本發(fā)明涉及高分子材料、分離純化技術領域，具體而言，涉及砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備及萃取方法。

背景技術：

砂生槐(Sophora moocrorftiana)又名“西藏狼牙刺”、“刺柴”，豆科槐屬，多年生矮灌木，分布于西藏波密、林芝等地區(qū)，為西藏高原特有植物，具有極強的抗旱、抗風沙等生態(tài)適應性和很好的防風固沙、保持水土功能。研究表明，砂生槐含有多種中藥化學成分，地上部分含有α-苦參堿、氧化苦參堿和槐根堿(槐果堿)；果實含氧化苦參堿1.64％、氧化槐根堿0.5％、苦參堿0.172％和槐根堿0.005％；藏醫(yī)藥記載砂生槐多以種子入藥，味苦性涼，消炎解毒、催吐，主治濕熱黃疽、白喉、痢疾、赤巴病、消化不良、寄生蟲病等，是一種極為寶貴的藥用植物資源?，F代醫(yī)藥研究證明，苦參堿、氧化苦參堿和槐果堿是砂生槐的主要藥用成分，具有抑制腫瘤細胞生長、抗風濕、抗肝纖維化、保肝、促進肝功能恢復、抑制乙肝病毒、抗菌、升高白細胞數等多種藥理作用。目前，該類生物堿的提取方法主要有超臨界流體萃取(SFE)、液液萃取(LLE)、固相萃取(SPE)、微波輔助提取技術等。由于砂生槐全株中所含化學成分較多，基質復雜，影響了這些生物堿的選擇性提取效率。因此，開發(fā)一種高效分離富集天然產物中生物堿的提取技術具有重要意義。

分子印跡聚合物(Molecularly imprinted polymers,MIPs)是一種具有較強分子識別能力的新型高分子仿生材料，它可以實現對藥物目標分子的專一性識別、富集和分離。MIP通過模板分子、功能單體和交聯(lián)劑的相互作用形成三維空間結構，內部存在著大量與模板分子在空間結構、結合位點等高度匹配的分子印跡空穴，對模板分子有特異的識別能力和良好的親和性。這種高分子聚合物不僅有類似酶和抗體的特定識別能力，還具有獨特的化學穩(wěn)定性，其分子識別能力不受酸、堿、熱、有機溶劑等環(huán)境因素的影響。因此，MIP適合作為固相萃取(SPE)填料、固相微萃取涂層以及色譜柱填料等，可以實現對目標分子的提取、分離和純化等產業(yè)化和一體化。目前，有關分子印跡技術在黃酮、生物堿、多酚等中藥活性成分分離純化中的應用逐漸增多，就生物堿而言，具有藥理活性的成分常常有好幾種，但目前分子印跡聚合物用于中草藥活性成分的提取，均是針對單一成分作為目標物，若要同時提取多種活性成分，則需要分批合成幾種分子印跡聚合物來富集多種活性成分，如此，就增加了對活性成分提取的次數和成本。截至目前，關于分子印跡技術對于苦參總堿(包括苦參堿、氧化苦參堿和槐果堿)的提取，僅有CN200810150753、CN201310679956.4、CN201310516064.2、CN201010115069.0這四個專利報道了相關內容，但上述專利都只能針對苦參總堿中的一種進行提取；而且其中有的技術提到了采用表面印跡技術制備MIP，雖然能夠提高空間傳質速度快和增加表位結合能力，但吸附量通常會降低；也有技術由于需要硅球等接枝載體，所以增加了成本。目前，尚未見從砂生槐中一次性同時提取苦參堿、槐果堿和氧化苦參堿三種生物堿的分子印跡聚合物的相關技術。

技術實現要素：

本發(fā)明的目的在于提供砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備方法，此制備方法制備方便，而且能夠避免吸附量的降低，制備成本也較低。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種分子印跡聚合物，其能夠同時對苦參堿、槐果堿和氧化苦參堿三種生物堿進行提取，提取效率高。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種利用分子印跡聚合物萃取生物堿的方法，該方法操作簡單，實用性高。

本發(fā)明解決其技術問題是采用以下技術方案來實現的：

砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備方法，包括以下步驟：

將模板原料與有機溶劑、功能單體混合，預聚合25～35min，然后加入交聯(lián)劑和引發(fā)劑，得到聚合物；模板原料、有機溶劑、功能單體、交聯(lián)劑、引發(fā)劑的用量比為0.1mmol：30～50mL：0.4～0.8mmol：1.6～2.4mmol：12～13.5mg，模板原料包括苦參堿和氧化苦參堿，苦參堿與氧化苦參堿的摩爾比為0.8～1.2:0.8～1.2；

將聚合物置于保護氣體中，然后在55～65℃下振蕩反應20～27h，保護氣體選自氮氣、惰性氣體中的一種或多種；

將振蕩反應后的物料洗脫至除去模板原料，然后清除殘留的有機物，干燥。

優(yōu)選地，在本發(fā)明較佳實施例中，在加入交聯(lián)劑時，還需加入致孔劑，致孔劑與模板原料的用量比為1～5mL：0.1mmol。

優(yōu)選地，在本發(fā)明較佳實施例中，將振蕩反應后的物料洗脫至除去模板原料具體為：利用體積濃度為10～20％的第一洗脫液反復洗脫，直至除去模板原料，第一洗脫液包括乙酸和甲醇，乙酸和甲醇的體積比為1～2:8～9。

優(yōu)選地，在本發(fā)明較佳實施例中，當振蕩反應后的物料為液體物料時，則在洗脫之前，需將液體物料在800～1200rpm下進行離心處理，得到沉淀；當振蕩反應后的物料為固體物料時，則在洗脫之前，需將固體物料研磨至粒徑在800目以上。

優(yōu)選地，在本發(fā)明較佳實施例中，上述有機溶劑選自二氯甲烷、甲苯、甲醇、三氯甲烷中的一種或多種，優(yōu)選二氯甲烷；功能單體選自甲基丙烯酸、2-乙烯基吡啶、甲基丙烯酸甲酯、丙烯酰胺中的一種或多種，優(yōu)選甲基丙烯酸；交聯(lián)劑選自三甲氧基丙基三甲基丙烯酸酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯、二乙烯基苯、三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯中的一種或多種，優(yōu)選三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯；引發(fā)劑選自偶氮二異丁腈、偶氮二異庚腈中的一種或多種，優(yōu)選偶氮二異丁腈。

另外，一種分子印跡聚合物，通過上述的砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備方法制得。

另外，一種利用分子印跡聚合物萃取生物堿的方法，通過固相萃取方法進行萃取。

優(yōu)選地，在本發(fā)明較佳實施例中，上述固相萃取方法包括：利用水活化分子印跡聚合物，接著使樣液流經分子印跡聚合物，然后利用淋洗水淋洗分子印跡聚合物，再進行洗脫；

樣液為含有至少一種目標物的乙腈，淋洗水選自去離子水、蒸餾水、超純水中的一種或多種。

優(yōu)選地，在本發(fā)明較佳實施例中，在利用水活化分子印跡聚合物之前，還包括：依次利用預淋液和甲醇澆淋分子印跡聚合物，預淋液為乙酸、甲醇的混合溶液，并且乙酸、甲醇的體積比為1～2:8～9。

優(yōu)選地，在本發(fā)明較佳實施例中，進行洗脫時，是利用體積濃度為20～30％的第二洗脫液進行，并且第二洗脫液包括乙酸和甲醇，乙酸和甲醇的體積比為1～2:8～9。

相對于現有技術，本發(fā)明包括以下有益效果：本發(fā)明首次以苦參堿和氧化苦參堿作為模板原料，在功能單體、交聯(lián)劑、引發(fā)劑等的作用下，以特定的比例發(fā)生反應，通過沉淀聚合合成了分子印跡聚合物。該分子印跡聚合物是一種具有與模板原料結構相匹配的空間孔穴結構的高分子聚合物，而苦參堿、槐果堿、氧化苦參堿三種生物堿又具有相近的結構功能基團，所以制得的分子印跡聚合物具有與三種生物堿匹配的結合位點，因此其能夠同時選擇性的吸附三種生物堿，具有良好的“類”特異性。

本發(fā)明的砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備方法，操作簡單、成本低，對氧化苦參堿、槐果堿、苦參堿的飽和吸附量大，分別能夠達到2960μg/g、1890μg/g、1955μg/g，具有很好的萃取性能。而且該制備方法是一種新的技術，解決了長期以來的生物堿類分子印跡聚合物吸附種類少的問題，能夠實現同時分離砂生槐中三種生物堿的目的。

本發(fā)明制得的印跡聚合物對生物堿的識別取決于生物堿與分子印跡聚合物的空間位點的可逆互作效應，利用分子印跡聚合物來對三種生物堿進行選擇提取，能夠解決中藥等復雜基質中苦參總堿的萃取效率低的問題，而且能夠同時選擇性凈化、富集樣液中的氧化苦參堿和槐果堿，對3種生物堿的回收率為能夠達到90％以上，提取效率高。

附圖說明

為了更清楚的說明本發(fā)明實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單的介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其它的附圖。

圖1是本發(fā)明實施例一提供的分子印跡聚合物的掃描電子顯微鏡圖；

圖2是本發(fā)明實施例一提供的分子印跡聚合物對三種苦參堿類藥物的吸附效果柱狀圖。

具體實施方式

為使本發(fā)明實施例的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚，下面將對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產品。

下面對本發(fā)明實施例的砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備及萃取方法進行具體說明。

砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備方法包括以下步驟：

步驟A：將模板原料與有機溶劑、功能單體混合，預聚合25～35min，然后加入交聯(lián)劑和引發(fā)劑，得到聚合物；模板原料、有機溶劑、功能單體、交聯(lián)劑、引發(fā)劑的用量比為0.1mmol：30～50mL：0.4～0.8mmol：1.6～2.4mmol：12～13.5mg，模板原料包括苦參堿和氧化苦參堿，苦參堿與氧化苦參堿的摩爾比為0.8～1.2:0.8～1.2。

具體操作時，可以將模板原料溶于有機溶劑中，然后加入功能單體預聚合25～35min，使模板原料與功能單體充分作用。當然，此種具體操作順序并不作為限制，也可以將模板原料、有機溶劑、功能單體混合即可。

預聚合時，震蕩頻率可以為150Hz，當然，此種設置并不作為限制，也可以為其它頻率，需要根據實際使用設備來確定。

在加入交聯(lián)劑時，還需加入致孔劑，致孔劑與模板原料的用量比為1～5mL：0.1mmol。實際上，致孔劑的添加是用于增大孔隙率，但若在前期加入有機溶劑后，物質的孔隙率較大，那么可以不用再添加致孔劑；若加入有機溶劑后，物質的孔隙率較小，則可以在加入交聯(lián)劑、引發(fā)劑的時候，添加致孔劑。致孔劑的加入量優(yōu)選滿足以下條件：有機溶劑和致孔劑的總用量在30～50mL范圍內。利用有機溶劑和致孔劑來增大物質孔隙率，如此，就能夠使制得的分子印跡聚合物的空間位點增多，從而提高分子印跡聚合物對生物堿的提取效率。致孔劑選自乙腈、甲醇、三氯甲烷中的一種或多種，優(yōu)選乙腈。

上述有機溶劑選自二氯甲烷、甲苯、甲醇、三氯甲烷中的一種或多種，優(yōu)選二氯甲烷；功能單體選自甲基丙烯酸、2-乙烯基吡啶、甲基丙烯酸甲酯、丙烯酰胺中的一種或多種，優(yōu)選甲基丙烯酸；交聯(lián)劑選自三甲氧基丙基三甲基丙烯酸酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯、二乙烯基苯、三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯中的一種或多種，優(yōu)選三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯；引發(fā)劑選自偶氮二異丁腈、偶氮二異庚腈中的一種或多種，優(yōu)選偶氮二異丁腈。

砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備方法還包括步驟B：將步驟A得到的聚合物置于保護氣體中，然后在55～65℃下振蕩反應20～27h，保護氣體選自氮氣、惰性氣體中的一種或多種。

保護氣體優(yōu)選氮氣，成本低。在實際操作時，可以將聚合物通入氮氣中，持續(xù)5～10min，然后密封。也可以往聚合物環(huán)境中通入氮氣5～10min，然后密封。時間上的限制可以保證較徹底的排除聚合物環(huán)境中的氧氣，以免聚合物受到其它因素影響。但當然，其實只要使聚合物周圍環(huán)境充滿保護氣體即可。

55～65℃下的振蕩反應可以在水浴環(huán)境中進行，也可以在油浴環(huán)境中進行。

砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備方法還包括步驟C：將振蕩反應后的物料洗脫至除去模板原料，然后清除殘留的有機物，干燥。

洗脫操作能夠將模板原料從物料上洗脫下來，還能夠將未參加反應的原料洗脫下來。洗脫至除去模板原料具體為：利用體積濃度為10～20％的第一洗脫液反復洗脫，直至除去模板原料，第一洗脫液包括乙酸和甲醇，乙酸和甲醇的體積比為1～2:8～9。

當原料用量較多，則振蕩反應后的物料就為液體物料，那么在洗脫之前，需將液體物料在800～1200rpm下進行離心處理(優(yōu)選離心3～5min)，得到沉淀；當原料用量較少，則振蕩反應后的物料就為固體物料，那么在洗脫之前，需將固體物料研磨至粒徑在800目以上。

若振蕩反應后的物料為固體物料，則在實際操作時，可以將振蕩反應后的物料進行研磨，然后利用網孔數在800目以上的篩網進行篩分，得到粒徑在800目以上的物料，再對物料進行反復洗脫，直至不再洗出模板原料。

確定模板原料是否除去，可以通過測定洗脫得到的液體來獲知。

而清除殘留的有機物，可以洗去物料可能含有的雜質以及未反應的物質，以避免其對分子印跡聚合物、生物堿的結合位點的不利影響。清除操作可以利用甲醇進行，當然，此種選取并不作為限制，也可以選用其它的試劑來清除殘留有機物，如無水乙醇，只要選用的試劑能夠溶解有機殘留，又不會與洗脫后的物料發(fā)生反應即可。

本發(fā)明還提供了分子印跡聚合物，是通過上述的制備方法制得。

本發(fā)明還提供了利用上述分子印跡聚合物萃取生物堿的方法，通過固相萃取方法進行萃取。

上述固相萃取方法包括：利用水活化分子印跡聚合物，接著使樣液流經分子印跡聚合物，然后利用淋洗水淋洗分子印跡聚合物，再進行洗脫；樣液為含有至少一種目標物的乙腈，淋洗水選自去離子水、蒸餾水、超純水中的一種或多種，優(yōu)選去離子水。

樣液中含有氧化苦參堿、槐果堿、苦參堿(這三種生物堿即為目標物)中的一種或多種，當然，若樣液中同時含有兩種或三種生物堿，則有利于體現出利用該分子印跡聚合物進行提取的優(yōu)勢，因為該分子印跡聚合物能夠一次性對多種生物堿進行提取。而樣液中的生物堿的含量也并不限制。在操作人員提取得到含有目標物的液體后，可以將液體保存在乙腈中，而對目標物的純化、提取，就可以通過上述的利用分子印跡聚合物萃取生物堿的方法進行。

優(yōu)選的，在利用水活化分子印跡聚合物之前，可以將分子印跡聚合物填裝到針筒柱中，形成吸附劑床，然后才利用水澆淋、通過吸附劑床。極性水分子可以讓分子印跡聚合物的活性位點重新排布，以利于樣液中的目標物與分子印跡聚合物產生相互作用。

而在利用水活化分子印跡聚合物之前，還包括：依次利用預淋液和甲醇澆淋分子印跡聚合物，預淋液為乙酸、甲醇的混合溶液，并且乙酸、甲醇的體積比為1～2:8～9。預淋液、甲醇對分子印跡聚合物的澆淋，能夠除去分子印跡聚合物表面可能殘留的有機物。甲醇的使用也并不進行限制，也可以選用其它的物質，和甲醇化學性質相似的都行，如乙醇。

利用淋洗水淋洗后，進行洗脫時，是利用體積濃度為20～30％的第二洗脫液進行，并且第二洗脫液包括乙酸和甲醇，乙酸和甲醇的體積比為1～2:8～9。

若針筒柱容量為3mL，則其中可以填裝100mg的分子印跡聚合物，預淋液使用1mL、甲醇使用2mL、水使用2mL即可，淋洗水可以使用1mL，第二洗脫液使用2～5mL即可。

樣液通過分子印跡聚合物，由于分子印跡聚合物與樣液中的成分的吸引程度不同，樣液中的目標物將保留在分子印跡聚合物上，淋洗水淋洗去除雜質后，通過洗脫操作將目標物洗下，要得到的是洗脫后的物質，即目標物。

通過上述固相萃取方法，可以解決現有的通用型固相萃取柱選擇性差、基質效應大的問題，該方法對三種生物堿的回收率能達到90.80～92.90％。該固相萃取方法的針筒柱重復利用率高，分離效果好，可以去除樣液中雜質的干擾，大大提高樣液中三種苦參堿類藥物的萃取效率。

以下結合實施例對本發(fā)明的特征和性能作進一步的詳細描述：

實施例一

本實施例提供的砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備方法，包括以下步驟：

a.將模板原料與二氯甲烷、甲基丙烯酸混合，在20℃的環(huán)境條件下超聲進行預聚合30min，震蕩頻率為150Hz，然后依次加入三甲氧基丙基三甲基丙烯酸酯、偶氮二異丁腈和乙腈，得到聚合物；

其中，模板原料、二氯甲烷、甲基丙烯酸、三甲氧基丙基三甲基丙烯酸酯、偶氮二異丁腈、乙腈的用量比為0.25mmol：95mL：1mmol：5mmol：30mg：15mL，模板原料包括苦參堿和氧化苦參堿，苦參堿與氧化苦參堿的摩爾比為1:1；

b.將聚合物裝入燒瓶中，往其中通入氮氣，脫氧10min，密封燒瓶，將燒瓶置于60℃的恒溫下，水浴振蕩反應24h，得到白色懸浮液；

c.將步驟b得到的白色懸浮液在1000rpm下離心處理4min，得到沉淀，然后利用體積濃度為15％的第一洗脫液對沉淀進行反復洗脫，索氏提取洗脫后的上清液進行檢測，直至上清液中無模板原料檢出，停止洗脫，然后利用甲醇對洗脫得到的沉淀清洗5h，以除去沉淀中殘留的乙酸和未反應完的物質，再在70℃下真空干燥12h，備用；其中，第一洗脫液為乙酸和甲醇的混合溶液，乙酸和甲醇的體積比為2:8。

本實施例還提供了上述制備方法制得的分子印跡聚合物，其掃描電子顯微鏡下的形態(tài)如圖1所示，從圖1可以看出，分子印跡聚合物為圓形微球，表面粗糙且規(guī)則，其粒徑主要分布在2～3μm，適用于固相萃取材料。

本實施例還做過以下測試：以非分子印跡聚合物(NIP)為對照，NIP的制備方法同上，但在制備過程中不加入模板原料。分別稱取5mg分子印跡聚合物(MIP)和5mg非分子印跡聚合物(NIP)于兩個10mL的試管中，然后分別加入質量濃度為40％的同時含有三種苦參堿的標準溶液5mL，室溫下進行振蕩吸附2h，離心后取上清液過0.45μm濾膜，測定二者吸附后的溶液平衡濃度，計算平衡吸附量。

MIP和NIP對標準溶液的吸附效果如圖2所示，從圖2中可以看出，MIP對標準溶液的吸附量均高于NIP，說明MIP對三種苦參堿類藥物的吸附屬于類特異性吸附；同時還可以看出，MIP對結構類似的生物堿的吸附性能有一定的差異，各分析物在MIP上的吸附率順序為：氧化苦參堿>苦參堿>槐果堿。該結果為該分子印跡聚合物作為固相萃取的填料凈化、富集三種苦參堿類藥物提供了依據。

本實施例還提供了利用上述分子印跡聚合物萃取生物堿的方法，包括以下步驟：

a.稱取100mg分子印跡聚合物填裝到固相萃取的針筒柱中，然后依次用1mL預淋液淋洗、2mL甲醇活化澆淋以及2mL水活化澆淋，再往分子印跡聚合物上澆淋樣液，使樣液通過分子印跡聚合物；其中，預淋液為乙酸、甲醇的混合溶液，并且乙酸、甲醇的體積比為1:9，而樣液是保存了氧化苦參堿、苦參堿和槐果堿的乙腈；

b.利用1mL去離子水對針筒柱進行淋洗，然后用3.5mL體積濃度為25％的第二洗脫液對針筒柱進行洗脫，收集洗脫后的液體，吹干后溶解保存于1mL的乙腈中，用HPLC(高效液相色譜)測定；其中第二洗脫液為乙酸、甲醇的混合溶液，并且乙酸、甲醇的體積比為1:9。

本實施例按照上述萃取方法對砂生槐種子中的氧化苦參堿、苦參堿和槐果堿進行了凈化、富集，回收率結果如表1所示：

表1砂生槐植物種子中三種生物堿測定結果和回收率(n＝3)

另外，將其它實施例制得的分子印跡聚合物用于對生物堿進行萃取，獲得的萃取結果與上述試驗結果一致。

實施例二

本實施例提供的砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備方法，包括以下步驟：

a.將模板原料與甲苯、2-乙烯基吡啶混合，預聚合25min，然后加入三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、偶氮二異丁腈和乙腈，得到聚合物；

其中，模板原料、甲苯、2-乙烯基吡啶、三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、偶氮二異丁腈、乙腈的用量比為0.1mmol：30mL：0.4mmol：1.6mmol：12mg：20mL，模板原料包括苦參堿和氧化苦參堿，苦參堿與氧化苦參堿的摩爾比為0.8:1.2；

b.將聚合物裝入燒瓶中，往其中通入氦氣，脫氧5min，密封燒瓶，將燒瓶置于55℃的恒溫下，水浴振蕩反應20h，得到固體物料；

c.將固體物料研磨至粒徑為800目，利用體積濃度為10％的第一洗脫液進行反復洗脫，索氏提取洗脫后的上清液進行檢測，直至上清液中無模板原料檢出，停止洗脫，然后利用甲醇對洗脫得到的物質進行清洗，再進行干燥；其中，第一洗脫液為乙酸和甲醇的混合溶液，乙酸和甲醇的體積比為1:9。

本實施例還提供了利用上述制得的分子印跡聚合物萃取生物堿的方法，包括以下步驟：

a.將分子印跡聚合物填裝到固相萃取的針筒柱中，然后用水活化澆淋，再往分子印跡聚合物上澆淋樣液，使樣液通過分子印跡聚合物；其中，樣液是保存了氧化苦參堿、苦參堿和槐果堿的乙腈；

b.利用蒸餾水對針筒柱進行淋洗，然后用體積濃度為20％的第二洗脫液對針筒柱進行洗脫，收集洗脫后的液體，吹干后溶解保存于乙腈中，用HPLC(高效液相色譜)測定；其中第二洗脫液為乙酸、甲醇的混合溶液，并且乙酸、甲醇的體積比為1:9。

實施例三

本實施例提供的砂生槐三種生物堿同時提取的分子印跡聚合物的制備方法，包括以下步驟：

a.將模板原料與三氯甲烷、甲基丙烯酸混合，預聚合35min，然后依次加入二乙烯基苯和偶氮二異庚腈，得到聚合物；

其中，模板原料、三氯甲烷、甲基丙烯酸、二乙烯基苯、偶氮二異庚腈的用量比為0.1mmol：50mL：0.8mmol：2.4mmol：13.5mg，模板原料包括苦參堿和氧化苦參堿，苦參堿與氧化苦參堿的摩爾比為1.2:0.8；

b.將聚合物裝入燒瓶中，往其中通入氮氣，脫氧10min，密封燒瓶，將燒瓶置于65℃的恒溫下，水浴振蕩反應27h，得到白色懸浮液；

c.將白色懸浮液在1200rpm的轉速下離心處理5min，得到沉淀，利用體積濃度為20％的第一洗脫液對沉淀進行反復洗脫，直至除去模板原料，然后利用甲醇對洗脫得到的沉淀進行清洗，再在75℃下真空干燥10h，備用；其中，第一洗脫液為乙酸和甲醇的混合溶液，乙酸和甲醇的體積比為2:8。

本實施例還提供了利用上述制得的分子印跡聚合物萃取生物堿的方法，包括以下步驟：

a.將分子印跡聚合物填裝到固相萃取的針筒柱中，然后依次用預淋液淋洗、甲醇活化澆淋以及水活化澆淋，再往分子印跡聚合物上澆淋樣液，使樣液通過分子印跡聚合物；其中，預淋液為乙酸、甲醇的混合溶液，并且乙酸、甲醇的體積比為2:8，而樣液是保存了氧化苦參堿、苦參堿和槐果堿的乙腈；

b.利用去離子水對針筒柱進行淋洗，然后用體積濃度為30％的第二洗脫液對針筒柱進行洗脫，收集洗脫后的液體，吹干后溶解保存于乙腈中，用HPLC(高效液相色譜)測定；其中第二洗脫液為乙酸、甲醇的混合溶液，并且乙酸、甲醇的體積比為2:8。

以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對于本領域的技術人員來說，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內。