小群;潘道東;王剛;吳愛娟;吳振;曹錦軒;孫楊贏
受保護(hù)的技術(shù)使用者:寧波大學(xué)
文檔號碼:201611115942
技術(shù)研發(fā)日:2016.12.07
技術(shù)公布日:2017.05.24

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