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一種基于血糖儀檢測(cè)鹽酸克倫特羅殘留的方法與流程

文檔序號(hào):12743896閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種基于血糖儀檢測(cè)鹽酸克倫特羅殘留的方法,其特征在于:包括以下步驟:

1)在磁珠表面包被鹽酸克倫特羅完全抗原,封閉,得到免疫磁珠探針;

2)在膠體金溶液中加入二抗,混勻后加入轉(zhuǎn)化酶,得到酶標(biāo)二抗;

3)在待測(cè)溶液中加入免疫磁珠探針、鹽酸克倫特羅抗體,免疫反應(yīng)后磁分,得到磁珠/抗原-抗體免疫復(fù)合物;再加入酶標(biāo)二抗,反應(yīng)后磁分,得到磁珠/抗原-抗體/酶標(biāo)二抗免疫復(fù)合物;

4)在磁珠/抗原-抗體/酶標(biāo)二抗免疫復(fù)合物中加入蔗糖溶液,水解反應(yīng)后,用血糖儀檢測(cè)葡萄糖信號(hào)值,并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測(cè)溶液中鹽酸克倫特羅的殘留量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟1)中磁珠在包被抗原前先進(jìn)行活化處理。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟2)中膠體金采用檸檬酸三鈉還原法制備。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟2)中二抗與轉(zhuǎn)化酶的質(zhì)量比為1:8~12。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟3)中免疫磁珠探針的加量為20~30mg,鹽酸克倫特羅抗體的濃度為1:1000~1:700,酶標(biāo)二抗的濃度為1:800~1:400。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟4)中水解反應(yīng)的時(shí)間為20~40min,反應(yīng)溫度40~60℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟4)中標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作方法為:分別在系列濃度的鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品溶液中加入免疫磁珠探針、鹽酸克倫特羅抗體,免疫反應(yīng)后磁分,得到磁珠/抗原-抗體免疫復(fù)合物,再加入酶標(biāo)二抗,反應(yīng)后磁分,得到磁珠/抗原-抗體/酶標(biāo)二抗免疫復(fù)合物;在上述免疫復(fù)合物中加入蔗糖溶液,水解反應(yīng)后用血糖儀檢測(cè)葡萄糖信號(hào)值,以標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度為橫坐標(biāo),以添加標(biāo)準(zhǔn)品的血糖儀各信號(hào)值與無標(biāo)準(zhǔn)品添加的血糖儀信號(hào)值的比值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

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