本發(fā)明屬于具有抗癌活性的新化合物合成技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮-6-芳腙類化合物及其制備方法和在抗癌藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
雙吲哚馬來酰亞胺衍生物是以Staurosporine為先導(dǎo)物設(shè)計的一類具有良好活性的生物堿，因為與吲哚咔唑類衍生物合成上的相關(guān)性，因此也被歸入吲哚咔唑類化合物。吲哚咔唑核可以由相應(yīng)的雙吲哚馬來酰亞胺化合物氧化或者光照關(guān)環(huán)得到，Arcyriaflavia的合成方程式如下[1]。
吲哚并[2,3-a]咔唑類化合物最早從棍孢鏈霉菌Streptomyces staurosporeus的發(fā)酵液中分離得到，該天然生物堿被命名為星形孢菌素(staurosporine)。X單晶衍射分析表明其由吲哚[2,3-α]吡咯并[3,4-c]咔唑環(huán)，通過兩個C-N鍵和一個氨基吡喃糖結(jié)合形成的，其結(jié)構(gòu)式如下。1986年發(fā)現(xiàn)該生物堿具有抗真菌、抗高血壓、抗腫瘤和抑制血小板聚集等作用[2]，吲哚咔唑類化合物抗腫瘤活性作用靶點包括與細(xì)胞周期有關(guān)的多種激酶、細(xì)胞核拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerase,Top)以及與腫瘤細(xì)胞生長或凋亡有關(guān)的酶等?，F(xiàn)已知吲哚咔唑類化合物是拓?fù)洚悩?gòu)酶的致毒劑,它對蛋白激酶(protein kinase)的抑制作用表現(xiàn)在競爭結(jié)合其三磷酸腺苷(ATP)口袋上特異的氨基酸基團(tuán),進(jìn)而抑制酶的活性,并使細(xì)胞生長靜止于G1期。
吲哚咔唑化合物在哺乳動物細(xì)胞中至少顯示了三類作用方式：抑制蛋白激酶、抑制真 核細(xì)胞DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I以及與DNA嵌入式的結(jié)合。蛋白激酶是一個家族，包括多種酶，這些酶催化蛋白質(zhì)氨基酸殘基的磷酸化，在細(xì)胞內(nèi)的任務(wù)是控制多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)星形孢菌素既抑制蛋白激酶C，還抑制其他蛋白激酶，因此該化合物雖然高效但卻是蛋白激酶的非特異性抑制劑。晶體結(jié)構(gòu)顯示星形孢菌素位于三磷酸腺苷(ATP)結(jié)合位點，任何一種吲哚咔唑抑制劑作用位點都是如此，在兩個蛋白酶裂片的縫隙中吲哚咔唑占據(jù)了疏水的腺嘌呤結(jié)合袋，內(nèi)酰胺基通過激酶的N-末端和C-末端區(qū)域形成兩個氫鍵，處于船式構(gòu)象且垂直于吲哚咔唑環(huán)的糖基在核糖結(jié)合位點內(nèi)部形成了疏水連接和氫鍵。星形孢菌素與三磷酸腺苷(ATP)結(jié)合位點配合如此默契，致使星形孢菌素活性很高，但是相對而言其特異性較低[3]。
DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶是治療腫瘤和治療細(xì)菌的靶標(biāo)，其參與多種與DNA雙鏈分開有關(guān)的細(xì)胞過程，如復(fù)制、翻譯、重組和修復(fù)。雷別卡霉素能夠在體外經(jīng)由DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ誘導(dǎo)DNA裂解，從而導(dǎo)致細(xì)胞中毒而引起細(xì)胞凋亡[4]。星形孢菌素則通過阻止從DNA向活性酪氨酸位點轉(zhuǎn)移磷酸二酯鍵而抑制Top II的催化活性[5]。通過與已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的激酶抑制劑結(jié)構(gòu)種類的多樣性相比，與DNA有顯著結(jié)合或者是對拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ起毒性作用的吲哚咔唑只有與雷別卡霉素類似的吲哚咔唑化合物。
由于此類吲哚咔唑化合物具有抗菌、抗病毒、抗高血壓和抗腫瘤等許多生物活性?？蒲泄ぷ髡邚陌l(fā)現(xiàn)吲哚咔唑類生物堿開始就吸引了很多生物學(xué)家、化學(xué)工作者以及醫(yī)藥類公司的廣泛興趣，通過對天然產(chǎn)物分離、全合成以及對其衍生物的合成，該類化合物已超過一百多種。最多的就是抗腫瘤活性的研究，已經(jīng)有文獻(xiàn)報道的具有吲哚咔唑核結(jié)構(gòu)的化合物，如雷別卡霉素類似物[6]和星形孢菌素衍生物UCN-01、CEP-1347、NB-506、ED-571和JDC-108等[7]。吲哚咔唑類化合物，尤其是星形孢菌素衍生物表現(xiàn)出不同的生物活性，包括降血壓、抑制血小板聚集、抑制平滑肌收縮、激活巨噬細(xì)胞、阻止T淋巴細(xì)胞向有絲分裂原的增殖反應(yīng)、抑制體外免疫、抑制破骨細(xì)胞質(zhì)子泵、殺蟲活性、逆轉(zhuǎn)多藥抗藥性和神經(jīng)保護(hù)等[8]。
[1]Mahboobi S；Dechant I；Reindl H.et al.Synthesis of Bis(indolylmaleimide)Macrocycles[J].Heterocycl.Chem.,2000,37:307-329。
[2]Omura S；Sasaki Y；Iwai Y.et al.J.Antibiotics,1995,48:535-548。
[3]Michael G；Christine B；Norbert K.et al.The protein kinase C inhibitor bisindolyl maleimide 2binds with reversed orientations to different conformations of protein kinaseA[J].The Journal of Biological Chemistry,2004,279:23679-23690。
[4]Yuichi S.；Shyam B.；Mechanism of hydrolysis of a novelindolocarbazole topoisomerase I inhibitor[J]. European Journal of Pharmaceutical Sciences,2010,39(5):291-297。
[5]Piotr L；Guyanand S；Robert K.Mechanism of topoisomerase II inhibition by staurosporine and otherprotein kinase inhibitors[J].The Journal of Biological Chemistry,1996,271；26418-26421。
[6]張貴生；王軍強(qiáng)；師君紅.具有抗癌活性的雷別卡霉素類似物及合成方法[P].GB CN201010569632.1,2011-07-20。
[7]陳蘇婷；尤啟東.吲哚咔唑類化合物及其衍生物的抗腫瘤活性[J].化學(xué)進(jìn)展,2008,20(2/3):368-374。
[8]Hirofumi N.；Satoshi O.；Chemical biology of natural indolocarbazole products:30years since the discovery of staurosporine[J].The journal of antibiotics.,2009,62:16-26。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供了一種具有抗癌活性的吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮-6-芳腙類化合物及其制備方法，是利用活性片段拼接的原理合成了一類新化合物，并對其生物活性進(jìn)行分析，結(jié)果表明該類新化合物具有抗癌活性，能夠用于制備抗癌藥物。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮-6-芳腙類化合物，其特征在于是以醛類化合物R-CHO和6-氨基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮為原料制備而成的，其結(jié)構(gòu)通式為：其中R為以下所列結(jié)構(gòu)中的一種：
本發(fā)明所述的吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮-6-芳腙類化合物的制備方法，其特 征在于具體合成步驟為：在反應(yīng)容器中先加入6-氨基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮和無水乙醇，然后加入醛類化合物和乙酸，于回流條件下反應(yīng)，TLC跟蹤監(jiān)測至原料反應(yīng)完全，反應(yīng)結(jié)束后晾至室溫，加水生成大量沉淀，抽濾，水洗，石油醚洗，柱層析分離得到橙黃色固體吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮-6芳腙類化合物，具體反應(yīng)方程式為：
其中醛類化合物為以下所列結(jié)構(gòu)中的一種：
進(jìn)一步優(yōu)選，所述的6-氨基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮與醛類化合物的投料摩爾比為1:2。
進(jìn)一步優(yōu)選，所述的6-氨基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮是由以下方法制備而成的：
(1)2,3-二氯馬來酐的合成
在反應(yīng)容器中加入馬來酐，冰浴條件下加入二氯亞砜，磁力攪拌均勻，用恒壓滴液漏斗滴加吡啶，滴加完畢后，冰浴條件下繼續(xù)攪拌反應(yīng)，然后撤去冰浴，油浴加熱回流，減壓蒸去殘留的二氯亞砜，得到黃色蠟狀固體，然后用甲苯進(jìn)行浸取，抽濾，得黃色濾液，反復(fù)數(shù)次至固體泛白為止，合并濾液，減壓蒸去溶劑后得到粗產(chǎn)品2,3-二氯馬來酐；
(2)2,3-二氯-N-甲基馬來酰亞胺的合成
向反應(yīng)容器中加入2,3-二氯馬來酐、甲胺鹽酸鹽和冰乙酸，回流條件下磁力攪拌反應(yīng)，TLC跟蹤監(jiān)測至原料反應(yīng)完全，溶液呈暗褐色，降至室溫后加水，以乙酸乙酯萃取，依次用飽和碳酸氫鈉溶液和飽和食鹽水清洗，減壓蒸去溶劑，得到褐色粗品，柱層析分離得到 白色片狀固體2,3-二氯-N-甲基馬來酰亞胺；
(3)2,3-二(3-吲哚)-N-甲基馬來酰亞胺的合成
a溴乙烷格氏試劑的制備
N2保護(hù)下，向反應(yīng)容器中加入鎂條和無水乙醚，并滴加溴乙烷，微熱引發(fā)反應(yīng)后劇烈攪拌，滴加溴乙烷使溶劑保持微沸狀態(tài)，滴加完畢后補加無水乙醚，回流使反應(yīng)充分，得到煙灰色溴乙烷格氏試劑，
b吲哚格氏試劑的制備及2,3-二(3-吲哚)-N-甲基馬來酰亞胺的制備
先向反應(yīng)容器中加入四氫呋喃、吲哚和溴乙烷格氏試劑的甲苯溶液，溶液變黑色，于40℃反應(yīng)，然后加入2,3-二氯-N-甲基馬來酰亞胺的甲苯溶液，滴加完畢，溶液呈紅黑色，在回流條件下反應(yīng)完全，降至室溫后加入飽和NH4Cl溶液猝滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，減壓蒸去溶劑，柱層析分離得到紅色固體2,3-二(3-吲哚)-N-甲基馬來酰亞胺；
(4)6-甲基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮的合成
向反應(yīng)容器中加入2,3-二(3-吲哚)-N-甲基馬來酰亞胺，并加入丁酮使其溶解，再加入碳酸鉀和氯化銅，將反應(yīng)裝置于85℃油浴鍋中反應(yīng)，反應(yīng)過程中TLC跟蹤監(jiān)測至原料反應(yīng)完全，冷卻至室溫，抽濾，萃取，用摩爾濃度為0.1mol/L的鹽酸溶液清洗有機(jī)相，然后水洗，無水硫酸鎂干燥，減壓蒸去溶劑，得到淺黃色固體6-甲基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮；
(5)吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,6-二酸酐的合成
向反應(yīng)容器中加入6-甲基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮和質(zhì)量濃度為10％的氫氧化鉀溶液，磁力攪拌下于90℃油浴中回流反應(yīng)，反應(yīng)過程TLC跟蹤監(jiān)測至原料反應(yīng)完全，降至室溫后，以摩爾濃度為2mol/L的鹽酸溶液淬滅反應(yīng)，反應(yīng)容器中出現(xiàn)大量黃色固體，至溶液呈中性后室溫攪拌混合均勻，抽濾，水洗，得到黃褐色固體吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,6-二酸酐；
(6)6-氨基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮的合成
向反應(yīng)容器中加入吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,6-二酸酐和四氫呋喃，再滴加水合肼，于45℃的油浴中加熱，回流條件下反應(yīng)，TLC跟蹤監(jiān)測至原料反應(yīng)完全，減壓蒸去溶劑，加水出現(xiàn)大量黃色沉淀，抽濾，石油醚洗，得到黃色固體6-氨基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮。
本發(fā)明所述的抗癌藥物組合物，其特征在于包括吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮-6芳腙類化合物或/和其藥學(xué)上可接受的鹽以及藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明的制備方法原料價廉易得，操作簡單，制備的吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7- 二酮-6芳腙類化合物具有較好的生物活性，在制備抗癌藥物化合物中具有較好的應(yīng)用前景。
具體實施方式
以下通過實施例對本發(fā)明的上述內(nèi)容做進(jìn)一步詳細(xì)說明，但不應(yīng)該將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
實施例
(1)2,3-二氯馬來酐的合成
反應(yīng)路線：
反應(yīng)步驟：
在干燥的250mL圓底燒瓶中加入9.8g(0.1mol)馬來酐，冰浴條件下加入二氯亞砜100mL(1.38mol)，磁力攪拌均勻，用恒壓滴液漏斗滴加吡啶16.6mL(0.2mol)，1h滴加完畢。滴加完畢后，冰浴條件下繼續(xù)攪拌1h。撤去冰浴，油浴加熱到75℃，回流40min。減壓蒸去殘留的二氯亞砜，得到黃色蠟狀固體。用甲苯進(jìn)行浸取，抽濾，得黃色濾液，反復(fù)數(shù)次至固體泛白為止。合并濾液，減壓蒸去溶劑后得到粗產(chǎn)品10.9g，收率65.9％。
(2)2,3-二氯-N-甲基馬來酰亞胺的合成
反應(yīng)路線：
反應(yīng)步驟：
向250mL圓底燒瓶中加入2,3-二氯馬來酐10.9g(65.9mmol)和甲胺鹽酸鹽4.42g(65.9mmol)，加入冰乙酸100mL，回流條件下磁力攪拌6h，TLC跟蹤檢測至反應(yīng)完全。溶液呈暗褐色，降至室溫后，加水100mL，以乙酸乙酯萃取，依次用飽和碳酸氫鈉溶液和飽和食鹽水清洗，減壓蒸去溶劑，得到褐色粗品，柱層析分離(體積比石油醚：乙酸乙酯＝9:1，硅膠200-300目)得到白色片狀固體7.3g，收率62％。
(3)2,3-二(3-吲哚)-N-甲基馬來酰亞胺的合成
反應(yīng)路線：
反應(yīng)步驟：
a溴乙烷格氏試劑的制備
N2保護(hù)下，向250mL三頸瓶中加入鎂條1.5g(61.6mmol)，加入無水乙醚10mL，滴加溴乙烷4.56mL(61.6mmol)，微熱使引發(fā)后，劇烈攪拌，緩慢滴加溴乙烷，使溶劑保持微沸狀態(tài)。滴加完畢，補加無水乙醚10mL，于40℃回流約1h使反應(yīng)充分，得到煙灰色溴乙烷格氏試劑。
b吲哚格氏試劑的制備及2,3-二(3-吲哚)-N-甲基馬來酰亞胺的制備
先向反應(yīng)瓶中加入THF(10mL)，加入40mL吲哚和7.2g(61.6mmol)溴乙烷格氏試劑的甲苯溶液，溶液變黑色，于40℃反應(yīng)約1h。加入40mL2,3-二氯-N-甲基馬來酰亞胺5g(28mmol)的甲苯溶液，約40min滴加完畢，溶液呈紅黑色。回流條件下反應(yīng)約6h反應(yīng)完全。降至室溫后，加入80mL飽和NH4Cl溶液猝滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取(5×50mL)，合并有機(jī)相，減壓蒸去溶劑，柱層析分離(體積比石油醚：乙酸乙酯＝3:1，硅膠200-300目)得到紅色固體5.26g，收率55.1％。
(4)6-甲基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮的合成
反應(yīng)路線：
在250mL圓底燒瓶中加入2,3-二(3-吲哚)-N-甲基馬來酰亞胺2.0g(5.87mmol)，并加200mL丁酮使其溶解，再加入碳酸鉀4.0g(29mmol)和氯化銅1.58g(11.73mmol)，將反應(yīng)裝置于85℃油浴鍋中反應(yīng)，反應(yīng)過程中TLC跟蹤監(jiān)測，2h基本反應(yīng)完全。冷卻至室溫，抽濾，萃取，用摩爾濃度為0.1mol/L的鹽酸溶液清洗有機(jī)相，然后水洗，無水硫酸鎂干燥， 減壓蒸餾蒸去溶劑，得到淺黃色固體1.59g，收率80％。
(5)吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,6-二酸酐的合成
反應(yīng)路線：
在25mL圓底瓶中加入6-甲基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮238mg(0.70mmol)，加入質(zhì)量濃度為10％的氫氧化鉀溶液10mL，磁力攪拌下于90℃的油浴鍋中回流反應(yīng)約3h，TLC跟蹤監(jiān)測至原料反應(yīng)完全。降至室溫后，以摩爾濃度為2mol/L的鹽酸溶液猝滅反應(yīng)，燒瓶內(nèi)出現(xiàn)大量黃色固體，至溶液呈中性后室溫攪拌1h，抽濾，然后水洗，得到黃褐色固體205mg(90％)。
(6)6-氨基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮的合成。
反應(yīng)路線：
反應(yīng)步驟：
在50mL圓底燒瓶中加入吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,6-二酸酐56mg(0.17mmol)和THF(10mL)，滴加水合肼，溶液由渾濁變澄清，于45℃的油浴中加熱，回流條件下反應(yīng)。TLC跟蹤監(jiān)測至原料反應(yīng)完全，減壓蒸去溶劑，加入約30mL水，出現(xiàn)大量黃色沉淀，抽濾，石油醚洗，得到黃色固體20mg，收率34％。
(7)吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮-6-芳腙類化合物的合成
反應(yīng)路線：
其中R-CHO為以下所列結(jié)構(gòu)：
反應(yīng)步驟：
在25mL圓底燒瓶中加入51mg(0.15mmol)6-氨基-吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮和無水乙醇5mL，然后加醛類化合物(0.5mmol)和乙酸0.01mL(0.002mmol)，回流條件下反應(yīng)，TLC跟蹤監(jiān)測至原料反應(yīng)完全。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，加水約10mL,出現(xiàn)了大量沉淀，抽濾，水洗，石油醚洗，柱層析分離(體積比石油醚：乙酸乙酯＝10:1)得到橙黃色固體，原料不同，對應(yīng)的產(chǎn)物如下表。
吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮-6-芳腙類化合物的合成
部分化合物數(shù)據(jù)：
(E)-6-(benzylideneamino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6H)-d ione(3a)
Yellow powder 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.02(s,1H),11.82(s,1H),9.46(s,1H),9.00(s,2H),8.80(s,1H),7.95(s,1H),7.89–7.76(m,2H),7.58(s,5H),7.39(d,J＝6.8Hz,2H)。
(E)-6-((3-methylbenzylidene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6H)-dione(3b)
Yellow powder 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.86(s,2H),9.44(s,1H),9.04(d,J＝7.9Hz,2H),7.86(d,J＝8.1Hz,2H),7.79(s,1H),7.73(s,1H),7.60(t,J＝7.5Hz,2H),7.46(s,1H),7.40(t,J＝7.3Hz,3H),2.43(s,3H)。
(E)-6-((4-methylbenzylidene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6H)-dione(3c)
Yellow powder 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.77(d,J＝63.7Hz,2H),9.38(s,1H),9.02(d,J＝7.8Hz,2H),7.83(dd,J＝16.6,9.1Hz,4H),7.58(t,J＝7.5Hz,3H),7.38(t,J＝7.3Hz,4H),2.42(s,2H)。
(E)-6-((3-chlorobenzylidene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6H)-dione(3d)
Yellow powder 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,2H),9.43(s,1H),8.94(d,J＝8.0Hz,2H),7.95(s,1H),7.86(s,1H),7.77(d,J＝8.0Hz,2H),7.56(dd,J＝24.0,8.0Hz,4H),7.34(d,J＝8.0Hz，2H)。
(E)-6-((4-bromobenzylidene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6H)-dione(3e)
Yellow powder.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.84(s,2H),9.49(s,1H),9.01(d,J＝7.9Hz,2H),7.90(d,J＝8.1Hz,2H),7.84(d,J＝8.1Hz,2H),7.78(d,J＝8.1Hz,2H),7.58(q,J＝7.5Hz,2H),7.42–7.32(m,3H)。
(E)-6-((4-fluorobenzylidene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6H)-dione(3f)
Yellow powder.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.85(s,1H),11.74(s,1H),9.45(s,1H),9.08–8.90(m,2H),8.01(d,J＝4.0Hz,1H),7.90–7.74(m,2H),7.63–7.49(m,3H),7.39(dt,J＝14.4,8.0Hz,4H)。
(E)-6-((2-methoxybenzylidene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazo le-5,7(6H)-dione(3g)
Yellow powder 1H NMR(600 MHz,DMSO-d6)δ12.04(s,1H),11.81(d,J＝25.4Hz,2H),9.75(d,J＝10.6Hz,1H),9.02(d,J＝7.5Hz,2H),8.82(d,J＝8.3Hz,1H),8.06(d,J＝7.7Hz,1H),7.86(dd,J＝25.5,7.6Hz,2H),7.59(tt,J＝15.8,7.8Hz,3H),7.47–7.31(m,3H),7.22(d,J＝8.4Hz,1H),7.12(dd,J＝19.2,11.8Hz,1H),3.96(s,2H)。
(E)-6-((3-methoxybenzylidene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazo le-5,7(6H)-dione(3h)
Yellow powder 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.98(s,1H),9.46(s,1H),9.01(dd,J＝16.3,7.9Hz,2H),7.82(dd,J＝19.9,8.1Hz,3H),7.58(dd,J＝17.2,9.2Hz,2H),7.51(dt,J＝15.5,8.2Hz,3H),7.38(dd,J＝17.3,9.5Hz,2H),7.14(dd,J＝7.6,2.0Hz,1H),3.88(s,3H)。
(E)-6-((4-methoxybenzylidene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbaz ole-5,7(6H)-dione(3i)
Yellow powder.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.83(s,2H),9.31(s,1H),9.02(d,J＝8.0Hz,2H),7.90(d,J＝8.0Hz,2H),7.84(d,J＝8.0Hz,2H),7.58(t,J＝8.0Hz,2H),7.38(t,J＝8.0Hz,2H),7.12(d,J＝12.0Hz,2H),3.87(s,3H)。
(E)-6-((4-nitrobenzylidene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6H)-dione(3j)
Yellow powder 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ12.80(s,2H),9.58(s,1H),9.04(d,J＝8.3Hz,2H),8.02(s,1H),7.93(d,J＝7.7Hz,1H),7.78(d,J＝7.9Hz,2H),7.60(dd,J＝16.9,9.3Hz,3H),7.43–7.33(m,2H)。
(E)-6-((2-hydroxybenzylidene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazo le-5,7(6H)-dione(3k)
Yellow powder.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.83(s,1H),11.75(s,1H),10.98(s,1H),9.65(s,1H),9.06–8.91(m,2H),7.80(d,J＝8.0Hz,2H),7.55(d,J＝8.0Hz,2H),7.39(dt,J＝14.0,7.2Hz,4H),7.07–6.94(m,2H)。
(E)-6-((pyridin-3-ylmethylene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazo le-5,7(6H)-dione(3l)
Yellow powder.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,2H),9.46(s,1H),9.03(s,1H),8.92(s,2H),8.74(s,1H),8.30(s,1H),7.76(s,2H),7.60–7.49(m,3H),7.33(d,J＝4.0Hz,2H)。
(E)-6-((quinolin-3-ylmethylene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbaz ole-5,7(6H)-dione(3m)
Yellow powder 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.89(s,1H),11.74(s,1H),9.77(s,1H),9.48(s,1H),9.03(dd,J＝16.1,7.7Hz,2H),8.87(s,1H),8.15(dd,J＝24.7,8.2Hz,2H),7.94–7.78(m,3H),7.76–7.65(m,1H),7.58(dt,J＝20.5,7.6Hz,3H),7.39(dt,J＝15.0,7.7Hz,3H)。
(E)-6-((cyclohexylmethylene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazol e-5,7(6H)-dione(3n)
Yellow powder 1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.89(s,1H),11.68(d,J＝8.5Hz,1H),8.99(d,J＝7.5Hz,1H),8.91(d,J＝7.7Hz,1H),8.72(d,J＝7.7Hz,1H),7.79(dd,J＝19.7,7.5Hz,2H),7.55(dd,J＝16.2,9.1Hz,2H),7.34(dt,J＝14.6,7.0Hz,2H),2.61–2.36(m,2H),1.98–1.63(m,2H),1.51–1.27(m,2H)。
(E)-6-((2,4-dibromo-6-hydroxybenzylidene)amino)-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7(6H)-dione(3o)
Yellow powder 1H NMR(600MHz,DMSO)δ11.81(d,J＝73.8Hz,1H),10.05(s,1H),9.08–8.85(m,1H),8.09(s,1H),7.90(d,J＝16.1Hz,2H),7.77(s,2H),7.54(s,2H),7.34(s,3H)。
化合物高分辨數(shù)據(jù)
活性研究：
此系列化合物在國家新藥篩選中心進(jìn)行了初步活性研究，初步的抗腫瘤活性測試表明，20μg/mL的吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮-6-芳腙類化合物對細(xì)胞周期分裂蛋白25B(CDC 25B)有很好的抑制作用，具體見下表。測試濃度均在20μg/mL。
吲哚[2,3-a]吡咯[3,4-c]咔唑-5,7-二酮-6芳腙對CDC25B抑制率
以上實施例僅為說明本發(fā)明的技術(shù)思想，不能以此限定本發(fā)明的保護(hù)范圍，凡是按照本發(fā)明提出的技術(shù)思想，在技術(shù)方案基礎(chǔ)上所做的任何改動，均落入本發(fā)明保護(hù)范圍內(nèi)。