一種治療高尿酸血癥的組合物及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于制藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體而言，涉及一種治療高尿酸血癥的組合物及其應(yīng)用。一種治療高尿酸血癥的組合物，其特征在于，包括向天果提取物；所述組合物由烏梅，虎杖，蒼術(shù)，向天果，紫葡萄，冬瓜子，海帶芽組成，其中，所述烏梅為10-20份，虎杖為50-70份，蒼術(shù)為12-35份，向天果為100-120份，紫葡萄為26-40份，冬瓜子為55-80份，海帶芽為10-20份。本發(fā)明的藥物組合物適用于高尿酸血癥或者通風(fēng)或者尿酸性腎病，特別適用于治療通風(fēng)高尿酸血癥。本發(fā)明的有益效果在于：1、通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，組合物有較好的降尿酸效果；2、采用中藥配伍的方法，使得在治療高尿酸血癥的同時(shí)，提高機(jī)體的免疫力，無毒副作用。
【專利說明】一種治療高尿酸血癥的組合物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于制藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體而言，涉及一種治療高尿酸血癥的組合物及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]向天果(學(xué)名Fructus Swietenia Macrophylla),屬于楝科植物,又名天仙果,源產(chǎn)于南太平洋所羅門群島，向天果樹高約30公尺至40公尺，因其果實(shí)向天生長(zhǎng)而得名，須經(jīng)15年生長(zhǎng)才能結(jié)果收成；向天果被譽(yù)為”植物之后”，可惜由于缺乏現(xiàn)代科學(xué)的科研與提練，多年來向天果實(shí)所蘊(yùn)含的價(jià)值未被全部開發(fā)及廣泛利用。
[0003]向天果有助于調(diào)節(jié)人體各器官之間的內(nèi)環(huán)境平衡，保障每個(gè)細(xì)胞的正?；顒?dòng)，促進(jìn)微循環(huán)系統(tǒng)的血液流量，提高人體免疫能力，確保人體器官組織功能操作健全，能增進(jìn)血液循環(huán)和防止血管阻塞，能夠幫助預(yù)防心臟病和中風(fēng)。對(duì)治療糖尿病，血壓高、過敏性疾病、內(nèi)分泌失調(diào)等有非常顯著的功效；
痛風(fēng)是長(zhǎng)期嘌呤代謝障礙、血尿酸增高引起的代謝性疾?。桓吣蛩嵫Y是痛風(fēng)的重要生化基礎(chǔ)，同時(shí)也成為許多疾病的危險(xiǎn)因素,如高尿酸血癥不僅能夠誘發(fā)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎,尿石癥、尿酸性腎病，而且血尿酸水平升高與脂質(zhì)代謝異常、肥胖等疾病密切相關(guān)。
[0004]近年隨著人們生 活方式的改變，高尿酸血癥和痛風(fēng)的患病率呈逐漸上升趨勢(shì)，多發(fā)于男性，并有年輕化的傾向，已成為城市人群的一種常見病、多發(fā)病。高尿酸血癥和痛風(fēng)常常與其他代謝性疾病如高血壓、冠心病、糖尿病等疾病同時(shí)發(fā)生，給人類健康帶來嚴(yán)重危害。有研究顯示，高尿酸血癥是動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素，心腦血管病伴發(fā)高尿酸血癥患者的病死率呈上升趨勢(shì)。
[0005]在臨床治療上，減少尿酸的再吸收，增加尿中尿酸的排泄量，是痛風(fēng)和高尿酸血癥治療過程中有效降低血尿酸濃度的有效方法之一。在人腎臟中，尿酸的重吸收過程主要依賴于膜上的特殊的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，即尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體I ( Urate Transporter I, URATI)。URATl是一種尿酸一陰離子交換體，負(fù)責(zé)腎小球?yàn)V過90%尿酸在近曲小管內(nèi)的重吸收。
[0006]目前，臨床常用的痛風(fēng)治療藥物中，苯溴馬龍對(duì)URATl的抑制效果最好，但由于其副作用較多，眾多國(guó)外制藥企業(yè)十分重視發(fā)現(xiàn)新的URATl抑制劑并投入了大量的人力物力，希望能從中發(fā)現(xiàn)效果更好，副作用更少的新的高尿酸血癥治療藥物。
[0007]因此，迫切需要一種植物藥組合，在不損害人體的生理機(jī)能的前提下，能夠有效治療高尿酸血癥和痛風(fēng)等癥狀。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種一種治療高尿酸血癥的組合物及其應(yīng)用。
[0009]一種治療高尿酸血癥的組合物，其特征在于，包括向天果提取物。
[0010]其中，所述組合物由烏梅，虎杖，蒼術(shù)，向天果，紫葡萄，冬瓜子，海帶芽組成，其中，所述烏梅為10-20份，虎杖為50-70份，蒼術(shù)為12-35份，向天果為100-120份，紫葡萄為26-40份，冬瓜子為55-80份，海帶芽為10-20份。
[0011]其中，所述烏梅為15-18份，虎杖為60-68份，蒼術(shù)為15-32份，向天果為110-118份，紫葡萄為30-38份，冬瓜子為65-77份，海帶芽為15-18份。
[0012]其中，包括藥學(xué)上可接受的載體組成。
[0013]其中，其特征在于口服制劑可以為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、滴丸、軟膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、納米乳、脂質(zhì)體。
[0014]本發(fā)明的向天果提取物適用于高尿酸血癥或者痛風(fēng)或者尿酸性腎病，特別適用于治療痛風(fēng)高尿酸血癥。
[0015]本發(fā)明的藥物組合物適用于高尿酸血癥或者痛風(fēng)或者尿酸性腎病，特別適用于治療痛風(fēng)高尿酸血癥。
[0016]本發(fā)明所述的藥物制備方法為:向天果提取物制備方法:將向天果果實(shí)粉碎，過20目篩，加入10倍質(zhì)量的水，在溫度為60-70°C之間提取3-5小時(shí)，得到提取液離心，除雜后，在溫度70°C以下濃縮至與原料等質(zhì)量，得到向天果提取物。
[0017]組合物的制備方法:將前述的原料按相應(yīng)的重量配比混合，先用清水清洗除雜，然后將其用等質(zhì)量的30-50°C的溫水浸泡l_3h，然后，加入原料重量3-5倍的水，在75_90°C提取3-5次，冷卻過濾后，在65°C以下濃縮成為與原料等質(zhì)量的流浸膏狀，搖勻密封，至于陰涼通風(fēng)處保存。上述浸膏可直接作藥用，也可用于如動(dòng)物降尿酸模型試驗(yàn)。
[0018]本發(fā)明所述的一種治療高尿酸血癥的組合物是針對(duì)高尿酸血癥和痛風(fēng)人群研制出的一款純植物提取物，內(nèi)含烏梅、冬瓜子、綠海藻、海帶芽、紫葡萄等多種天然堿性植物，食用后其內(nèi)含的濃縮植物精華可在人體代謝中生成生物堿，改善人體體液中的尿酸代謝，通過排尿和排便等新陳代謝將有害物質(zhì)排出體外，使您充滿活力、身體更健康。
[0019]組方中，烏梅含有枸櫞酸，蘋果酸等有機(jī)酸和揮發(fā)油，可幫助清掃血液，使血液流動(dòng)量正?；懦^量的酸素；虎杖含蒽醌類化合物，具有祛風(fēng)，利濕，破瘀，通經(jīng)的功效。蒼術(shù)具有燥濕健脾，祛風(fēng)濕的功效，可調(diào)整胃腸運(yùn)動(dòng)功能、抗?jié)?、保肝。主要有效成分是?br> 桉葉醇及茅術(shù)醇為代表的揮發(fā)油。向天果含有皂角苷、向天果含有黃酮、異黃酮及多種天然蛋白質(zhì)、維生素Α、B1、Β3、Β6、D、E及葉酸、鐵、鉀等人體必要營(yíng)養(yǎng)成份，且比例適當(dāng)，具有改善血液循環(huán)、清血、調(diào)補(bǔ)及提升免疫力等作用。紫葡萄中含的類黃酮是一種強(qiáng)力抗氧化劑，可清除體內(nèi)自由基，可去水腫，通利小便；冬瓜子是常見蔬菜冬瓜的種子，富含天然植物油脂和礦物質(zhì)，以及皂甙等物質(zhì)，有較好的利尿作用，現(xiàn)代藥理學(xué)證明冬瓜仁還能夠增強(qiáng)機(jī)體免疫力；海帶芽海帶芽含有大量的礦物質(zhì)、維生素、纖維素、鈣、鉀、碘，含有的褐藻酸可結(jié)合小腸內(nèi)多余的鈉排出體外，有助舒緩高血壓；另外含有墨角藻留醇能將多余的膽固醇排出體外。
[0020]本發(fā)明的有益效果在于:1、通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，組合物有較好的降尿酸效果；2、采用中藥配伍的方法，使得在治療高尿酸血癥的同時(shí)，提高機(jī)體的免疫力，無毒副作用。 【具體實(shí)施方式】
[0021 ] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，給出的實(shí)施例僅為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
[0022]下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的試驗(yàn)材料，如無特殊說明，均為自常規(guī)生化試劑商店購(gòu)買得到的。
[0023]實(shí)施例1:
在本實(shí)施例中，通過實(shí)驗(yàn)證明了向天果提取物在治療高尿酸血癥方面具有良好的效
果O
[0024]材料與方法
1.1測(cè)試化合物
名稱:向天果提取物
1.2向天果提取物溶液的配制
向天果提取物制備方法:將 向天果果實(shí)500g粉碎，過20目篩，加入10倍質(zhì)量的水，在溫度為65°C之間提取4小時(shí)，得到提取液離心，除雜后，在溫度70°C以下濃縮至與原料等質(zhì)量，得到向天果提取物。
[0025]首先，將向天果提取物81.1mg溶解在4055 μ L DPBS中，渦旋lmin、超聲lOmin，1000Orpm離心5min，得到濃度為20mg/mL的母液。然后用DPBS稀釋母液，分別至最終濃度含有0.06，0.2，0.6，2，6，20 mg/mL的向天果提取物溶液。
[0026]檢測(cè)系統(tǒng) 1.3.1材料
a.人藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體URATl基因穩(wěn)定表達(dá)HEK293細(xì)胞:Human Embryonic Kidney 293 cells(HEK293細(xì)胞)是源于組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)的人胚胎腎細(xì)胞的特定細(xì)胞系。以插入了人藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體URATl基因的哺乳類動(dòng)物表達(dá)pcDNA3.1載體轉(zhuǎn)染該細(xì)胞，并以geneticin篩選耐性細(xì)胞，進(jìn)而獲得細(xì)胞膜表面尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體穩(wěn)定高表達(dá)的細(xì)胞株。
[0027]b.培養(yǎng)基
含有 10% 胎牛血清(Lot N0.1227693，Invitrogen，s Gibco)的高糖 DMEM 培養(yǎng)基(LotN0.NYM1045, Hyclone)用于本研究的細(xì)胞培養(yǎng)。
[0028]c.胰酶
0.25% Trypsin-EDTA (IX) (Lot N0.1155732, InvitrogenJ s Gibco)
d.放射性標(biāo)記探針底物
Uric acid, [8-14C]- (Lot N0.742-107-0578-B-20121130-SBA, Moravek)
Glucose D, [14C (U)]- (Lot N0.120319，ARC)
e.緩沖溶液
Dulbecco，s Phosphate Buffered Saline, DPBS(Lot N0.070M8306, Sigma-Aldrich)
1.3.2實(shí)驗(yàn)步驟
a.HEK293單層細(xì)胞培養(yǎng)
胰酶消化后，藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體URATl基因表達(dá)細(xì)胞和藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體SGLT2基因表達(dá)細(xì)胞接種于賴氨酸包被24孔培養(yǎng)盤(Lot N0.20130801，CHI SCIENTIFIC)，細(xì)胞接種密度為IO5cell s/we 11，在37 °C、5% C02、飽和濕度的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2天。
[0029]b.放射性標(biāo)記探針底物濃度
制備濃度為60μΜ的Uric acid, [8_14C]-，然后與待測(cè)化合物等體積混合，使其最終濃度為 30μΜ。
[0030]制備濃度為60μΜ的Glucose D，[14C (U)],然后與待測(cè)化合物等體積混合，使其最終濃度為30μΜ。
[0031]c.非標(biāo)記化合物濃度
各種待測(cè)樣品(2X終濃度)，并與60 μΜ放射性標(biāo)記Uric acid, [8-14C]_和60μΜ的Glucose D，[14C (U)]等體積混合。向天果提取物的最終濃度為0.03,0.1,0.3、l、3、10mg/
mLo
[0032]d.細(xì)胞攝入試驗(yàn)
先移去培養(yǎng)板內(nèi)培養(yǎng)液，將培養(yǎng)細(xì)胞用DPBS清洗兩次，并在37° C DPBS緩沖液中溫浴lOmin，然后以500μL含放射性標(biāo)記的探針底物溶液置換DPBS開始藥物的細(xì)胞內(nèi)攝入；2min后，用冰浴DPBS緩沖液終止反應(yīng)，并清洗3次；然后各孔添加500μ1 0.lmol/L NaOH裂解細(xì)胞；提取裂解液于閃爍瓶中，添加3mL的閃爍液(Aquasol-2)，并用Tr1-Carb 2910TR液閃儀(PerkinElmer,Waltham, USA)測(cè)定樣品中的放射性強(qiáng)度。細(xì)胞攝入試驗(yàn)中每個(gè)濃度重復(fù)3次(n=3)。
[0033]結(jié)果分析
1.4.1抑制作用
將不含非放射性標(biāo)記的探針底物和待測(cè)化合物物的放射性標(biāo)記的探針底物的攝入活性定義為100% (control)，以 此為標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算各種化合物存在條件下的吸收百分比。
[0034]統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
Mean土standard error (SD)用 Microsoft? Excel 2010 軟件計(jì)算。每個(gè)數(shù)值代表一個(gè)實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)測(cè)定值的平均值。GraphPad Prism 5.0軟件用于繪制非線性回歸曲線圖，并計(jì)算化合物對(duì)藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體轉(zhuǎn)運(yùn)活性影響的IC5(I。
[0035]結(jié)果
向天果提取物對(duì)尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(hURATl)介導(dǎo)的14C-UrICACID轉(zhuǎn)運(yùn)活性的影響見表1，沒有添加抑制劑條件下，hURATl對(duì)14C-URIC ACID的攝入比例定義為100% (control)。不同濃度向天果提取物的添加，使hURATl介導(dǎo)的14C-URIC ACID攝入比例隨濃度的增加明顯下降，并具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
[0036]向天果提取物對(duì)尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(hURATl)介導(dǎo)的14C-URIC ACID轉(zhuǎn)運(yùn)活性影響非線性回歸曲線。橫軸為藥物濃度的對(duì)數(shù)，縱軸為control攝入活性的百分比。各濃度點(diǎn)與曲線呈良好的相關(guān)性(R2=0.9827)，由各濃度點(diǎn)計(jì)算得到A2對(duì)尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(hURATl)介導(dǎo)的14C-URIC ACID 的抑制作用 IC5Q=2.50mg/mL。
[0037]結(jié)論
試驗(yàn)結(jié)果顯示，向天果提取物對(duì)hURATl的轉(zhuǎn)運(yùn)活性有較好的抑制作用，IC5tl值為
2.50mg/mLo
[0038]表1.向天果提取物對(duì)尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體介導(dǎo)的14C-URIC ACID轉(zhuǎn)運(yùn)活性的影響(n=3)
【權(quán)利要求】
1.一種治療高尿酸血癥的組合物，其特征在于，包括向天果提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療高尿酸血癥的組合物，其特征在于，所述組合物由烏梅，虎杖，蒼術(shù)，向天果，紫葡萄，冬瓜子，海帶芽組成，其中，所述烏梅為10-20份，虎杖為50-70份，蒼術(shù)為12-35份，向天果為100-120份，紫葡萄為26-40份，冬瓜子為55-80份，海帶芽為10-20份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種降尿酸組合物，其特征在于，所述烏梅為15-18份，虎杖為60-68份，蒼術(shù)為15-32份，向天果為110-118份，紫葡萄為30-38份，冬瓜子為65-77份，海帶芽為15-18份。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療高尿酸血癥的組合物，其特征在于，包括藥學(xué)上可接受的載體組成。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述的降尿酸組合物，其特征在于口服制劑可以為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、滴丸、軟膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、納米乳、脂質(zhì)體。
6.一種如權(quán)利要求1所述的藥物組合物作為有效成分在治療高尿酸血癥或者通風(fēng)或者尿酸性腎病中的用途。
7.—種如權(quán)利要求2所述的藥物組合物作為有效成分在治療高尿酸血癥或者通風(fēng)或者尿酸性腎病 中的用途。
【文檔編號(hào)】A61K36/58GK104000878SQ201410238113
【公開日】2014年8月27日 申請(qǐng)日期:2014年5月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月30日
【發(fā)明者】金鑫 申請(qǐng)人:金鑫