本發(fā)明屬于藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，具體為一類含硫穿心蓮內(nèi)酯衍生物、其藥物組合物、合成方法、在制備治療前列腺癌藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
穿心蓮內(nèi)酯是穿心蓮的主要有效成分，在1962年由Cava等完成了穿心蓮內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)研究。目前，我國已實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)。藥物化學(xué)工作者利用酯化反應(yīng)，合成了脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯單鉀鹽，并制成穿琥寧注射液，藥理試驗(yàn)和臨床結(jié)果表明其具有顯著的解熱和抗炎作用，在上世紀(jì)八十年代在中國上市，并收載于1992年版四川省藥品標(biāo)準(zhǔn)，臨床用于病毒性肺炎和上呼吸道感染等。另外，我國藥物化學(xué)家利用Michael反應(yīng)，合成了14-去氧-12-亞硫酸鈉穿心蓮內(nèi)酯，并制成蓮必治注射液，臨床用于治療菌痢、急性胃腸炎、肺炎和上呼吸道感染等。對(duì)于穿心蓮內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)修飾一直是全世界藥物化學(xué)工作者研究的熱點(diǎn)，其中包括美國、印度、中國、韓國等國家。關(guān)于穿心蓮內(nèi)酯衍生物的發(fā)現(xiàn)及藥理活性可詳見綜述論文(Mini-Reviews in Medicinal Chemistry，2013，13，298-309；Expert Opinion Therapy Patents，2012，22(2)，169-180；Frontiers in Research，2012，39，300-310；MedChemComm，2015，6，898；MedChemComm，2015，6，702等)。
近年來，研究人員發(fā)現(xiàn)穿心蓮內(nèi)酯及其衍生物具有較好的抗腫瘤活性，相關(guān)的內(nèi)容可參考綜述或近期發(fā)表論文(Mini-Reviews in Medicinal Chemistry，2013，13，298-309；Expert Opinion Therapy Patents，2012，22(2)，169-180；Frontiers in Research，2012，39，300-310；MedChemComm，2015，6，898；MedChemComm，2015，6，702等)。因此，以穿心蓮內(nèi)酯作為先導(dǎo)化合物，合成和尋找新型的抗腫瘤制劑正在成為藥物化學(xué)研究中的一大熱點(diǎn)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明正是針對(duì)以上技術(shù)問題，公開一類含硫穿心蓮內(nèi)酯衍生物、其藥物組合物、合成方法、在制備治療前列腺癌藥物中的應(yīng)用。我們?cè)谘芯繒r(shí)發(fā)現(xiàn)，穿心蓮內(nèi)酯在12位引入含硫基團(tuán)，形成12位衍生的芳硫醚或雜芳硫醚，可以提高化合物抗腫瘤細(xì)胞的活性，其中部分化合物活性接近或更強(qiáng)于目前臨床正在使用的抗癌藥物紫杉醇。
本發(fā)明的具體技術(shù)方案如下：
具體通式(I)或通式(II)的穿心蓮內(nèi)酯類化合物或其異構(gòu)體，
其具有優(yōu)秀的抗腫瘤活性。其中，R可為苯環(huán)，也可以為雜環(huán)，如吡啶環(huán)、噻吩環(huán)等。苯環(huán)或雜環(huán)上可以用供電子或吸電子取代基(如烷基、鹵原子、硝基、甲氧基、羧基等)進(jìn)行取代，取代的位置可以是鄰位、間位、對(duì)位；硫醚與酯鍵之間的連接鏈的長(zhǎng)度可長(zhǎng)可短(n＝0，或1，或2，或3，或更大的數(shù)目)。
具有該通式的代表性化合物如下：
本發(fā)明提供了通式(I)或(II)的制備方法，如下，
目標(biāo)化合物(I)和(II)的合成路線
中間體b的合成路線
中間體b的合成根據(jù)不同的鏈長(zhǎng)(n值的不同)分別采用2-羥基乙酸乙酯、4-羥基丁酸乙酯、6-羥基己酸乙酯等為原料，與對(duì)甲苯磺酰氯在有機(jī)溶劑中反應(yīng)1-12h，有機(jī)溶劑可以是乙醚、二氯甲烷、甲苯、氯仿、丙酮等，得到對(duì)甲苯磺酸酯保護(hù)的羥基酸酯，該中間體再與芳香硫酚(RSH)在堿性條件下發(fā)生親核取代反應(yīng)，得到硫取代的中間體c。中間體c再在堿性或酸性條件下水解得到相應(yīng)的酸，再與二氯亞砜(或草酰氯，乙酰氯)在20-80℃反應(yīng)1-10h得到目標(biāo)中間體b。
a的合成是將穿心蓮內(nèi)酯溶于有機(jī)溶劑中(有機(jī)溶劑可以是乙醚、二氯甲烷、甲苯、氯仿、丙酮等)，再向溶液中加入2，2-二甲氧基丙烷和對(duì)甲苯磺酸吡啶，室溫反應(yīng)2-12小時(shí)后，蒸出有機(jī)溶劑。殘留物用有機(jī)溶劑稀釋，再用弱堿洗，水洗，飽和食鹽水洗滌，干燥，濃縮，柱層析或重結(jié)晶，得丙叉基穿心蓮內(nèi)酯c。
II的合成是將丙叉基穿心蓮內(nèi)酯與前述中間體a和b在有機(jī)溶劑中，在有機(jī)堿(三乙胺、N，N-二甲基苯胺、吡啶等)的催化下反應(yīng)得目標(biāo)化合物II。II再進(jìn)一步在酸水溶液中(酸可以是鹽酸、硫酸、醋酸、硝酸等)反應(yīng)，得到產(chǎn)物I。
本發(fā)明在另一個(gè)方面，提供了一種藥物組合物，其包含治療有效量的一種或多種上述通式(I)或(II)表示的穿心蓮內(nèi)酯類化合物，或其異構(gòu)體作為活性成分，以及藥學(xué)上可以接受的輔料。所述藥物組合物的口服劑型包括片劑、膠囊、丸劑、粉劑、緩控釋制劑、溶液和懸浮液等，胃腸道外給藥劑型包括無菌溶液、懸浮液或乳液，外用劑型包括軟膏、油劑、乳液、凝膠、懸浮液、溶液、洗劑或乳膏，直腸給藥劑型包括栓劑、滴劑。藥用輔料的選擇因使用途徑和作用特點(diǎn)而異，通常為填充劑、稀釋劑、粘合劑、潤(rùn)濕劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、乳化劑或助懸劑等。極佳的，本發(fā)明提供的藥物組合物為口服劑型和無菌注射劑型。
又一個(gè)方面，本發(fā)明提供上述通式(I)或(II)所示化合物(或其異構(gòu)體)在治療癌癥疾病過程中具有很好的療效，可用于治療前列腺癌等癌癥疾病。
本發(fā)明的積極效果體現(xiàn)在：
(一)、該類化合物結(jié)構(gòu)新穎，一類如通式(I)或(II)所示結(jié)構(gòu)的含硫穿心蓮內(nèi)酯衍生物、或其異構(gòu)體、或其異構(gòu)體的混合物、或其溶劑合物、或藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療前列腺癌藥物中的用途。
(二)、對(duì)前列腺腫瘤細(xì)胞具有非常強(qiáng)的抑制活性，提示該類化合物具有抗前列腺癌的活性，可用于制備抗前列腺癌疾病的藥物。
具體實(shí)施方式
為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于下述實(shí)施例。
在下述實(shí)施例中更具體地解釋本發(fā)明。然而，應(yīng)當(dāng)理解，這些實(shí)施例是為了舉例說明本發(fā)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。所有實(shí)施例中1H-NMR或13C-NMR核磁共振儀(Brucker公司)記錄、化學(xué)位移以ppm表示，分離用硅膠均為200-300目(青島海洋化工有限公司)，洗脫液的配比均為體積比。％如無特殊說明，均表示其質(zhì)量百分含量。
化合物2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙酸乙酯的制備：將2-羥基乙酸乙酯(5g，48.0mmol)和對(duì)甲苯磺酰氯(9.15g，48.0mmol)加入無水乙醚(40mL)，于0℃滴加三乙胺(13.4mL，96.0mmol)，加畢，0℃攪拌反應(yīng)2h。反應(yīng)完畢，向體系加入水(40mL×2)洗滌，飽和食鹽水(40mL)洗滌，分出有機(jī)層，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，殘余物柱層析(環(huán)己烷/乙酸乙酯＝5∶1)，得到白色固體9.33g。
化合物2-對(duì)氟苯硫基乙酸乙酯的制備：向50mL反應(yīng)瓶中依次加入對(duì)氟苯硫酚(0.71g，56mmol)、0.30g甲醇鈉、15mL甲醇，攪拌20min，然后將體系冷卻降溫至0℃。另將所得的白色固體(1.45g，5.6mmol)、溶于10mL丙酮中，緩慢滴入反應(yīng)體系中，加畢，室溫靜止1h，再回流反應(yīng)15min。反應(yīng)完畢，減壓蒸餾除去甲醇和丙酮?dú)埩粑镉?0mL二氯甲烷溶解，60mL水洗，60mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，得粗品1.3g。
化合物2-對(duì)氟苯硫基乙酸的制備：將粗品加入乙醇(10mL)和5％的氫氧化鈉(8mL)，加畢，40℃攪拌反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系減壓蒸餾，至無乙醇，殘留物加冰水(100mL)并用5wt％稀鹽酸(25mL)調(diào)酸，過濾水洗得到的固體，柱層析得到白色固體化合物0.78g，收率75％。
其它類似的化合物按照同樣的方法制得。
化合物丙叉基穿心蓮內(nèi)酯的制備：將4g穿心蓮內(nèi)酯加入100mL丙酮，攪拌至固體溶解，再向體系加入13mL 2，2-二甲氧基丙烷，加畢，，攪拌5min，再向體系加入對(duì)甲苯磺酸吡啶0.14g，加畢，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2h。反應(yīng)完畢，將體系減壓蒸餾，至無丙酮，殘留物用80mL二氯甲烷溶解，再依次用50mL飽和碳酸氫鈉溶液洗，50mL水洗，50mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，殘余物柱層析(乙酸乙酯/環(huán)己烷＝3∶7)，得白色固體4.3g，收率94％。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ6.98(t，J＝8Hz，1H)，5.04(d，J＝4Hz，1H)，4.92(s，1H)，4.62(s，1H)，4.45-4.44(q，d，J＝4Hz，1H)，4.28(d，J＝10Hz，1H)，3.95(d，J＝10Hz，1H)，3.50(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.18(d，J＝10Hz，1H)，2.57-2.55(m，3H)，2.43(d，J＝12Hz，1H)，2.00-1.91(m，2H)，1.81-1.77(m，6H)，1.42(s，3H)，1.37(s，3H)，1.25(s，3H)，0.97(s，3H)。
化合物4-對(duì)甲苯磺酰氧基丁酸乙酯的制備：4-羥基丁酸乙酯(7g，53mmol)和對(duì)甲苯磺酰氯(7.4g，40.0mmol)加入無水乙醚(80mL)，于0℃滴加三乙胺(10.9mL，78.0mmol)，加畢，0℃攪拌反應(yīng)2h。反應(yīng)完畢，向體系加入水(40mL×2)洗滌，飽和食鹽水(40mL)洗滌，分出有機(jī)層，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，殘余物柱層析(石油醚/乙酸乙酯＝3∶1)，得到無色液體8.07g，收率72％。
化合物4-對(duì)氟苯硫基丁酸乙酯的制備：向50mL反應(yīng)瓶中依次加入對(duì)氟苯硫酚(0.71g，56mmol)、0.30g甲醇鈉、15mL甲醇，攪拌20min，然后將體系冷卻降溫至0℃。另將所得的無色液體(1.6g，5.6mmol)、溶于10mL丙酮中，緩慢滴入反應(yīng)體系中，加畢，室溫靜止1h，再回流反應(yīng)15min。反應(yīng)完畢，減壓蒸餾除去甲醇和丙酮?dú)埩粑镉?0mL，二氯甲烷溶解，60mL水洗，60mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，得粗品1.3g。
化合物4-對(duì)氟苯硫基丁酸的制備：將粗品加入乙醇(10mL)和5％的氫氧化鈉(8mL)，加畢，40℃攪拌反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系減壓蒸餾，至無乙醇，殘留物加冰水(100mL)并用5wt％稀鹽酸(25mL)調(diào)酸，過濾水洗得到的固體，柱層析得到白色固體化合物0.8g，收率68％。
其它類似結(jié)構(gòu)的化合物按照同樣的方法制得。
化合物f的制備：將化合物e(0.72g，1.0mmol)、草酰氯(0.8mL)和12mL二氯甲烷加入50mL反應(yīng)瓶，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)0.5h后再加入10μL DMF繼續(xù)攪拌反應(yīng)6h，減壓蒸餾除過量的草酰氯，再將20mL重蒸二氯甲烷加入殘留物中，攪拌使其溶解，即得f的二氯甲烷溶液。
其它類似結(jié)構(gòu)的化合物按照同樣的方法制得。
化合物1的制備：在100mL反應(yīng)瓶中加入1.0g丙叉基穿心蓮內(nèi)酯、0.7mL三乙胺、20mL重蒸二氯甲烷，攪勻，降溫至0℃，將按前述方法制備的2-對(duì)硝基苯硫基乙酰氯的二氯甲烷溶液緩慢滴加到體系中，滴畢，在室溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系用50mL水洗，50mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得固體0.86g，收率57％。分子量ESI-MS(m/z)：515.3[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ8.17(d，J＝8Hz，2H)，7.45(d，J＝8Hz，2H)，7.06(t，J＝8Hz，1H)，5.99(d，J＝4Hz，1H)，4.88(s，1H)，4.54(q，J＝4Hz，1H)，4.46(s，1H)，4.23(d，J＝12Hz，1H)，3.91(d，J＝8Hz，1H)，3.81(s，2H)，3.47(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.17(d，J＝12Hz，1H)，2.39(d，J＝8Hz，2H)，1.95-1.92(m，2H)，1.80-1.72(m，5H)，1.40(s，3H)，1.36(s，3H)，1.26(m，3H)，1.17(s，3H)，0.85(s，3H)。
化合物2的制備：在100mL反應(yīng)瓶中加入1.0g丙叉基穿心蓮內(nèi)酯、0.7mL三乙胺、20mL重蒸二氯甲烷，攪勻，降溫至0℃，將上述制備的2-對(duì)甲苯硫基乙酰氯的二氯甲烷溶液緩慢滴加到體系中，滴畢，在室溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系用50mL水洗，50mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得固體1.06g，收率71％。分子量ESI-MS(m/z)：556.5[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.32(d，J＝8Hz，2H)，7.14(d，J＝8Hz，2H)，7.03(t，J＝8Hz，1H)，5.92(d，J＝4Hz，1H)，4.89(s，1H)，4.50(m，2H)，4.11(d，J＝12Hz，1H)，3.95(d，J＝8Hz，1H)，3.61(s，2H)，3.48(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.18(d，J＝12Hz，1H)，2.40(d，J＝8Hz，3H)，2.33(s，3H)，1.96(m，2H)，1.87-1.70(m，4H)，1.41(s，3H)，1.37(s，3H)，1.25(m，3H)，1.19(s，3H)，0.89(s，3H)。
化合物3的制備：在100mL反應(yīng)瓶中加入1.0g丙叉基穿心蓮內(nèi)酯、0.7mL三乙胺、20mL重蒸二氯甲烷，攪勻，降溫至0℃，將前述制備的2-對(duì)氟苯硫基乙酰氯的二氯甲烷溶液緩慢滴加到體系中，滴畢，在室溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系用50mL水洗，50mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得固體1.12g，收率74％。分子量ESI-MS(m/z)：559.4[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.43(t，J＝4Hz，2H)，7.04(t，J＝4Hz，3H)，5.92(d，J＝4Hz，1H)，4.88(s，1H)，4.53(q，J＝4Hz，1H)，4.49(s，1H)，4.14(d，J＝12Hz，1H)，3.95(d，J＝12Hz，1H)，3.60(s，2H)，3.48(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.18(d，J＝12Hz，1H)，2.39(d，J＝8Hz，2H)，1.96(m，2H)，1.80-1.72(m，5H)，1.41(s，3H)，1.37(s，3H)，1.25(m，3H)，1.20(s，3H)，0.89(s，3H)。
化合物4的制備：在另一100mL反應(yīng)瓶中加入1.0g丙叉基穿心蓮內(nèi)酯、0.7mL三乙胺、20mL重蒸二氯甲烷，攪勻，降溫至0℃，將上述制備的2-噻吩-2-巰基乙酰氯的二氯甲烷溶液緩慢滴加到體系中，滴畢，在室溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系用50mL水洗，50mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得固體0.82g，收率58％。分子量ESI-MS(m/z)：547.4[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.41(d，J＝8Hz，1H)，7.21(d，J＝4Hz，1H)，7.05(t，J＝8Hz，1H)，7.01(d，J＝4Hz，1H)，5.94(d，J＝4Hz，1H)，4.89(s，1H)，4.52(m，2H)，4.18(d，J＝8Hz，1H)，3.96(d，J＝12Hz，1H)，3.52-3.51(m，3H)，3.18(d，J＝8Hz，1H)，2.45-2.43(m，3H)，1.99-1.92(m，2H)，1.82-1.71(m，5H)，1.41(s，3H)，1.37(s，3H)，1.26(m，3H)，1.20(s，3H)，0.93(s，3H)。
化合物5的制備：將0.80g化合物1和20mL 70％醋酸溶液加入50mL反應(yīng)瓶中，室溫?cái)嚢?5min。反應(yīng)畢，向體系加入30mL水，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，再用二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得白色固體0.62g，產(chǎn)率84％。分子量ESI-MS(m/z)：546.6[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ8.17(d，J＝8Hz，2H)，7.45(d，J＝8Hz，2H)，7.08(t，J＝8Hz，1H)，5.98(d，J＝12Hz，1H)，4.87(s，1H)，4.54(q，J＝4Hz，1H)，4.47(s，1H)，4.17(d，J＝8Hz，1H)，4.14(d，J＝12Hz，1H)，3.60(s，2H)，3.47(t，J＝8Hz，1H)，3.28(d，J＝8Hz，2H)，2.42(d，J＝8Hz，3H)，2.32(s，3H)，1.84(m，2H)，1.82-1.68(m，4H)，1.24(m，3H)，1.22(s，3H)，0.68(s，3H)。
化合物6的制備：將0.80g化合物2和20mL 70％醋酸溶液加入50mL反應(yīng)瓶中，室溫?cái)嚢?5min。反應(yīng)畢，向體系加入30mL水，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，再用二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得白色固體0.43g，產(chǎn)率58％。分子量ESI-MS(m/z)：515.3[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.30(d，J＝12Hz，2H)，7.12(d，J＝12Hz，2H)，7.02(t，J＝8Hz，1H)，5.90(d，J＝12Hz，1H)，4.87(s，1H)，4.51(q，J＝4Hz，1H)，4.47(s，1H)，4.17(d，J＝8Hz，1H)，4.14(d，J＝12Hz，1H)，3.60(s，2H)，3.47(t，J＝8Hz，1H)，3.32(d，J＝8Hz，2H)，2.39(d，J＝8Hz，3H)，2.33(s，3H)，1.96(m，2H)，1.87-1.70(m，4H)，1.26(m，3H)，1.24(s，3H)，0.62(s，3H)。
化合物7的制備：將0.80g化合物3和20mL 70％醋酸溶液加入50mL反應(yīng)瓶中，室溫?cái)嚢?5min。反應(yīng)畢，向體系加入30mL水，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，再用二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得白色固體0.45g，收率60％。分子量ESI-MS(m/z)：519.3[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.43(t，J＝4Hz，2H)，7.04-7.01(m，3H)，5.91(d，J＝8Hz，1H)，4.87(s，1H)，4.50(m，2H)，4.45(q，J＝4Hz，1H)，4.17(d，J＝8Hz，1H)，4.14(d，J＝8Hz，1H)，3.60(s，2H)，3.47(t，J＝8Hz，1H)，3.32(d，J＝8Hz，1H)，2.40(d，J＝8Hz，2H)，1.96(m，1H)，1.80-1.72(m，5H)，1.28(s，3H)，1.23(m，3H)，0.63(s，3H)。
化合物8的制備：將0.40g化合物4和10mL 70％醋酸溶液加入25mL反應(yīng)瓶中，室溫?cái)嚢?5min。反應(yīng)畢，向體系加入15mL水，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，再用二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得白色固體0.21g，收率57％。分子量ESI-MS(m/z)：507.4[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.41(d，J＝8Hz，1H)，7.21(d，J＝4Hz，1H)，7.05(t，J＝8Hz，1H)，7.08-7.02(m，3H)，5.94(d，J＝8Hz，1H)，4.88(s，1H)，4.56(m，2H)，4.48(q，J＝4Hz，1H)，4.14(d，J＝8Hz，1H)，4.12(d，J＝8Hz，1H)，3.48(s，2H)，3.44(t，J＝8Hz，1H)，3.30(d，J＝8Hz，1H)，2.42(d，J＝8Hz，2H)，1.94(m，1H)，1.82-1.70(m，5H)，1.24(s，3H)，1.26(m，3H)，0.68(s，3H)。
化合物9的制備：在100mL反應(yīng)瓶中加入1.0g丙叉基穿心蓮內(nèi)酯、0.7mL三乙胺、20mL重蒸二氯甲烷，攪勻，降溫至0℃，將4-對(duì)甲氧基苯硫基丁酰氯的二氯甲烷溶液緩慢滴加到體系中，滴畢，在室溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系用50mL水洗，50mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得油狀固體1.18g，收率77％。分子量ESI-MS(m/z)：599.4[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.34(d，J＝8Hz，2H)，7.02(t，J＝8Hz，1H)，6.85(d，J＝4Hz，2H)，5.94(d，J＝4Hz，1H)，4.88(s，1H)，4.54(q，J＝4Hz，1H)，4.51(s，1H)，4.22(d，J＝8Hz，1H)，3.96(d，J＝12Hz，1H)，3.80(s，3H)，3.50(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.18(d，J＝12Hz，1H)，2.85(t，J＝4Hz，2H)，2.50(t，J＝4Hz，2H)，2.43(d，J＝8Hz，2H)，2.03-1.71(m，7H)，1.90(t，J＝4Hz，2H)，1.41(s，3H)，1.37(s，3H)，1.26(m，3H)，1.18(s，3H)，0.91(s，3H)。
化合物10的制備：在100mL反應(yīng)瓶中加入1.0g丙叉基穿心蓮內(nèi)酯、0.7mL三乙胺、20mL重蒸二氯甲烷，攪勻，降溫至0℃，將4-對(duì)硝基苯硫基丁酰氯的二氯甲烷溶液緩慢滴加到體系中，滴畢，在室溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系用50mL水洗，50ml飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得油狀固體1.07g，收率68％。分子量ESI-MS(m/z)：614.5[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ8.15(d，J＝12Hz，2H)，7.36(d，J＝8Hz，2H)，7.03(t，J＝8Hz，1H)，5.96(d，J＝8Hz，1H)，4.86(s，1H)，4.55(q，J＝4Hz，1H)，4.49(s，1H)，4.25(d，J＝12Hz，1H)，3.93(d，J＝12Hz，1H)，3.50(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.18(d，J＝12Hz，1H)，3.10(t，J＝4Hz，2H)，2.57(t，J＝4Hz，2H)，2.41(t，J＝6Hz，3H)，2.07(t，J＝4Hz，2H)，1.96-1.94(m，2H)，1.86-1.71(m，4H)，1.39(s，3H)，1.36(s，3H)，1.26(m，3H)，1.19(s，1H)，0.91(s，3H)。
化合物11的制備：在100mL反應(yīng)瓶中加入1.0g丙叉基穿心蓮內(nèi)酯、0.7mL三乙胺、20mL重蒸二氯甲烷，攪勻，降溫至0℃，將4-對(duì)甲苯硫基丁酰氯的二氯甲烷溶液緩慢滴加到體系中，滴畢，在室溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系用50mL水洗，50mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得油狀固體0.73g，收率75％。分子量ESI-MS(m/z)：582.5[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.26(d，J＝8Hz，2H)，7.11(d，J＝4Hz，2H)，7.02(t，J＝8Hz，1H)，5.94(d，J＝4Hz，1H)，4.88(s，1H)，4.52(q，J＝4Hz，1H)，4.51(s，1H)，4.21(d，J＝12Hz，1H)，3.95(d，J＝8Hz，1H)，3.50(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.18(d，J＝12Hz，1H)，2.92(t，J＝4Hz，2H)，2.51(t，J＝4Hz，2H)，2.42(t，J＝6Hz，3H)，1.94(t，J＝4Hz，2H)，1.96-1.71(m，6H)，1.41(s，3H)，1.37(s，3H)，1.26(m，3H)，1.19(s，3H)，0.91(s，3H)。
化合物12的制備：在100mL反應(yīng)瓶中加入1.0g丙叉基穿心蓮內(nèi)酯、0.7mL三乙胺、20mL重蒸二氯甲烷，攪勻，降溫至0℃，將4-對(duì)氟苯硫基丁酰氯的二氯甲烷溶液緩慢滴加到體系中，滴畢，在室溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系用50mL水洗，50mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得油狀固體1.1g，收率73％。分子量ESI-MS(m/z)：589.4[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.36(d，J＝4Hz，2H)，7.03-7.01(d，J＝8Hz，2H)，7.01(t，J＝12Hz，1H)，5.94(d，J＝4Hz，1H)，4.87(s，1H)，5.54(q，J＝4Hz，1H)，4.50s，1H)，4.22(d，J＝12Hz，1H)，3.95(d，J＝12Hz，1H)，3.49(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.18(d，J＝12Hz，1H)，2.90(t，J＝4Hz，2H)，2.51(t，J＝4Hz，2H)，2.43(d，J＝8Hz，2H)，2.05-1.93(m，3H)，1.94(t，J＝4Hz，2H)，1.86-1.65(m，4H)，1.41(s，3H)，1.37(s，3H)，1.26(m，3H)，1.20(s，3H)，0.91(s，3H)。
化合物13的制備：在100mL反應(yīng)瓶中加入1.0g丙叉基穿心蓮內(nèi)酯、0.7mL三乙胺、20mL重蒸二氯甲烷，攪勻，降溫至0℃，將4-噻吩-2-巰基丁酰氯的二氯甲烷溶液緩慢滴加到體系中，滴畢，在室溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系用50mL水洗，50mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得油狀固體1.07g，收率73％。分子量ESI-MS(m/z)：575.3[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.36(d，J＝4Hz，1H)，7.13(d，J＝4Hz，1H)，7.03(t，J＝8Hz，1H)，6.98(d，J＝4Hz，1H)，5.94(d，J＝8Hz，1H)，4.89(s，1H)，4.54(q，J＝4Hz，1H)，4.52(s，1H)，4.21(d，J＝8Hz，1H)，3.96(d，J＝12Hz，1H)，3.50(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.18(d，J＝8Hz，1H)，2.82(t，J＝4Hz，2H)，2.52(t，J＝4Hz，2H)，2.41(d，J＝8Hz，3H)，1.94(t，J＝4Hz，2H)，1.96-1.72(m，6H)，1.41(s，3H)，1.37(s，3H)，1.26(m，3H)，1.18(s，3H)，0.91(s，3H)。
化合物14的制備：在100mL反應(yīng)瓶中加入1.0g丙叉基穿心蓮內(nèi)酯、0.7mL三乙胺、20mL重蒸二氯甲烷，攪勻，降溫至0℃，將4-吡啶-2-巰基丁酰氯的二氯甲烷溶液緩慢滴加到體系中，滴畢，在室溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系用50mL水洗，50mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得油狀固體1.0g，收率69％。分子量ESI-MS(m/z)：570.4[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ8.41(d，J＝8Hz，1H)，7.48(t，J＝8Hz，1H)，7.17(d，J＝8Hz，1H)，7.02-6.98(m，2H)，5.95(d，J＝4Hz，1H)，4.86(s，1H)，4.54(q，J＝4Hz，1H)，4.45(s，1H)，4.25(d，J＝8Hz，1H)，3.95(d，J＝12Hz，1H)，3.49(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.24(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，2H)，3.18(d，J＝10Hz，1H)，2.54(t，J＝4Hz，2H)，2.43(m，2H)，2.05(t，J＝4Hz，2H)，1.96-1.94(m，2H)，1.86-1.71(m，5H)，1.41(s，3H)，1.37(s，3H)，1.26(m，3H)，1.20(s，3H)，0.65(s，3H)。
化合物21的制備：將0.85g化合物9和20mL 70％醋酸溶液加入50mL反應(yīng)瓶中，室溫?cái)嚢?5min。反應(yīng)畢，向體系加入30mL水，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，再用二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得白色固體0.46g，收率58％。分子量ESI-MS(m/z)：558.5[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.34(d，J＝8Hz，2H)，7.02(t，J＝8Hz，1H)，6.85(d，J＝8Hz，2H)，5.93(d，J＝4Hz，1H)，4.86(s，1H)，4.51(q，J＝4Hz，1H)，4.45(s，1H)，4.18(t，J＝12Hz，2H)，3.80(s，3H)，3.47(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.18(d，J＝10Hz，1H)，2.85(t，J＝4Hz，2H)，2.51(t，J＝4Hz，2H)，2.43(m，2H)，1.94-1.71(m，7H)，1.89(t，J＝4Hz，2H)，1.25(s，3H)，1.20(m，3H)，0.64(s，3H)。
化合物22的制備：將0.8g化合物10和20mL 70％醋酸溶液加入50mL反應(yīng)瓶中，室溫?cái)嚢?5min。反應(yīng)畢，向體系加入30mL水，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，再用二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得白色固體0.42g，收率56％。分子量ESI-MS(m/z)：574.3[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ8.15(d，J＝12Hz，2H)，7.36(d，J＝8Hz，2H)，7.01(t，J＝8Hz，1H)，5.96(d，J＝4Hz，1H)，4.84(s，1H)，4.54(q，J＝4Hz，1H)，4.45(s，1H)，4.25(d，J＝12Hz，1H)，4.16(d，J＝12Hz，1H)，3.48(t，J＝8Hz，1H)，3.33(d，J＝8Hz，1H)，3.09(t，J＝8Hz，2H)，2.56(t，J＝8Hz，2H)，2.41(d，J＝6Hz，3H)，2.07(t，J＝4Hz，2H)，2.04-1.94(m，1H)，1.85-1.71(m，6H)，1.26(m，3H)，1.20(s，3H)，0.63(s，3H)。
化合物23的制備：將0.85g化合物11和20mL 70％醋酸溶液加入50mL反應(yīng)瓶中，室溫?cái)嚢?5min。反應(yīng)畢，向體系加入30mL水，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，再用二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得白色固體0.67g，收率60％。分子量ESI-MS(m/z)：543.4[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.25(d，J＝8Hz，2H)，7.11(d，J＝8Hz，2H)，7.00(t，J＝8Hz，1H)，5.92(d，J＝8Hz，1H)，4.86(s，1H)，4.54(q，J＝4Hz，1H)，4.47(s，1H)，4.18(t，J＝8Hz，2H)，3.48(t，J＝6Hz，1H)，3.32(d，J＝12Hz，1H)，2.92(t，J＝4Hz，2H)，2.50(t，J＝4Hz，2H)，2.42(d，J＝8Hz，2H)，2.32(s，3H)，1.93(t，J＝4Hz，2H)，1.96-1.71(m，7H)，1.25(s，3H)，1.23(m，3H)，0.63(s，3H)。
化合物24的制備：將0.8g化合物12和20mL 70wt％醋酸溶液加入50mL反應(yīng)瓶中，室溫?cái)嚢?5min。反應(yīng)畢，向體系加入30mL水，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，再用二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得白色固體0.46g，收率62％。分子量ESI-MS(m/z)：547.3[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.35(t，J＝4Hz，2H)，7.01(t，J＝8Hz，3H)，5.93(d，J＝4Hz，1H)，4.85(s，1H)，4.53(q，J＝4Hz，1H)，4.46(s，1H)，4.23(d，J＝4Hz，1H)，4.15(d，J＝4Hz，1H)，3.48(t，J＝6Hz，1H)，3.33(d，J＝12Hz，1H)，2.91(t，J＝4Hz，2H)，2.51(t，J＝4Hz，2H)，2.36(d，J＝8Hz，2H)，1.96-1.73(m，7H)，1.92(t，J＝4Hz，2H)，1.25(s，3H)，1.24(m，3H)，0.64(s，3H)。
化合物25的制備：將0.85g化合物13和20mL 70％醋酸溶液加入50mL反應(yīng)瓶中，室溫?cái)嚢?5min。反應(yīng)畢，向體系加入30mL水，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，再用二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得白色固體0.64g，收率53％。分子量ESI-MS(m/z)：534.5[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.36(d，J＝4Hz，1H)，7.12(d，J＝4Hz，1H)，6.99-6.98(m，2H)，5.93(d，J＝8Hz，1H)，4.88(s，1H)，4.54(q，J＝4Hz，1H)，4.48(s，1H)，4.19(t，J＝12Hz，2H)，3.49(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.33(d，J＝12Hz，1H)，2.82(t，J＝4Hz，2H)，2.51(t，J＝12Hz，2H)，2.43-2.39(m，3H)，1.94(t，J＝4Hz，2H)，1.96-1.70(m，6H)，1.25(s，3H)，1.18(m，3H)，0.65(s，3H)。
化合物26的制備：將0.87g化合物14和20mL 70％醋酸溶液加入50mL反應(yīng)瓶中，室溫?cái)嚢?5min。反應(yīng)畢，向體系加入30mL水，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，再用二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得白色固體0.45g，收率55％。分子量ESI-MS(m/z)：530.5[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ8.42(d，J＝8Hz，1H)，7.50-7.48(m，2H)，7.19(d，J＝8Hz，1H)，7.00(t，J＝4Hz，1H)，5.93(d，J＝4Hz，1H)，4.73(s，1H)，4.55(q，J＝4Hz，1H)，4.48(s，1H)，4.26(d，J＝8Hz，1H)，4.16(d，J＝8Hz，1H)，3.47(t，J＝4Hz，1H)，3.30(d，J＝8Hz，1H)，3.25(t，J＝4Hz，2H)，2.54(t，J＝4Hz，2H)，2.42-2.40(m，3H)，2.07(t，J＝4Hz，2H)，1.96-1.94(m，2H)，1.81-1.71(m，4H)，1.26(m，3H)，1.22(s，3H)，0.68(s，3H)。
化合物27的制備：在100mL反應(yīng)瓶中加入1.0g丙叉基穿心蓮內(nèi)酯、0.7mL三乙胺、20mL重蒸二氯甲烷，攪勻，降溫至0℃，將上述制備的酰氯的二氯甲烷溶液緩慢滴加到體系中，滴畢，在室溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢，將體系用50mL水洗，50mL飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得油狀固體1.24g，收率85％。分子量ESI-MS(m/z)：571.6[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.36(d，J＝4Hz，1H)，7.13(d，J＝4Hz，1H)，7.03(t，J＝8Hz，1H)，6.98(d，J＝4Hz，1H)，5.94(d，J＝8Hz，1H)，4.89(s，1H)，4.54(q，J＝4Hz，1H)，4.52(s，1H)，4.21(d，J＝8Hz，1H)，3.96(d，J＝12Hz，1H)，3.50(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.18(d，J＝8Hz，1H)，2.82(t，J＝4Hz，2H)，2.38(t，J＝4Hz，2H)，2.36(d，J＝8Hz，3H)，2.28(t，J＝4Hz，2H)，1.96-1.72(m，6H)，1.64-1.68(m，4H)，1.41(s，3H)，1.37(s，3H)，1.26(m，5H)，1.18(s，3H)，0.91(s，3H)。
化合物28的制備：將0.80g化合物27和20mL 70％醋酸溶液加入50mL反應(yīng)瓶中，室溫?cái)嚢?5min。反應(yīng)畢，向體系加入30mL水，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至中性，再用二氯甲烷(5mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，柱層析，得白色固體0.58g，收率78％。分子量ESI-MS(m/z)：531.6[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ7.36(d，J＝4Hz，1H)，7.13(d，J＝4Hz，1H)，7.03(t，J＝8Hz，1H)，6.98(d，J＝4Hz，1H)，5.94(d，J＝8Hz，1H)，4.89(s，1H)，4.54(q，J＝4Hz，1H)，4.52(s，1H)，4.21(d，J＝8Hz，1H)，3.96(d，J＝12Hz，1H)，3.50(dd，J1＝4Hz，J2＝8Hz，1H)，3.18(d，J＝8Hz，1H)，2.82(t，J＝4Hz，2H)，2.38(t，J＝4Hz，2H)，2.36(d，J＝8Hz，3H)，2.28(t，J＝4Hz，2H)，1.96-1.72(m，6H)，1.64-1.68(m，4H)，1.25(s，3H)，1.26(m，5H)，0.62(s，3H)。
其它類似的化合物按照相同合成方法進(jìn)行制備。
藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)采用前列腺腫瘤細(xì)胞PC-3，待細(xì)胞生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)用胰酶消化細(xì)胞，10wt％FBS的培養(yǎng)液中和胰酶后，800g，5min離心收集細(xì)胞，除去上層液體，用含有10％FBS的RPMI-1640培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀，并調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度至4×104/ml，在96孔培養(yǎng)板中加入細(xì)胞懸液100μl，使每孔細(xì)胞數(shù)為4×103個(gè)，設(shè)空白組(不含細(xì)胞和藥品)和對(duì)照組(含有細(xì)胞，但無藥品)。37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)24h，使細(xì)胞貼壁，重新進(jìn)入生長(zhǎng)周期。設(shè)置5組藥品的濃度梯度，每組5個(gè)復(fù)孔，藥物終濃度設(shè)為100，50，25，12.5，6.25ng/mL(脂溶性藥物3mg用1ml EtOH溶解為30mg/ml的母液，再根據(jù)需要用細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋，使EtOH的含量不超過1％)，加入藥物前，更換細(xì)胞培養(yǎng)液，將對(duì)應(yīng)濃度的藥物同細(xì)胞培養(yǎng)液混合均勻后添加入96孔板對(duì)應(yīng)的細(xì)胞中(每孔100μ1)；對(duì)照組加入相同體積的培養(yǎng)液。在37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)繼續(xù)培養(yǎng)48h后更換新的細(xì)胞培養(yǎng)液并在每孔中加入10μl CCK-8細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑，37℃，5％CO2條件下孵育3h后，在450nm波長(zhǎng)下用酶標(biāo)儀測(cè)定對(duì)應(yīng)吸光度值(A值)。陽性對(duì)照藥采用臨床上抗腫瘤藥物紫杉醇(泰素)為對(duì)照藥品。
生長(zhǎng)抑制率＝(對(duì)照組的A值-實(shí)驗(yàn)組的A值)/(對(duì)照組-空白組)的A值×100％。
部分化合物的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表。
部分優(yōu)選化合物對(duì)前列腺癌細(xì)胞的抑制作用
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，所制備的大部分化合物具有優(yōu)良的抑制前列腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的活性，比先導(dǎo)化合物穿心蓮內(nèi)酯對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制活性有顯著的提高。其中，部分化合物如13、14等與臨床使用的抗腫瘤藥物泰素對(duì)前列腺癌細(xì)胞的抑制活性接近或相當(dāng)。以上數(shù)據(jù)說明該類化合物是潛在的抗前列腺癌藥效活性物質(zhì)。
以上實(shí)施方式僅用于說明本發(fā)明，而并非對(duì)本發(fā)明的限制，有關(guān)技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍的情況下，還可以作出各種變化和變型。因此所有等同的技術(shù)方案也屬于本發(fā)明的范疇。