1.一株節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)BLCY-004,2016年8月16日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所,保藏號(hào)CGMCC No.12855。
2.權(quán)利要求1所述節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)BLCY-004的培養(yǎng)方法,其特征在于,步驟如下:
(1)取節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)BLCY-004接種于固體培養(yǎng)基中,在28-35℃的條件下,培養(yǎng)24-48h,制得活化菌株;
(2)取步驟(1)制得的活化菌株,接種于種子培養(yǎng)基中,在28~35℃的條件下,增殖培養(yǎng)24-48h,即得種子液;
(3)取步驟(2)制得的種子液,按體積比1~10%的比例接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中,在28~35℃擴(kuò)大培養(yǎng)36~60h,即得菌體發(fā)酵液。
3.如權(quán)利要求2所述的培養(yǎng)方法,其特征在于,所述步驟(2)中的種子培養(yǎng)基組分如下,均為重量百分比:
葡萄糖2%,酵母膏1.5%,磷酸二氫鉀0.2%,磷酸氫二銨0.6%,七水硫酸鎂0.01%,pH6.0~7.2。
4.如權(quán)利要求2所述的培養(yǎng)方法,其特征在于,所述步驟(3)中的發(fā)酵培養(yǎng)基組分如下,均為重量百分比:
蔗糖4%,乳糖1%,酵母膏1.2%,蛋白胨0.8%,七水硫酸鎂0.1%,磷酸氫二銨0.4%,pH 6.0~7.2。
5.權(quán)利要求1所述節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)BLCY-004在制備β-呋喃果糖苷酶中的應(yīng)用。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于,步驟如下:
(a)取上述制備的菌體發(fā)酵液經(jīng)固液分離,洗滌菌體,合并分離液及洗滌液,制得粗酶液;
(b)將步驟(a)制得的粗酶液中加入固體氯化鈉,制得0.1~0.5mol/L的混合溶液,冷藏靜止2h,固液分離,取上清液,再加入固體氯化鈉,使溶液達(dá)到90%的硫酸銨飽和度,冷藏靜止2h,固液分離,取沉淀,溶解于pH 7.8、0.05mol/L的磷酸鹽緩沖中,制得β-呋喃果糖苷酶。
7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用,其特征在于,所述步驟(a)的洗滌菌體為采用pH 7.0、濃度40mmol/L的磷酸緩沖液重懸,然后經(jīng)固液分離,取液體,制得洗滌液。
8.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用,其特征在于,所述步驟(a)、(b)中的固液分離均為在4℃、4000r/min條件下,離心40min。
9.權(quán)利要求5制備的β-呋喃果糖苷酶在制備低聚乳果糖中的應(yīng)用。