本發(fā)明涉及一種胞磷膽堿鈉的制備方法，屬于生物制藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

胞磷膽堿鈉，又稱胞二磷膽堿鈉，是腦代謝激活劑，作為內(nèi)源性合成磷脂酰膽堿的中間體可促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞膜磷脂的合成，磷脂也是構(gòu)建生物膜的重要成分。中樞神經(jīng)損傷后，胞磷膽堿鈉參與修復(fù)和再生，起神經(jīng)保護(hù)作用，在神經(jīng)介質(zhì)的轉(zhuǎn)移和生物電的傳導(dǎo)中也起著重要作用。胞磷膽堿鈉在臨床上主要用于頭部外傷及腦術(shù)后伴有意識(shí)障礙、腦梗塞急性意識(shí)障礙、促進(jìn)腦卒中偏癱患者上肢功能恢復(fù)及急性胰腺炎等病癥，對(duì)急性中風(fēng)、外科手術(shù)后引起的神經(jīng)損傷、意識(shí)障礙，對(duì)帕金森綜合癥、癡呆癥、青光眼等有明顯的臨床治療效果。胞磷膽堿鈉為目前臨床用量最大的神經(jīng)激活劑，具有以下臨床用途：（1）降低腦血管阻力，增加腦血流，促進(jìn)腦物質(zhì)代謝，改善腦循環(huán)；（2）增強(qiáng)腦干網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的機(jī)能，增強(qiáng)椎體系統(tǒng)機(jī)能，改善運(yùn)動(dòng)麻痹，促進(jìn)卵磷脂合成，改善腦代謝，可與腦多肽合用，對(duì)改善腦功能有協(xié)同作用；（3）主要適用癥為急性顱腦外科及腦手術(shù)后意識(shí)障礙；（4）臨床上還用于其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)急性損傷引起的功能和意識(shí)障礙、震顫麻痹、耳鳴和神經(jīng)性耳聾、安眠藥中毒等；（5）近年來臨床上廣泛用于缺血性腦中風(fēng)、腦動(dòng)脈硬化、多梗塞性癡呆、老年癡呆癥、小兒病毒性腦炎等。目前制備胞磷膽堿鈉的方法有： ①化學(xué)合成，利用CMP(5′-胞苷酸)和磷酸膽堿作為反應(yīng)物，對(duì)-甲苯磺酰氯作為縮合劑，在N-二甲基甲酰胺存在下進(jìn)行縮合制備，用717(Cl-)型陰離子交換柱和711(Cl-)型濃縮柱分離液酒精沉淀制備胞磷膽堿鈉，其缺點(diǎn)是難與縮合劑分離，產(chǎn)品不適合藥用；②酶促合成，抽提細(xì)胞液用胞苷三磷酸(CTP)和磷酸膽堿生物合成胞磷膽堿鈉，酶和細(xì)胞抽提液合成需要底物CTP，合成價(jià)格高； ③游離細(xì)胞和酵母無細(xì)胞抽提液合成胞磷膽堿鈉，游離酵母合成需要大量酵母，且只能一次性使用，具有很多缺點(diǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題：針對(duì)目前化學(xué)合成胞磷膽堿鈉中產(chǎn)品難與縮合劑分離，導(dǎo)致的產(chǎn)品不適合藥用的問題，提供了一種胞磷膽堿鈉的制備方法，本發(fā)明以氯化磷酸膽堿鈣鹽為原料，首先通過與苯進(jìn)行二元共沸除去氯化磷酸膽堿鈣鹽中的結(jié)晶水，然后再將氯化磷酸膽堿鈣鹽與碳酸鈉反應(yīng)，生成碳酸鈣沉淀，過濾，得到粘稠物，將粘稠物與乙酰氯進(jìn)行反應(yīng)，產(chǎn)物再與胞苷酸反應(yīng)，減壓蒸餾得到殘余物，最后用氫氧化鈉、乙醇進(jìn)行結(jié)晶和重結(jié)晶得到產(chǎn)物，本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，乙酰氯加水后容易除去，并且溶劑全部可以回收利用，更環(huán)保，經(jīng)濟(jì)效益更高，本發(fā)明產(chǎn)品純度高，達(dá)到了98%以上，適合藥用。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下所述的技術(shù)方案是：

（1）量取200～300mL苯加入到帶有分流器和溫度計(jì)的三口燒瓶中，置于油浴中，向三口燒瓶中加入10～20g氯化磷酸膽堿鈣鹽，控制油浴溫度在120～130℃，磁力攪拌30～40min，得到氯化磷酸膽堿鈣鹽苯混合液；

（2）向上述氯化磷酸膽堿鈣鹽苯混合液中加入100～200mL0.5mol/L碳酸鈉溶液，磁力攪拌反應(yīng)2～3h，產(chǎn)生白色沉淀，過濾，將濾液進(jìn)行減壓蒸餾，得到粘稠物；

（3）將上述粘稠物加入到裝有溫度計(jì)和回流冷凝裝置的三口燒瓶中，并置于油浴中，向三口燒瓶中依次加入300～400mL四氫呋喃、3～5g乙酰氯，控制油浴溫度在75～85℃，磁力攪拌反應(yīng)2～3h，再向反應(yīng)液中加入8～12g胞苷酸，攪拌反應(yīng)5～6h，得到混合液；

（4）將上述混合液倒入燒杯中，向混合液中加入100～200mL去離子水，攪拌10～20min，靜置，分層，用分液漏斗進(jìn)行分液，得有機(jī)相，將有機(jī)相進(jìn)行減壓蒸餾，得到殘余物；

（5）將上述殘余物加入到燒杯中，再加入200～300mL質(zhì)量濃度為20%NaOH溶液，置于水浴鍋中，控制溫度在80～90℃，向燒杯中加入10～20g活性炭，攪拌20～30min，過濾，得濾液，將濾液加入到盛有400～500mL質(zhì)量濃度為95%乙醇溶液的燒杯中，攪拌1～2h，靜置14～16h，使固體全部析出，離心分離，得到粗品；

（6）將上述粗品加入到盛有200～300mL質(zhì)量濃度為20%NaOH溶液的燒杯中，置于水浴鍋中，水浴控制溫度在80～90℃，再向燒杯中加入500～600mL質(zhì)量濃度為95%乙醇，攪拌1～2h，靜置14～16h，使固體全部析出，離心分離，得沉淀物，經(jīng)干燥，磨碎，得到胞磷膽堿鈉產(chǎn)品。

本發(fā)明的應(yīng)用方法：稱取0.3～0.5g本發(fā)明制得的胞磷膽堿鈉加入到醫(yī)用吊瓶中，向吊瓶中加入100～200mL質(zhì)量濃度為5%～10%葡萄糖，攪拌使胞磷膽堿鈉溶解，然后滴注到人體，每5～7天為一個(gè)療程，2～4個(gè)療程即可痊愈，主要用來治療急性顱腦外傷及腦手術(shù)后的意識(shí)障礙。

本發(fā)明與其他方法相比，有益技術(shù)效果是：

（1）本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，乙酰氯加水后容易除去，并且溶劑全部可以回收利用，更環(huán)保，經(jīng)濟(jì)效益更高，本發(fā)明產(chǎn)品純度高，并且可以適合藥用；

（2）有效地解決了化學(xué)合成胞磷膽堿鈉中產(chǎn)品難與縮合劑分離，導(dǎo)致的產(chǎn)品不適合藥用的問題。

具體實(shí)施方式

首先量取200～300mL苯加入到帶有分流器和溫度計(jì)的三口燒瓶中，置于油浴中，向三口燒瓶中加入10～20g氯化磷酸膽堿鈣鹽，控制油浴溫度在120～130℃，磁力攪拌30～40min，得到氯化磷酸膽堿鈣鹽苯混合液；向上述氯化磷酸膽堿鈣鹽苯混合液中加入100～200mL0.5mol/L碳酸鈉溶液，磁力攪拌反應(yīng)2～3h，產(chǎn)生白色沉淀，過濾，將濾液進(jìn)行減壓蒸餾，得到粘稠物；將上述粘稠物加入到裝有溫度計(jì)和回流冷凝裝置的三口燒瓶中，并置于油浴中，向三口燒瓶中依次加入300～400mL四氫呋喃、3～5g乙酰氯，控制油浴溫度在75～85℃，磁力攪拌反應(yīng)2～3h，再向反應(yīng)液中加入8～12g胞苷酸，攪拌反應(yīng)5～6h，得到混合液；將上述混合液倒入燒杯中，向混合液中加入100～200mL去離子水，攪拌10～20min，靜置，分層，用分液漏斗進(jìn)行分液，得有機(jī)相，將有機(jī)相進(jìn)行減壓蒸餾，得到殘余物；將上述殘余物加入到燒杯中，再加入200～300mL質(zhì)量濃度為20%NaOH溶液，置于水浴鍋中，控制溫度在80～90℃，向燒杯中加入10～20g活性炭，攪拌20～30min，過濾，得濾液，將濾液加入到盛有400～500mL質(zhì)量濃度為95%乙醇溶液的燒杯中，攪拌1～2h，靜置14～16h，使固體全部析出，離心分離，得到粗品；將上述粗品加入到盛有200～300mL質(zhì)量濃度為20%NaOH溶液的燒杯中，置于水浴鍋中，水浴控制溫度在80～90℃，再向燒杯中加入500～600mL質(zhì)量濃度為95%乙醇，攪拌1～2h，靜置14～16h，使固體全部析出，離心分離，得沉淀物，經(jīng)干燥，磨碎，得到胞磷膽堿鈉產(chǎn)品。

實(shí)例1

首先量取200mL苯加入到帶有分流器和溫度計(jì)的三口燒瓶中，置于油浴中，向三口燒瓶中加入10g氯化磷酸膽堿鈣鹽，控制油浴溫度在120℃，磁力攪拌30min，得到氯化磷酸膽堿鈣鹽苯混合液；向上述氯化磷酸膽堿鈣鹽苯混合液中加入100mL0.5mol/L碳酸鈉溶液，磁力攪拌反應(yīng)2h，產(chǎn)生白色沉淀，過濾，將濾液進(jìn)行減壓蒸餾，得到粘稠物；將上述粘稠物加入到裝有溫度計(jì)和回流冷凝裝置的三口燒瓶中，并置于油浴中，向三口燒瓶中依次加入300mL四氫呋喃、3g乙酰氯，控制油浴溫度在75℃，磁力攪拌反應(yīng)2h，再向反應(yīng)液中加入8g胞苷酸，攪拌反應(yīng)5h，得到混合液；將上述混合液倒入燒杯中，向混合液中加入100mL去離子水，攪拌10min，靜置，分層，用分液漏斗進(jìn)行分液，得有機(jī)相，將有機(jī)相進(jìn)行減壓蒸餾，得到殘余物；將上述殘余物加入到燒杯中，再加入200mL質(zhì)量濃度為20%NaOH溶液，置于水浴鍋中，控制溫度在80℃，向燒杯中加入10g活性炭，攪拌20min，過濾，得濾液，將濾液加入到盛有400mL質(zhì)量濃度為95%乙醇溶液的燒杯中，攪拌1h，靜置14h，使固體全部析出，離心分離，得到粗品；將上述粗品加入到盛有200mL質(zhì)量濃度為20%NaOH溶液的燒杯中，置于水浴鍋中，水浴控制溫度在80℃，再向燒杯中加入500mL質(zhì)量濃度為95%乙醇，攪拌1h，靜置14h，使固體全部析出，離心分離，得沉淀物，經(jīng)干燥，磨碎，得到胞磷膽堿鈉產(chǎn)品。

稱取0.3g本發(fā)明制得的胞磷膽堿鈉加入到醫(yī)用吊瓶中，向吊瓶中加入100mL質(zhì)量濃度為5%葡萄糖，攪拌使胞磷膽堿鈉溶解，然后滴注到人體，每5天為一個(gè)療程，4個(gè)療程即可痊愈，主要用來治療急性顱腦外傷及腦手術(shù)后的意識(shí)障礙。

實(shí)例2

首先量取250mL苯加入到帶有分流器和溫度計(jì)的三口燒瓶中，置于油浴中，向三口燒瓶中加入15g氯化磷酸膽堿鈣鹽，控制油浴溫度在125℃，磁力攪拌35min，得到氯化磷酸膽堿鈣鹽苯混合液；向上述氯化磷酸膽堿鈣鹽苯混合液中加入150mL0.5mol/L碳酸鈉溶液，磁力攪拌反應(yīng)2.5h，產(chǎn)生白色沉淀，過濾，將濾液進(jìn)行減壓蒸餾，得到粘稠物；將上述粘稠物加入到裝有溫度計(jì)和回流冷凝裝置的三口燒瓶中，并置于油浴中，向三口燒瓶中依次加入350mL四氫呋喃、4g乙酰氯，控制油浴溫度在80℃，磁力攪拌反應(yīng)2.5h，再向反應(yīng)液中加入10g胞苷酸，攪拌反應(yīng)5.5h，得到混合液；將上述混合液倒入燒杯中，向混合液中加入150mL去離子水，攪拌15min，靜置，分層，用分液漏斗進(jìn)行分液，得有機(jī)相，將有機(jī)相進(jìn)行減壓蒸餾，得到殘余物；將上述殘余物加入到燒杯中，再加入250mL質(zhì)量濃度為20%NaOH溶液，置于水浴鍋中，控制溫度在85℃，向燒杯中加入15g活性炭，攪拌25min，過濾，得濾液，將濾液加入到盛有450mL質(zhì)量濃度為95%乙醇溶液的燒杯中，攪拌1.5h，靜置15h，使固體全部析出，離心分離，得到粗品；將上述粗品加入到盛有250mL質(zhì)量濃度為20%NaOH溶液的燒杯中，置于水浴鍋中，水浴控制溫度在85℃，再向燒杯中加入550mL質(zhì)量濃度為95%乙醇，攪拌1.5h，靜置15h，使固體全部析出，離心分離，得沉淀物，經(jīng)干燥，磨碎，得到胞磷膽堿鈉產(chǎn)品。

稱取0.4g本發(fā)明制得的胞磷膽堿鈉加入到醫(yī)用吊瓶中，向吊瓶中加入150mL質(zhì)量濃度為8%葡萄糖，攪拌使胞磷膽堿鈉溶解，然后滴注到人體，6天為一個(gè)療程，3個(gè)療程即可痊愈，主要用來治療急性顱腦外傷及腦手術(shù)后的意識(shí)障礙。

實(shí)例3

首先量取300mL苯加入到帶有分流器和溫度計(jì)的三口燒瓶中，置于油浴中，向三口燒瓶中加入20g氯化磷酸膽堿鈣鹽，控制油浴溫度在130℃，磁力攪拌40min，得到氯化磷酸膽堿鈣鹽苯混合液；向上述氯化磷酸膽堿鈣鹽苯混合液中加入200mL0.5mol/L碳酸鈉溶液，磁力攪拌反應(yīng)3h，產(chǎn)生白色沉淀，過濾，將濾液進(jìn)行減壓蒸餾，得到粘稠物；將上述粘稠物加入到裝有溫度計(jì)和回流冷凝裝置的三口燒瓶中，并置于油浴中，向三口燒瓶中依次加入400mL四氫呋喃、5g乙酰氯，控制油浴溫度在85℃，磁力攪拌反應(yīng)3h，再向反應(yīng)液中加入12g胞苷酸，攪拌反應(yīng)6h，得到混合液；將上述混合液倒入燒杯中，向混合液中加入200mL去離子水，攪拌20min，靜置，分層，用分液漏斗進(jìn)行分液，得有機(jī)相，將有機(jī)相進(jìn)行減壓蒸餾，得到殘余物；將上述殘余物加入到燒杯中，再加入300mL質(zhì)量濃度為20%NaOH溶液，置于水浴鍋中，控制溫度在90℃，向燒杯中加入20g活性炭，攪拌30min，過濾，得濾液，將濾液加入到盛有500mL質(zhì)量濃度為95%乙醇溶液的燒杯中，攪拌2h，靜置16h，使固體全部析出，離心分離，得到粗品；將上述粗品加入到盛有300mL質(zhì)量濃度為20%NaOH溶液的燒杯中，置于水浴鍋中，水浴控制溫度在90℃，再向燒杯中加入600mL質(zhì)量濃度為95%乙醇，攪拌2h，靜置16h，使固體全部析出，離心分離，得沉淀物，經(jīng)干燥，磨碎，得到胞磷膽堿鈉產(chǎn)品。

稱取0.5g本發(fā)明制得的胞磷膽堿鈉加入到醫(yī)用吊瓶中，向吊瓶中加入200mL質(zhì)量濃度為10%葡萄糖，攪拌使胞磷膽堿鈉溶解，然后滴注到人體，每7天為一個(gè)療程，2個(gè)療程即可痊愈，主要用來治療急性顱腦外傷及腦手術(shù)后的意識(shí)障礙。