技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種高尿酸血癥肝細(xì)胞模型及其構(gòu)建方法。構(gòu)建方法包括如下步驟:(1)將處于對數(shù)生長期的肝細(xì)胞(LO2)經(jīng)胰蛋白酶消化后,制成細(xì)胞懸液,血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,將肝細(xì)胞稀釋為104?106個(gè)/mL,鋪板后,置于37?°C、5%(V/V)CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);(2)12?24?h后,取出孔板,加入用量為0.5?2?mmol/L的腺苷的溶液,繼續(xù)孵育12?24?h;(3)每孔中加入0.2?0.4?IU黃嘌呤氧化酶,繼續(xù)孵育12?24?h,即得到高尿酸血癥細(xì)胞模型。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明細(xì)胞鋪板最佳密度為106個(gè)/mL,誘導(dǎo)物腺苷最佳用量為1.5?mmol/L。得到的高尿酸血癥肝細(xì)胞模型可用于篩選降尿酸藥物,相對于高尿酸血癥動物模型操作簡單,所需時(shí)間較短,效率高。
技術(shù)研發(fā)人員:任嬌艷;劉丹
受保護(hù)的技術(shù)使用者:華南理工大學(xué)
文檔號碼:201610589030
技術(shù)研發(fā)日:2016.07.25
技術(shù)公布日:2016.12.07