技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及制備穩(wěn)定表達(dá)豬瘟病毒E2蛋白的重組細(xì)胞系的方法,包括以下步驟:提供重組表達(dá)質(zhì)粒,其包含彼此有效連接的豬瘟病毒E2蛋白編碼序列和綠色熒光蛋白編碼序列;將所述重組表達(dá)質(zhì)粒與輔助質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入真核細(xì)胞;通過(guò)熒光檢測(cè)法篩選出表達(dá)所述重組表達(dá)質(zhì)粒的單細(xì)胞,并對(duì)該單克隆細(xì)胞進(jìn)行多次傳代培養(yǎng),獲得經(jīng)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞克??;檢測(cè)該細(xì)胞克隆中豬瘟病毒E2蛋白的表達(dá)量,篩選出經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后仍能表達(dá)豬瘟病毒E2蛋白的重組細(xì)胞系,其中所述豬瘟病毒E2蛋白的核苷酸序列如序列1所示,所述編碼豬瘟病毒E2蛋白的氨基酸序列如序列2所示。本發(fā)明還涉及穩(wěn)定表達(dá)豬瘟病毒E2蛋白的重組細(xì)胞系、應(yīng)用及豬瘟病毒亞單位疫苗。
技術(shù)研發(fā)人員:謝群;李秋娥
受保護(hù)的技術(shù)使用者:北京博爾柯生物科技有限公司
文檔號(hào)碼:201610815262
技術(shù)研發(fā)日:2016.09.09
技術(shù)公布日:2017.05.31