本發(fā)明涉及藥物化學技術領域，進一步涉及新的化合物及其用途，具體涉及大環(huán)內(nèi)酯類衍生物及其用途。

背景技術：

消化道功能性疾病是臨床上最常見的疾病之一，其中絕大多數(shù)病人存在消化道運動障礙，即消化道動力不足。正常健康人的結腸運動包括短時相性收縮、長時相性收縮、張力性收縮和巨大移行性收縮(GMCs)。一般情況下結腸多處于靜止或低幅非推進性時相性收縮狀況，而GMSs每天出現(xiàn)1-2次，引起集團運動，與排便有關，胃結腸反射是誘發(fā)結腸運動的一種主要形式。絕大多數(shù)消化道功能障礙病人無特異性疾病。功能性便秘病人主要分為結腸通過時間延緩型和通過時間正常型兩類，前者病人可出現(xiàn)GMCs頻率、持續(xù)時間及幅度降低、胃結腸反射減弱或消失，而局部時相性非推進性收縮增強，使得整個結腸運動不協(xié)調，少數(shù)病人出現(xiàn)小腸運動減弱。通過時間正常的患者主要存在肛門括約肌功能異常和直腸感覺功能下降。這些組織結構的功能依賴于各種神經(jīng)遞質和體液因子的釋放而建立聯(lián)系，各種遞質和信使與相應的受體結合，執(zhí)行不同的生理功能。因消化道動力不足引發(fā)的消化不良、胃脹、胃食管反流、動力性腸梗阻、便秘、大便干燥、腸蠕動乏力，腸易激綜合征等疾病嚴重影響患者的日常生活。

目前的促消化道動力藥物的靶點選擇性較差、副作用較多，因此，開發(fā)一種靶點選擇性強、副作用較少的促胃腸動力藥物具有深遠的臨床意義和廣闊的市場前景。

大環(huán)內(nèi)酯類化合物普遍具有抗生素活性，長期服用具有抗生素活性的藥物，會引起體內(nèi)菌群的耐藥性，副作用大。大環(huán)內(nèi)酯類衍生物作為其他醫(yī)藥用途時，其抗生素活性所帶來的副作用大大限制了藥物的開發(fā)和使用。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在針對現(xiàn)有技術的技術缺陷，提供一種大環(huán)內(nèi)酯類衍生物及其用途，以解決現(xiàn)有技術中缺乏一種類似化合物的技術問題。

本發(fā)明要解決的另一技術問題是現(xiàn)有技術的促胃腸動力藥物療效有待提升。

本發(fā)明要解決的再一技術問題是現(xiàn)有技術的大環(huán)內(nèi)酯類化合物或其衍生物因具有抗生素活性、易導致副作用的問題而限制了其他制藥用途的技術問題。

為實現(xiàn)以上技術目的，本發(fā)明采用以下技術方案：

大環(huán)內(nèi)酯類衍生物，其特征在于具有如式(1)所示的結構：

其中，R1選自氫、羥基、鹵素、C1-C6烷基、C1-C4烷氧基、C1-C6鏈烯基、(CH2)m(C6-C10元芳基)、(CH2)m(C5-C10元雜芳基)或C2-C10炔基；R2、R3均選自氫、羥基、鹵素、C1-C6烷基、C1-C6鏈烯基、(CH2)m(C6-C10元芳基)、(CH2)m(C5-C10元雜芳基)、C2-C10炔基、C1-C4烷氧基、吡喃糖基，其中，所述吡喃糖基是未取代的或者被下列基團中的一個或多個取代：氫、鹵素、C1-C6烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷?；?、C1-C4烷酰氧基；每個m獨立地為0-4的整數(shù)。

作為優(yōu)選，所述大環(huán)內(nèi)酯類衍生物選自化合物III-1、化合物III-2、化合物III-3、化合物III-4、化合物III-5，這些化合物的結構如下所示：

上述大環(huán)內(nèi)酯類衍生物在制備促進消化道動力藥物方面的用途。

上述大環(huán)內(nèi)酯類衍生物在制備輔助促進消化道動力藥物方面的用途。

作為優(yōu)選，所述促進消化道動力藥物的適應癥為消化不良、胃脹、胃食管反流、腸蠕動乏力，動力性腸梗阻、便秘、大便干燥、腸易激綜合征等引發(fā)胃腸動力不足的一種或多種疾病類型。

作為優(yōu)選，所述促進消化道動力藥物包括：

化合物III-1、化合物III-2、化合物III-3、化合物III-4、化合物III-5或它們的組合；或者化合物III-1、化合物III-2、化合物III-3、化合物III-4、化合物III-5在藥學上可接受的酸、堿、鹽、酯、水合物或它們的組合。

作為優(yōu)選，所述促進消化道動力藥物的劑型選自注射劑、片劑、膠囊劑、溶液劑、顆粒劑、滴劑、散劑、糖漿劑、酒劑、酊劑、露劑、膜劑、丸劑、氣霧劑、軟膏劑、栓劑、洗劑或它們的組合。

作為優(yōu)選，所述促進消化道動力藥物的給藥方式包括：口服、注射、植入、外用、噴霧、吸入或它們的組合。

本發(fā)明提供了一種全新結構的大環(huán)內(nèi)酯類衍生物，并通過實驗手段發(fā)現(xiàn)其具有很好的促進消化道動力的作用，能增強腸蠕動能力，增加排便量，可加快腸內(nèi)容物通過；在此基礎上，本發(fā)明進一步發(fā)現(xiàn)上述大環(huán)內(nèi)酯類衍生物抗生素活性低、副作用小，可作為促胃腸動力藥服用。特別的本發(fā)明還對篩選出的藥效最好的化合物III-3，利用家兔，比格犬，狨猴進行了進一步的藥效評價，并評價了其急性毒性和心臟毒性，實驗結果表明化合物III-3具有很好的促進胃腸道動力的作用及安全性，具有很好的成藥性。

附圖說明

圖1示出了大環(huán)內(nèi)酯類衍生物的合成路線圖。

圖2大環(huán)內(nèi)酯類衍生物對腸蠕動乏力模型的影響結果圖。

圖3示出了化合物III-3對兔子、比格犬、猴子的排便重量及排便粒數(shù)的影響。

圖4示出了化合物III-3對大鼠的心臟毒性檢測結果。

具體實施方式

下面將結合本發(fā)明實施例中的附圖，對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。以下所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對于本領域的技術人員來說，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。

本發(fā)明通過化學反應制備了化合物大環(huán)內(nèi)酯類衍生物，通過¹H-NMR(核磁共振氫譜)和MS(質譜)對大環(huán)內(nèi)酯類衍生物進行了結構鑒定。通過一系列實驗檢測大環(huán)內(nèi)酯類衍生物的抑菌活性和促進腸道動力的活性。具體實施方式如下：

下列實施例中，所用的試驗材料及其來源包括：

(1)小鼠

昆明小鼠(雌性)：由中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院試驗動物中心和北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。

動物到達后，由專人接收動物于雙走廊屏障環(huán)境小鼠飼養(yǎng)室內(nèi)，填寫《試驗動物接收記錄表》(BG-017-V00)，接收時對動物大體情況進行觀察，并隨機抽取動物進行稱重，確保試驗動物與引進標準基本吻合。實驗動物使用許可證號：SYXK(津)2012-0003。

(2)供試品

阿奇霉素：白色或類白色結晶性粉末，購自大連美侖生物技術有限公司，批號：20130216，純度：94.5％(符合中國藥典2010年版二部)。

硫酸阿托品：白色或類白色結晶性粉末，購自大連美侖生物技術有限公司，批號：20130824，純度：98.5％(符合中國藥典2010年版二部)。

琥珀酸普卡必利：白色或類白色結晶性粉末，購自上海法默生物科技有限公司，批號：20131010，純度：99.45％(符合中國藥典2010年版二部)。

鹽酸購自利安隆博華(天津)醫(yī)藥有限公司；氫氧化鈉購自天津市化學試劑供銷公司；無水硫酸鎂購自天津市光復精細化工研究所；二氯甲烷購自天津市化學試劑供銷公司；大腸桿菌來自天津國際醫(yī)藥聯(lián)合研究高通量藥物篩選中心。LB培養(yǎng)基中用的牛肉膏和蛋白胨，都購自OXOID公司。

供試品于室溫保存。

(5)所用藥物及試劑的配制方法包括：

a)阿奇霉素溶液的配制：稱取阿奇霉素0.45g，溶于10ml的0.9％的生理鹽水溶液中，配制成45mg/ml的溶液，待其充分溶解后，用0.22μm濾器過濾除菌后使用，每次使用時現(xiàn)用現(xiàn)配。溶液的配制及使用均應在無菌生物安全柜中操作。

b)硫酸阿托品溶液的配制：稱取硫酸阿托品0.0425g，溶于10mL的0.9％的生理鹽水溶液中，配制成4.25mg/ml的溶液，待其充分溶解后，用0.22μm濾器過濾除菌后使用，每次使用時現(xiàn)用現(xiàn)配。溶液的配制及使用均應在無菌生物安全柜中操作。

c)大環(huán)內(nèi)酯類衍生物溶液的配制：稱取適量大環(huán)內(nèi)酯類衍生物，溶于10mL的0.9％的生理鹽水溶液中，配制成0.05mol/L的溶液，待其充分溶解后，用0.22μm濾器過濾除菌后使用，每次使用時現(xiàn)用現(xiàn)配。溶液的配制及使用均應在無菌生物安全柜中操作。

d)琥珀酸普卡必利溶液的配制：稱取琥珀酸普卡必利0.0009g，溶于10mL的0.9％的生理鹽水溶液中，配制成0.09mg/ml的溶液，待其充分溶解后，用0.22μm濾器過濾除菌后使用，每次使用時現(xiàn)用現(xiàn)配。溶液的配制及使用均應在無菌生物安全柜中操作。

e)0.9％生理鹽水的配置：稱取0.9g NaCl，溶于100mL的無菌水中，用0.22μm的濾膜抽濾，溶液的配置及抽濾均應在無菌生物安全柜中操作。

實施例1大環(huán)內(nèi)酯類衍生物的合成及鑒定

將紅霉素A 28.58g(38.94mmol)、鹽酸羥胺15.6g(224.4mmol)溶于60.0ml無水甲醇中，再加入三乙胺15.6ml(112.4mmol),攪拌加熱回流24小時，反應完成后，0℃冷卻抽濾，濾餅用少量甲醇洗滌，將所得固體懸浮于80ml甲醇中，攪拌下滴加20ml氨水，過濾除去不溶性物質，將甲醇氨水溶液滴加至150ml水中，有大量白色固體析出，抽濾，水洗至中性，干燥得到固體a(見圖1)，產(chǎn)率為80.6％，熔點為163-166℃，質譜數(shù)據(jù)為MS(M/Z):749.75(M+H⁺)。

將9-肟紅霉素A(a)0.1g(0.134mmol)溶于1.6ml的丙酮中，在0-5℃溫度下，邊攪拌邊滴加0.122g/ml的對甲苯磺酰氯溶液(溶劑為丙酮)0.416ml(0.269mmol)和0.045g/ml的碳酸氫鈉水溶液1ml(0.536mmol)，2h內(nèi)滴加完畢，在室溫下繼續(xù)反應2h。反應完成后，將反應液抽濾，減壓蒸餾濾液以蒸除丙酮，加入10％氫氧化鈉，將pH值調至10，用DCM萃取3次，合并有機相，有機相用水洗2次，然后用無水硫酸鈉干燥。蒸除DCM，真空干燥，得白色固體(b)(見圖1)，產(chǎn)率為91.8％，熔點為132-135℃，質譜數(shù)據(jù)為MS(M/Z)：731.7374(M+H⁺)。

在0℃冰浴條件下，將0.1g b(0.1435mmol)、0.088g硼氫化鈉(2.333mmol)溶于1.2ml無水甲醇中，攪拌反應4h，然后撤掉冰浴，繼續(xù)在室溫下反應20h，反應完成后，通入二氧化碳至無白色固體生成，抽濾，濾餅用少量甲醇洗滌，減壓蒸除甲醇，得白色固體。加入DCM溶解白色固體，有機相用10％碳酸氫鈉洗滌2次，分液，有機相加入100ml水，在攪拌條件下用1mol/L的鹽酸調節(jié)pH值為2-3(優(yōu)選為2.5)，攪拌20分鐘后用10％氫氧化鈉調節(jié)PH值至6-7(優(yōu)選為6.5)，棄去有機層。水層加入20ml DCM,用10％氫氧化鈉將pH值調至11，攪拌15分鐘，分液得到DCM溶劑，真空干燥，得白色固體(III-1)(見圖1)，產(chǎn)率為70.6％,熔點為125-128℃，質譜數(shù)據(jù)為MS(M/Z)：735.70(M+H⁺)；核磁共振氫譜數(shù)據(jù)為：1H NMR(CDCl3,500MHz)δ5.15(d,1H),4.89(dd,1H),4.59(dd,1H),4.40(d,1H),4.11(dq,1H),3.61(d,1H),3.48(ddq,1H),3.34(s,3H),3.27(d,1H),3.22(dd,1H),3.02(d,1H),3.00(dd,1H),2.72(dq,1H),2.42(ddd,1H),2.33(d,1H),2.28(s,6H),2.25(dq,1H),1.94(ddq,1H),1.86(ddq,1H),1.71(m,2H),1.65(d,1H),1.65(dd,1H),1.57(dd,1H),1.45(ddq,1H),1.39(dd,1H),1.36(d,3H),1.27(s,3H),1.25(s,3H),1.24(m,1H),1.22(d,3H),1.18(d,3H),1.16(d,3H),1.05(s,3H),1.02(d,3H),0.91(d,3H),0.88(t,3H)。

將10g阿奇霉素(13.61mol)溶于70ml的鹽酸中，在室溫下攪拌反應5小時，在冰浴下加入10％的氫氧化鈉，調節(jié)pH值至9，有大量白色固體析出，加入DCM萃取3次，合并有機相，減壓蒸除DCM，真空干燥，得白色固體(III-2)(見圖1)，產(chǎn)率為70.6％，質譜數(shù)據(jù)為MS(M/Z)：590.41(M+H⁺)；核磁共振氫譜數(shù)據(jù)為：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.20(br.s.,1H),5.07(d,J＝6.59Hz,1H),4.95(d,J＝11.00Hz,1H),4.55(d,J＝7.40Hz,1H),4.31(s,1H),4.19(s,1H),4.04(d,J＝8.09Hz,1H),3.38-3.45(m,3H),3.28-3.33(m,1H),2.99-3.11(m,1H),2.67(q,J＝7.00Hz,1H),2.45-2.48(m,1H),2.40(dd,J＝4.50,10.00,12.00Hz,1H),2.30(dd,J＝3.00,12.00Hz,1H),2.21(s,9H),2.09(q,J＝7.30Hz,1H),2.04(t,J＝12.00Hz,1H),1.68-1.82(m,2H),1.59(d,J＝12.37Hz,1H),1.36-1.45(m,2H),1.27-1.39(m,1H),1.05-1.14(m,10H),0.97(s,3H),0.94(d,J＝6.59Hz,3H),0.87(d,J＝7.17Hz,3H),0.83(d,J＝6.82Hz,3H),0.75(t,J＝7.22Hz,3H)。

將2.5g阿奇霉素溶于200ml鹽酸中，油浴加熱至40℃，攪拌反應10小時，然后使用10％氫氧化鈉調節(jié)pH值為10，并且攪拌15分鐘，使用二氯甲烷萃取3次，收集有機相，使用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除二氯甲烷，真空干燥，得白色固體為大環(huán)內(nèi)酯類衍生物(III-3)(見圖1)，產(chǎn)率為81.8％；質譜數(shù)據(jù)為MS(M/Z):434.67(M+H⁺)；核磁共振氫譜數(shù)據(jù)為：1H-NMR(400MHz,DMSO)δ6.15(s,1H),5.01(dd,J＝10.9,2.1Hz,1H),4.60(d,J＝5.7Hz,1H),4.31(s,1H),4.15(d,J＝8.4Hz,1H),3.74(d,J＝4.7Hz,1H),3.46(d,J＝8.4Hz,1H),3.39(dd,J＝9.8,6.0Hz,1H),3.28(d,J＝4.7Hz,1H),2.68(q,J＝6.4Hz,1H),2.55–2.43(m,1H),2.31(dd,J＝12.4,2.7Hz,1H),2.24(s,3H),2.11–1.95(m,2H),1.85–1.69(m,2H),1.47–1.30(m,3H),1.11(d,J＝6.7Hz,3H),1.03(d,J＝15.7Hz,6H),0.96(d,J＝6.7Hz,3H),0.84(d,J＝7.0Hz,6H),0.78(s,3H)。

將1.5g III-1(2.0535mmol)溶于120ml的鹽酸中，在50℃下攪拌反應10小時，在冰浴下加入10％的氫氧化鈉，調節(jié)pH值至9，有大量白色固體析出，加入DCM萃取3次，合并有機相，減壓蒸除DCM，真空干燥，得白色固體(III-4)(見圖1)，產(chǎn)率為60.1％，質譜數(shù)據(jù)為MS(M/Z)：420.47(M+H⁺),核磁共振氫譜數(shù)據(jù)為1H-NMR(400MHz,DMSO)δ6.15(s,1H),5.01(dd,J＝10.9,2.1Hz,1H),4.60(d,J＝5.7Hz,1H),4.31(s,1H),4.15(d,J＝8.4Hz,1H),3.74(d,J＝4.7Hz,1H),3.46(d,J＝8.4Hz,1H),3.39(dd,J＝9.8,6.0Hz,1H),3.28(d,J＝4.7Hz,1H),2.68(q,J＝6.4Hz,1H),2.55–2.43(m,1H),2.31(dd,J＝12.4,2.7Hz,1H),2.11–1.95(m,2H),1.85–1.69(m,2H),1.47–1.30(m,3H),1.11(d,J＝6.7Hz,3H),1.03(d,J＝15.7Hz,6H),0.96(d,J＝6.7Hz,3H),0.84(d,J＝7.0Hz,6H),0.78(s,3H)。

將35mg阿奇霉素溶于3ml二氯甲烷中，在0℃條件下將79mg酰氯類化合物滴加入反應液中，之后加入三乙胺，在0℃條件下反應2小時后，在室溫條件下反應過夜，次日減壓蒸除二氯甲烷，得化合物(III-5)，產(chǎn)率為25％，質譜數(shù)據(jù)為MS(M/Z):1069.62(M+H+)；核磁共振氫譜數(shù)據(jù)為：1H-NMR(400MHz,DMSO)δ7.75–7.67(m,4H),7.13(d,J＝8.8Hz,2H)，7.07(d,J＝5.8Hz,2H)，6.15(s,1H),5.01(dd,J＝10.9,2.1Hz,1H),4.92(d,J＝2.3Hz,1H)，4.60(d,J＝5.7Hz,1H),4.31(s,1H),4.15(d,J＝8.4Hz,1H),4.12–3.99(m,4H),3.74(d,J＝4.7Hz,1H),3.46(d,J＝8.4Hz,1H),3.39(dd,J＝9.8,6.0Hz,1H),3.28(d,J＝4.7Hz,1H),2.68(q,J＝6.4Hz,1H),2.55–2.43(m,1H),2.31(dd,J＝12.4,2.7Hz,1H),2.11–1.95(m,2H),2.06–1.94(m,2H),1.85–1.69(m,2H),1.47–1.30(m,3H),1.11(d,J＝6.7Hz,3H),1.03(d,J＝15.7Hz,6H),0.96(d,J＝6.7Hz,3H),0.84(d,J＝7.0Hz,6H),0.78(s,3H)。

實施例2大環(huán)內(nèi)酯類衍生物的抑菌活性測試

實驗方法：

1)取5μL大腸桿菌甘油菌，接種到5mL的液體LB培養(yǎng)基中，置于37℃搖床中，220rpm/min，過夜培養(yǎng)；

2)將培養(yǎng)過夜的大腸桿菌倒入250ml的LB培養(yǎng)基中，37℃，220rpm培養(yǎng)3小時；

3)3小時之后，將錐形瓶中的菌液均分到小試管中，每試管中5ml,在各試管中加入5μl同等摩爾量的衍生物，培養(yǎng)24小時，每間隔2-4小時測試OD₆₀₀值，并計算抑菌率，抑菌率＝(1-(衍生物的OD₆₀₀值)/(DMSO空白組的OD₆₀₀值))x100％。

抑菌活性測試結果：

大環(huán)內(nèi)酯類衍生物的抑菌活性如表1，表2所示，其中表1是化合物的濃度為5.344μM下的抑菌率，表2是化合物的濃度為10.688μM下的抑菌率；表1及表2的結果表明大環(huán)內(nèi)酯類衍生物的抑菌活性明顯低于大環(huán)內(nèi)酯類抗生素阿奇霉素，通過結構改造，合成的大環(huán)內(nèi)酯類衍生物的抑菌活性明顯降低。

表1.大環(huán)內(nèi)酯類衍生物在5.344μM濃度下對大腸桿菌的抑菌率

表2.大環(huán)內(nèi)酯類衍生物在10.688μM濃度下對大腸桿菌的抑菌率

實施例3大環(huán)內(nèi)酯類衍生物藥效學檢測

3.1腸蠕動乏力模型小鼠的給藥治療：

將45只小鼠隨機分為九組：正常組、模型對照組、陽性藥琥珀酸普卡必利組、阿奇霉素組，大環(huán)內(nèi)酯類衍生物化合物III-1、化合物III-2、化合物III-3、化合物III-4、化合物III-5五個組，每組5只。正常組每只灌胃給予0.1mL的0.9％生理鹽水；造模期間，模型對照組、大環(huán)內(nèi)酯類衍生物組、陽性藥琥珀酸普卡必利組和阿奇霉素組灌胃給予0.1mL的硫酸阿托品的水溶液，一天兩次，連續(xù)給藥兩天。在建模后第1天，給予小鼠藥物治療，正常組以及對照組每次用0.1mL的0.9％的生理鹽水灌胃，大環(huán)內(nèi)酯類衍生物組每次分別用0.1mL的上述配置的0.05mol/L的大環(huán)內(nèi)酯類衍生物水溶液灌胃，陽性藥琥珀酸普卡必利組每次分別用0.1mL的上述配置的琥珀酸普卡必利溶液灌胃，阿奇霉素組每次分別用0.1mL的上述配置的阿奇霉素溶液灌胃，一天一次，給藥一天。次日給碳末，1.5h后剖殺，觀察并計算小鼠腸內(nèi)的碳末推進距離，分別記錄整段小腸的長度和碳末推進的小腸長度,并計算腸道碳末推進率，炭末推進率＝(小腸全長-碳末推進的小腸長度)/小腸全長×100％。

3.2實驗結果

通過觀察實驗中小鼠的生存狀況，給藥后小鼠均未出現(xiàn)中樞性毒副作用，如惡心嘔吐等。

小鼠腸炭末推進率的結果如圖2及表3所示：與腸蠕動乏力模型對照組小鼠相比，所制備的大環(huán)內(nèi)酯類衍生物化合物III-1、化合物III-2、化合物III-3、化合物III-4、化合物III-5均具有不同程度的改善小鼠的腸蠕動乏力，促進小鼠的胃腸道動力的效果，其中化合物III-3改善效果好于改構前的化合物阿奇霉素，并且化合物III-3改善效果好于陽性藥琥珀酸普卡比利。所制備的大環(huán)內(nèi)酯類衍生物具有增強腸蠕動乏力模型小鼠的胃腸蠕動的能力。

表3.大環(huán)內(nèi)酯類衍生物的炭末推進率

實施例4化合物III-3對家兔、比格犬、絨猴腸蠕動作用的檢測

4.1實驗方法

選擇三種測試動物：家兔、比格犬、絨猴。根據(jù)體表面積換算法，依次計算出灌胃劑量為31.14mg/kg、17.8mg/kg、10mg/kg。收集灌胃前最后一次與灌胃后第一次糞便，將糞便進行稱量和計數(shù)。

4.2實驗結果

通過比較灌胃前與灌胃后動物糞便的重量和數(shù)量，發(fā)現(xiàn)給藥化合物III-3后，可以顯著增加實驗動物的糞便重量和數(shù)量；同時給藥組所排糞便便型較軟，沒有出現(xiàn)水樣便。以上實驗表明化合物III-3可以顯著增強家兔、比格犬、絨猴的腸蠕動能力，具有促進腸道動力效果。

實施例5.化合物III-3大鼠的急毒實驗

5.1實驗方法

采用上下法估算化合物的LD50，具體方法如下：

(1)取大鼠1只，在1.75、5.5、17.35、55、175、550、2000mg/kg劑量范圍內(nèi)選擇一個給藥劑量，本試驗選擇175mg/kg灌胃給藥。

(2)觀察大鼠48h的存活狀態(tài)，如果大鼠存活，第二只大鼠給予高一級劑量，即550mg/kg；如果大鼠死亡或出現(xiàn)瀕死狀態(tài)，第二只動物給予低一級的劑量，即55mg/kg，以此類推。本次試驗大鼠在175、550、2000mg/kg劑量時全部存活且狀態(tài)良好，考慮進行2000mg/kg劑量水平的限度試驗。

(3)大鼠2000mg/kg劑量水平的限度試驗。將化合物III-3給予1只大鼠。如果該動物死亡，則進行第(2)步實驗；如果大鼠存活，依次將化合物給予另外4只大鼠，動物總數(shù)為5只。連續(xù)觀察14天，如果1只大鼠在實驗后期死亡，而其他大鼠存活，應停止對其他大鼠給藥，對所有大鼠進行觀察，是否在相似的觀察期間也發(fā)生死亡。后期死亡的大鼠應與其他死亡大鼠同樣計數(shù)，對結果進行評價如下：有3只或3只以上大鼠死亡時，LD50小于2000,；有3只或3只以上大鼠存活時，LD50大于2000；如果有3只以上大鼠死亡，則進行第(2)步試驗。

5.2實驗結果

給予SD大鼠2000mg/kg劑量的化合物后，在15天內(nèi)，大鼠均未死亡，且未出現(xiàn)異常反應。表明其LD50大于2000mg/kg，化合物III-3急性毒性低，安全性好。

實施例6.化合物III-3號對大鼠心臟毒性的影響

6.1實驗方法

將6只SD大鼠隨機分為兩組：正常組、給藥大環(huán)內(nèi)酯類衍生物化合物III-3組，每組3只。將大鼠麻醉后，正常組每只靜脈注射0.5mL的0.9％生理鹽水；大環(huán)內(nèi)酯類衍生物組每只靜脈注射0.5mL的1mM大環(huán)內(nèi)酯類衍生物化合物III-3，心電信號采集使用ECG100C放大器，動物用的針式電極插入動物的皮下，在插入電極的時候，把要插入部位的皮膚提起來，插入電極后再放下皮膚。放大器增益設置在2000，高通濾波器設置在0.05Hz，低通濾波器設置在35Hz OFF。電極連接方法：VIN+連接左下肢，VIN-連接右上肢，GND連接右下肢。設置好心電信號的原始通道和采集參數(shù)后，開始采集心電信號.

6.2實驗結果

通過觀察實驗中大鼠的心電圖情況，給藥化合物III-3后大鼠呼吸正常，行為未出現(xiàn)異常反應，給藥組3只大鼠與對照組相比均未出現(xiàn)心率加快、心率不齊等心臟毒性現(xiàn)象。表明化合物III-3沒有心臟毒性。

盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，對于本領域的普通技術人員而言，可以理解在不脫離本發(fā)明的原理和精神的情況下可以對這些實施例進行多種變化、修改、替換和變型，本發(fā)明的范圍由所附權利要求及其等同物限定。