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一種香蕉冠腐病菌分子檢測(cè)引物及檢測(cè)方法與流程

文檔序號(hào):12109127閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1. 一種香蕉冠腐病菌分子檢測(cè)引物,其特征在于:引物的核苷酸序列為:

上游引物FDF:5’-CCCGAGGACCCCTAAACTCT-3’

下游引物FDR:5’-GCGGGTATTCCTACCTGATCC-3’。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述香蕉冠腐病菌分子檢測(cè)引物,其特征在于:所述上游引物FDF和下游引物FDR對(duì)香蕉冠腐病菌擴(kuò)增出400bp的產(chǎn)物。

3.一種香蕉冠腐病菌的快速檢測(cè)方法,其特征在于:包括以下步驟:

(1)提取香蕉果冠或香蕉果柄的DNA;

(2) 以提取的香蕉果冠或香蕉果柄DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增:PCR反應(yīng)體系25μL,包含2.5μL 10×PCR buffer,2.0μL濃度為2.5mmol/L的dNTP Mixture,0.15μL濃度為5U/μL的Taq酶,10μmol/L的權(quán)利要求1所述的FDF和FDR各0.5μL,DNA模板1μL,加ddH2O至總體積達(dá)25μL;PCR反應(yīng)條件為:94℃預(yù)變性5min;94℃變性40sec,57℃退火45sec,72℃延伸45sec,共35個(gè)循環(huán);72℃延伸10min;

(3)上步所得的PCR產(chǎn)物在1.0%瓊脂糖凝膠上用0.5×TBE緩沖液電泳分析,電壓為4-5V/cm;根據(jù)擴(kuò)增產(chǎn)物的大小判定檢測(cè)結(jié)果,如果能擴(kuò)增出400bp的產(chǎn)物,則可判定香蕉果冠或香蕉果柄存在香蕉冠腐病菌。

4.如權(quán)利要求1所述的香蕉冠腐病菌分子檢測(cè)引物在檢測(cè)香蕉冠腐病菌中的應(yīng)用。

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