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一種優(yōu)化的pBBR1MCS系列載體及其應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):12249199閱讀:來(lái)源:國(guó)知局
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一種優(yōu)化的表達(dá)載體,該載體是利用融合PCR技術(shù),將pBBR1MCS系列廣宿主克隆載體的骨架同表達(dá)載體pGEX4T?1的啟動(dòng)子、調(diào)控序列LacIq以及終止序列相連,以替換pBBR1MCS質(zhì)粒的lac啟動(dòng)子、LacZα編碼序列和終止序列;同時(shí),對(duì)該載體的多克隆位點(diǎn)進(jìn)行了修飾,該位點(diǎn)包括了Xho?I、Sma?I、Spe?I等酶切位點(diǎn),還引入了Bgl?II的酶切位點(diǎn),便于基因的功能鑒定和克隆。將該載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌,可有效在該菌株中復(fù)制并表達(dá)外源蛋白,并且有利于外源蛋白的正確折疊,使其形成有活性的蛋白。

技術(shù)研發(fā)人員:李慧;朱虎;孫亞杰;焦學(xué);周萬(wàn)龍;李菁
受保護(hù)的技術(shù)使用者:中國(guó)石油大學(xué)(華東)
文檔號(hào)碼:201610867175
技術(shù)研發(fā)日:2016.09.30
技術(shù)公布日:2017.02.22

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