1.一種檢測公雞慢羽突變基因型的方法,其特征在于,包括以下步驟:
S1.抽取被檢測個體的血樣DNA,并且將之稀釋至40~100nmol/μL;
S2.實時熒光定量PCR:熒光定量PCR儀的型號為美國Bio-rad CFX96;熒光定量試劑為Bio-rad SYBR Green熒光定量PCR Mix;熒光定量引物序列如SEQ ID NO:1~4所示;
S3.計算被檢個體的△Ct值,根據(jù)△Ct判定個體的基因型,當(dāng)△Ct>1.5時為雜合子,0.3<△Ct<1.3為純合子,1.5≥△Ct≥1.3時淘汰。
2.根據(jù)權(quán)利要求1以所述的方法,其特征在于,S2中熒光定量PCR擴增體系如下:PCR MIX:10μL、雙蒸水: 7.6μL、DNA模板:2μL、上游引物:0.2μL、下游引物:0.2μL;擴增程序如下:94℃變性5s;94℃、5s,58℃、5s,72℃、5s,循環(huán)32次;72℃延伸10min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于,S1中將之稀釋至80 nmol/μL。