本發(fā)明涉及土霉素生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

土霉素屬傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品，是龜裂鏈霉菌在發(fā)酵過(guò)程中的次級(jí)代謝產(chǎn)物。目前所采用的土霉素生產(chǎn)工藝所生產(chǎn)出來(lái)的土霉素產(chǎn)品，通過(guò)721分光光度計(jì)進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，在490nm光波下，普遍能夠檢測(cè)出大量雜質(zhì)，而這些雜質(zhì)的多少，是衡量土霉素產(chǎn)品質(zhì)量的重要指標(biāo)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種土霉素生產(chǎn)工藝，通過(guò)本生產(chǎn)工藝生產(chǎn)出的土霉素產(chǎn)品質(zhì)量好，雜質(zhì)含量低。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

一種土霉素生產(chǎn)工藝，包括以下步驟：

a、制取土霉素發(fā)酵液，選用龜裂鏈霉菌培養(yǎng)基，龜裂鏈霉菌培養(yǎng)基的氮源為黃豆餅粉、淡黃色玉米漿、硫酸銨和氨水，碳源為淀粉、淀粉乳；采用純種沉沒(méi)、通氣攪拌三級(jí)發(fā)酵培養(yǎng)的方式，在發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中，其壓力保持在0.01MP～0.05MP范圍之內(nèi)，溫度控制在26℃～34℃之間，發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間控制在110h～190h之間，以使龜裂鏈霉菌大量繁殖，促使其在生物代謝過(guò)程中產(chǎn)生土霉素；發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程結(jié)束后形成土霉素發(fā)酵液，土霉素存在于土霉素發(fā)酵液中的龜裂鏈霉菌細(xì)胞內(nèi)；

b、酸化處理，將土霉素發(fā)酵液打入酸化罐中，加入草酸和鹽酸進(jìn)行酸化處理，使其pH值控制在1.70～2.05范圍之內(nèi)；

c、凈化稀釋?zhuān)瑢⑺峄幚砗蟮耐撩顾匕l(fā)酵液加入凈化劑黃血鹽鈉，土霉素發(fā)酵液與凈化劑黃血鹽鈉的重量混合配比為1000：2.0～2.8，之后加入濾液進(jìn)行稀釋?zhuān)♂岓w積控制在7000u/ml～14000u/mL范圍之內(nèi),之后加入重量配比為 1000：1.5～2.2的硫酸鋅，以對(duì)其進(jìn)行凈化處理，形成土霉素發(fā)酵稀釋液；

d、濾料處理，將土霉素發(fā)酵稀釋液液經(jīng)板框壓濾機(jī)進(jìn)行濾料處理，分離出菌絲渣和土霉素原液；

e、脫色處理，將土霉素原液經(jīng)裝有122#樹(shù)脂顆粒的脫色罐進(jìn)行脫色處理，122#樹(shù)脂顆粒粒度為40％～90％，機(jī)械強(qiáng)度≥30％，脫色罐交換量為4mg當(dāng)量/g～8mg當(dāng)量/g；

f、土霉素結(jié)晶，將經(jīng)脫色處理后的土霉素原液打入結(jié)晶罐進(jìn)行結(jié)晶工藝處理，結(jié)晶時(shí)間控制在45min～55min；形成土霉素結(jié)晶液；

g、分離烘干，將土霉素結(jié)晶液通過(guò)板框分離出土霉素晶體，將土霉素晶體烘干，形成產(chǎn)品土霉素干粉。

本發(fā)明進(jìn)一步改進(jìn)在于：

步驟b中，土霉素發(fā)酵液酸化處理后的pH值為1.95。

在步驟c中，土霉素發(fā)酵液與凈化劑黃血鹽鈉的重量混合配比為1000：2.5，之后加入濾液進(jìn)行稀釋?zhuān)♂岓w積控制在9000u/ml～12000u/ml范圍之內(nèi),形成土霉素發(fā)酵稀釋液。

步驟e中，脫色罐交換量為6mg當(dāng)量/g。

步驟f中，其結(jié)晶時(shí)間為50min。

采用上述技術(shù)方案所產(chǎn)生的有益效果在于：

經(jīng)試驗(yàn)證明，土霉素中的雜質(zhì)主要受發(fā)酵液顏色深淺影響，發(fā)酵液顏色越深，其雜質(zhì)含量越高，發(fā)酵液顏色主要受玉米漿顏色影響，選擇淡黃色玉米漿發(fā)酵液顏色相對(duì)較淺，因此有利于降低產(chǎn)品雜質(zhì)。

在凈化稀釋環(huán)節(jié)，稀釋體積控制在(7000u/ml～11000u/ml)范圍之內(nèi)：稀釋體積控制在7000～11000u/ml的為大體積，稀釋體積12000～14000u/ml為小體積，經(jīng)試驗(yàn)，大體積稀釋時(shí)雜質(zhì)的溶解相對(duì)較多；小體積稀釋體積較小，雜質(zhì)的溶解相對(duì)較少，因此適當(dāng)降低稀釋效價(jià)，有利于降低產(chǎn)品雜質(zhì)。

經(jīng)多次試驗(yàn)，土霉素結(jié)晶時(shí)間延長(zhǎng)至60分鐘以上時(shí)，土霉素結(jié)晶體從土霉素原液中吸附色素等雜質(zhì)而被污染，使雜質(zhì)增多；結(jié)晶時(shí)間低于45分鐘，土霉素結(jié)晶不完全，土霉素析出少，收率偏低，對(duì)于質(zhì)量較差的脫色液結(jié)晶時(shí)間60分鐘以上時(shí)，雜質(zhì)增多，土霉素結(jié)晶時(shí)間控制在45～55分鐘，可在保障產(chǎn)率不降低的情況下，降低土霉素雜質(zhì)含量。

122#樹(shù)脂顆粒粒度為40％～90％，機(jī)械強(qiáng)度≥30％，脫色罐交換量為4mg當(dāng)量/g～8mg當(dāng)量/g；可以提高土霉素原液的脫色效果。

通過(guò)本生產(chǎn)工藝生產(chǎn)出的土霉素產(chǎn)品質(zhì)量好，雜質(zhì)含量低。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

一種土霉素生產(chǎn)工藝，包括以下步驟：

a、制取土霉素發(fā)酵液，選用龜裂鏈霉菌培養(yǎng)基，龜裂鏈霉菌培養(yǎng)基的氮源為黃豆餅粉、淡黃色玉米漿、硫酸銨和氨水，碳源為淀粉、淀粉乳；采用純種沉沒(méi)、通氣攪拌三級(jí)發(fā)酵培養(yǎng)的方式，在發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中，其壓力保持在0.01MP左右，溫度控制在26℃左右，發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間控制在110h左右，以使龜裂鏈霉菌大量繁殖，促使其在生物代謝過(guò)程中產(chǎn)生土霉素；發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程結(jié)束后形成土霉素發(fā)酵液，土霉素存在于土霉素發(fā)酵液中的龜裂鏈霉菌細(xì)胞內(nèi)；

b、酸化處理，將土霉素發(fā)酵液打入酸化罐中，加入草酸和鹽酸進(jìn)行酸化處理，使其pH值控制在1.70左右；

c、凈化稀釋?zhuān)瑢⑺峄幚砗蟮耐撩顾匕l(fā)酵液加入凈化劑黃血鹽鈉，土霉素發(fā)酵液與凈化劑黃血鹽鈉的重量混合配比為1000：2.0，之后加入濾液進(jìn)行稀釋?zhuān)♂岓w積控制在7000u/ml左右,之后加入重量配比為1000：1.5左右的硫酸鋅，以對(duì)其進(jìn)行凈化處理，形成土霉素發(fā)酵稀釋液；

d、濾料處理，將土霉素發(fā)酵稀釋液液經(jīng)板框壓濾機(jī)進(jìn)行濾料處理，分離出菌絲渣和土霉素原液；

e、脫色處理，將土霉素原液經(jīng)裝有122#樹(shù)脂顆粒的脫色罐進(jìn)行脫色處理，122#樹(shù)脂顆粒粒度為40％左右，機(jī)械強(qiáng)度70％，脫色罐交換量為4mg當(dāng)量/g；

f、土霉素結(jié)晶，將經(jīng)脫色處理后的土霉素原液打入結(jié)晶罐進(jìn)行結(jié)晶工藝處理，結(jié)晶時(shí)間控制在45min左右；形成土霉素結(jié)晶液；

g、分離烘干，將土霉素結(jié)晶液通過(guò)板框分離出土霉素晶體，將土霉素晶體烘干，形成產(chǎn)品土霉素干粉。

所生產(chǎn)出的土霉素干粉雜質(zhì)含量為：3.3％

實(shí)施例2

一種土霉素生產(chǎn)工藝，包括以下步驟：

a、制取土霉素發(fā)酵液，選用龜裂鏈霉菌培養(yǎng)基，龜裂鏈霉菌培養(yǎng)基的氮源為黃豆餅粉、淡黃色玉米漿、硫酸銨和氨水，碳源為淀粉、淀粉乳；采用純種沉沒(méi)、通氣攪拌三級(jí)發(fā)酵培養(yǎng)的方式，在發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中，其壓力保持在0.03MP左右，溫度控制在30℃左右，發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間控制在150h左右，以使龜裂鏈霉菌大量繁殖，促使其在生物代謝過(guò)程中產(chǎn)生土霉素；發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程結(jié)束后形成土霉素發(fā)酵液，土霉素存在于土霉素發(fā)酵液中的龜裂鏈霉菌細(xì)胞內(nèi)；

b、酸化處理，將土霉素發(fā)酵液打入酸化罐中，加入草酸和鹽酸進(jìn)行酸化處理，使其pH值控制在1.95左右；

c、凈化稀釋?zhuān)瑢⑺峄幚砗蟮耐撩顾匕l(fā)酵液加入凈化劑黃血鹽鈉，土霉素發(fā)酵液與凈化劑黃血鹽鈉的重量混合配比為1000：2.5，之后加入濾液進(jìn)行稀釋?zhuān)♂岓w積控制在11000u/mL左右,之后加入重量配比為1000：1.8的硫酸鋅，以對(duì)其進(jìn)行凈化處理，形成土霉素發(fā)酵稀釋液；

d、濾料處理，將土霉素發(fā)酵稀釋液液經(jīng)板框壓濾機(jī)進(jìn)行濾料處理，分離出菌絲渣和土霉素原液；

e、脫色處理，將土霉素原液經(jīng)裝有122#樹(shù)脂顆粒的脫色罐進(jìn)行脫色處理，122#樹(shù)脂顆粒粒度為40％～90％，機(jī)械強(qiáng)度70％，脫色罐交換量為6mg當(dāng)量/g；

f、土霉素結(jié)晶，將經(jīng)脫色處理后的土霉素原液打入結(jié)晶罐進(jìn)行結(jié)晶工藝處理，結(jié)晶時(shí)間控制在48min；形成土霉素結(jié)晶液；

g、分離烘干，將土霉素結(jié)晶液通過(guò)板框分離出土霉素晶體，將土霉素晶體烘干，形成產(chǎn)品土霉素干粉。

所生產(chǎn)出的土霉素干粉雜質(zhì)含量為：3.05％

實(shí)施例3

一種土霉素生產(chǎn)工藝，包括以下步驟：

a、制取土霉素發(fā)酵液，選用龜裂鏈霉菌培養(yǎng)基，龜裂鏈霉菌培養(yǎng)基的氮源為黃豆餅粉、淡黃色玉米漿、硫酸銨和氨水，碳源為淀粉、淀粉乳；采用純種沉沒(méi)、通氣攪拌三級(jí)發(fā)酵培養(yǎng)的方式，在發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中，其壓力保持在0.05MP左右，溫度控制在34℃左右，發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間控制在190h左右，以使龜裂鏈霉菌大量繁殖，促使其在生物代謝過(guò)程中產(chǎn)生土霉素；發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程結(jié)束后形成土霉素發(fā)酵液，土霉素存在于土霉素發(fā)酵液中的龜裂鏈霉菌細(xì)胞內(nèi)；

b、酸化處理，將土霉素發(fā)酵液打入酸化罐中，加入草酸和鹽酸進(jìn)行酸化處理，使其pH值控制在2.05左右；

c、凈化稀釋?zhuān)瑢⑺峄幚砗蟮耐撩顾匕l(fā)酵液加入凈化劑黃血鹽鈉，土霉素發(fā)酵液與凈化劑黃血鹽鈉的重量混合配比為1000：2.8，之后加入濾液進(jìn)行稀釋?zhuān)♂岓w積控制在14000u/mL左右,之后加入重量配比為1000：2.2的硫酸鋅，以對(duì)其進(jìn)行凈化處理，形成土霉素發(fā)酵稀釋液；

d、濾料處理，將土霉素發(fā)酵稀釋液液經(jīng)板框壓濾機(jī)進(jìn)行濾料處理，分離出菌絲渣和土霉素原液；

e、脫色處理，將土霉素原液經(jīng)裝有122#樹(shù)脂顆粒的脫色罐進(jìn)行脫色處理，122#樹(shù)脂顆粒粒度為90％，機(jī)械強(qiáng)度70％，脫色罐交換量為8mg當(dāng)量/g；

f、土霉素結(jié)晶，將經(jīng)脫色處理后的土霉素原液打入結(jié)晶罐進(jìn)行結(jié)晶工藝處理，結(jié)晶時(shí)間控制在55min；形成土霉素結(jié)晶液；

g、分離烘干，將土霉素結(jié)晶液通過(guò)板框分離出土霉素晶體，將土霉素晶體烘干，形成產(chǎn)品土霉素干粉。

所生產(chǎn)出的土霉素干粉雜質(zhì)含量為：2.95％。