本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)種植技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從甜葉菊中提取甜菊糖苷的方法。
背景技術(shù)：
甜葉菊(stevia rebaudiana)別名甜菊﹑糖草，屬菊科(Compositae), 斯臺維亞屬，原產(chǎn)地在南美亞熱帶地區(qū)。我國自1976年開始由南京中山植物園、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院等科研單位先后從日本引進甜葉菊試種成功。甜葉菊含有14種微量元素﹑32種營養(yǎng)成分，在體內(nèi)不代謝、不蓄積、不致癌、無毒性，其安全性已得到國際FAO和WHO以及美國FAD等組織的認可，因此它既是極好的糖源，又是良好的營養(yǎng)來源。
甜葉菊糖苷，簡稱甜菊苷，是從干燥后的甜葉菊葉片中提取出來的一類具甜味的萜烯類配糖體，主要包含8種具有不同甜度的糖苷。甜菊苷具有高甜度(為蔗糖的200-300倍)﹑低熱量(僅為蔗糖的1/300)的特性，長期食用不會使人發(fā)胖，特別適宜肥胖病、糖尿病、高血壓、動脈硬化、齲齒病患者使用，而且物理、化學(xué)性能穩(wěn)定、無發(fā)酵性，可延長甜葉菊糖苷制品的保質(zhì)期。因而日益引起人們的關(guān)注和重視，被廣泛應(yīng)用在食品和藥物行業(yè)中，被譽為繼蔗糖、甜菜糖之后的第三種天然糖源，是最有發(fā)展前途的新糖源。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種從甜葉菊中提取甜菊糖苷的方法。
本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：
一種從甜葉菊中提取甜菊糖苷的方法，包含如下步驟，
1）葉片處理，將甜葉菊葉片剔除雜質(zhì)和色澤灰暗后，真空冷凍干燥，粉碎、過篩子，得到甜葉菊粉末；
2）第一次除雜，向步驟1)中得到的甜葉菊粉末加入其重量3-5倍的正己烷，攪拌20-40分鐘、過濾、回收溶劑，取甜葉菊濾餅、烘干、得到第一除雜粉末；
3）提取，在加熱攪拌裝置中加入步驟2）中得到的第一除雜粉末和其重量3-5倍的乙醇與水混合溶液，加熱攪拌裝置的加熱溫度為40-60℃，攪拌速度為200-300轉(zhuǎn)/分鐘，處理時間為20-40分鐘，然后過濾，取濾液，重復(fù)提取1-3次后合并濾液，將濾液干燥，得到甜菊糖苷粗品；
4）第二次除雜，將步驟3）中得到的甜菊糖苷粗品溶于適量的水，加入聚合硫酸鐵后用氫氧化鈣調(diào)節(jié)pH至7.5，攪拌5-15分鐘后，靜置10-20分鐘，過濾、得到第二除雜過濾液；
5）樹脂吸附；用經(jīng)過預(yù)處理的HPD-100大孔吸附樹脂純化步驟4）中得到的第二除雜過濾液，將第二除雜過濾液減壓濃縮后上樣，HPD-100樹脂吸附時的流速為2 BV/h，吸附飽和后，先用流速為4 BV/h的純水沖洗5-15分鐘，然后用乙醇與乙酸乙酯混合溶劑進行洗脫，洗脫速度為3 BV/h，收集乙醇與乙酸乙酯混合溶劑的洗脫液，所述乙醇與乙酸乙酯混合液中，乙醇與乙酸乙酯的體積比為5:2；
6）收集，將收集的乙醇與乙酸乙酯混合溶劑洗脫液蒸發(fā)濃縮、烘干，即得甜菊糖苷。
優(yōu)選的，所述步驟3）中乙醇與水混合溶劑，乙醇的質(zhì)量百分比為40%-60%。
一般吸附樹脂里含有一些惰性溶劑，故使用前須根據(jù)應(yīng)用需要，進行不同深度預(yù)處理：首先在提取柱內(nèi)，用清水逆流洗樹脂1-2小時，再正流洗1-2小時。放凈水后，加入高于樹脂層20-30厘米的乙醇浸泡3-4小時，然后放凈洗滌液，為一次清洗過程。用同樣方法反復(fù)洗至出口洗滌液取樣在試管中加3倍量水不顯渾濁為止，然后用清水充分淋洗至無明顯乙醇氣味，即完成預(yù)處理過程。
本發(fā)明的有益效果是：提取效果好，得到的甜菊糖苷純度高，平均為95%以上。
具體實施方式
實施例1
一種從甜葉菊中提取甜菊糖苷的方法，將甜葉菊葉片剔除雜質(zhì)和色澤灰暗后，真空冷凍干燥，粉碎、過篩子，得到甜葉菊粉末；
取上述甜葉菊粉末500 g加入1.5 Kg正己烷，攪拌20分鐘、過濾、回收溶劑，取甜葉菊濾餅、烘干、得到第一除雜粉末；在加熱攪拌裝置中加入第一除雜粉末和其重量3倍的乙醇與水混合溶液，所述乙醇與水混合溶劑中，乙醇的質(zhì)量百分比為40%，加熱攪拌裝置的加熱溫度為40℃，攪拌速度為200轉(zhuǎn)/分鐘，處理時間為20分鐘，然后過濾，取濾液，將濾液干燥，得到甜菊糖苷粗品；將甜菊糖苷粗品溶于適量的水，加入聚合硫酸鐵后用氫氧化鈣調(diào)節(jié)pH至7.5，攪拌5分鐘后，靜置10分鐘，過濾、得到第二除雜過濾液；用經(jīng)過預(yù)處理的HPD-100大孔吸附樹脂純化第二除雜過濾液，將第二除雜過濾液減壓濃縮后上樣，HPD-100樹脂吸附時的流速為2 BV/h，吸附飽和后，先用流速為4 BV/h的純水沖洗5分鐘，然后用乙醇與乙酸乙酯混合溶劑進行洗脫，洗脫速度為3 BV/h，收集乙醇與乙酸乙酯混合溶劑的洗脫液，所述乙醇與乙酸乙酯混合液中，乙醇與乙酸乙酯的體積比為5:2；將收集的乙醇與乙酸乙酯混合溶劑洗脫液蒸發(fā)濃縮、烘干，即得甜菊糖苷，所得甜菊糖苷的純度為95.8%。
實施例2
一種從甜葉菊中提取甜菊糖苷的方法，將甜葉菊葉片剔除雜質(zhì)和色澤灰暗后，真空冷凍干燥，粉碎、過篩子，得到甜葉菊粉末；
取上述甜葉菊粉末500 g加入2.0 Kg正己烷，攪拌30分鐘、過濾、回收溶劑，取甜葉菊濾餅、烘干、得到第一除雜粉末；在加熱攪拌裝置中加入第一除雜粉末和其重量4倍的乙醇與水混合溶液，所述乙醇與水混合溶劑中，乙醇的質(zhì)量百分比為50%，加熱攪拌裝置的加熱溫度為50℃，攪拌速度為250轉(zhuǎn)/分鐘，處理時間為30分鐘，然后過濾，取濾液，將濾液干燥，得到甜菊糖苷粗品；將甜菊糖苷粗品溶于適量的水，加入聚合硫酸鐵后用氫氧化鈣調(diào)節(jié)pH至7.5，攪拌10分鐘后，靜置15分鐘，過濾、得到第二除雜過濾液；用經(jīng)過預(yù)處理的HPD-100大孔吸附樹脂純化第二除雜過濾液，將第二除雜過濾液減壓濃縮后上樣，HPD-100樹脂吸附時的流速為2 BV/h，吸附飽和后，先用流速為4 BV/h的純水沖洗10分鐘，然后用乙醇與乙酸乙酯混合溶劑進行洗脫，洗脫速度為3 BV/h，收集乙醇與乙酸乙酯混合溶劑的洗脫液，所述乙醇與乙酸乙酯混合液中，乙醇與乙酸乙酯的體積比為5:2；將收集的乙醇與乙酸乙酯混合溶劑洗脫液蒸發(fā)濃縮、烘干，即得甜菊糖苷，所得甜菊糖苷的純度為96.5%。
實施例3
一種從甜葉菊中提取甜菊糖苷的方法，將甜葉菊葉片剔除雜質(zhì)和色澤灰暗后，真空冷凍干燥，粉碎、過篩子，得到甜葉菊粉末；
取上述甜葉菊粉末500 g加入2.5 Kg正己烷，攪拌40分鐘、過濾、回收溶劑，取甜葉菊濾餅、烘干、得到第一除雜粉末；在加熱攪拌裝置中加入第一除雜粉末和其重量5倍的乙醇與水混合溶液，所述乙醇與水混合溶劑中，乙醇的質(zhì)量百分比為60%，加熱攪拌裝置的加熱溫度為60℃，攪拌速度為300轉(zhuǎn)/分鐘，處理時間為40分鐘，然后過濾，取濾液，將濾液干燥，得到甜菊糖苷粗品；將甜菊糖苷粗品溶于適量的水，加入聚合硫酸鐵后用氫氧化鈣調(diào)節(jié)pH至7.5，攪拌15分鐘后，靜置20分鐘，過濾、得到第二除雜過濾液；用經(jīng)過預(yù)處理的HPD-100大孔吸附樹脂純化第二除雜過濾液，將第二除雜過濾液減壓濃縮后上樣，HPD-100樹脂吸附時的流速為2 BV/h，吸附飽和后，先用流速為4 BV/h的純水沖洗15分鐘，然后用乙醇與乙酸乙酯混合溶劑進行洗脫，洗脫速度為3 BV/h，收集乙醇與乙酸乙酯混合溶劑的洗脫液，所述乙醇與乙酸乙酯混合液中，乙醇與乙酸乙酯的體積比為5:2；將收集的乙醇與乙酸乙酯混合溶劑洗脫液蒸發(fā)濃縮、烘干，即得甜菊糖苷，所得甜菊糖苷的純度為97.2%。
以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術(shù)方案進行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。