本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種四氫噻喃并嘧啶類衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽、酯或前藥，本發(fā)明還涉及這類衍生物的制備方法及其在制備抗人免疫缺陷病毒(HIV)藥物中的用途。
背景技術(shù)：
艾滋病(AIDS)是一種嚴(yán)重危害人類健康的重大傳染性疾病，每年造成上百萬人的死亡。雖然目前已有多種抗艾滋病單體或者復(fù)方制劑上市，但是這些藥物只能將HIV病毒限制在可檢測范圍以下，而不能徹底的從人體內(nèi)清除，因此AIDS感染者需要終生服藥。但是，現(xiàn)有HIV藥物的長期服用會導(dǎo)致嚴(yán)重的毒副作用和耐藥性的出現(xiàn)，因此急需開發(fā)新型抗HIV藥物。逆轉(zhuǎn)錄酶作為HIV病毒生命周期中的關(guān)鍵酶，在HIV病毒復(fù)制過程中發(fā)揮著重要的作用。已報道的逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑主要分為兩類：核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTIs)和非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTIs)，NNRTIs由于具有高效低毒的特點而受到人們的廣泛關(guān)注。但是由于HIV病毒復(fù)制過程中缺乏校正的特點，HIV病毒極易發(fā)生突變而產(chǎn)生耐藥，因此開發(fā)新型抗耐藥的NNRTIs是目前抗艾滋病藥物研究的重要方向之一。
二芳基嘧啶類(DAPY)NNRTIs是一類高效、低毒、抗耐藥的HIV-1抑制劑，目前已有依曲韋林和利匹韋林兩種藥物上市。但是由于該類化合物水溶性較差，導(dǎo)致其口服生物利用度低，大大限制了其臨床應(yīng)用。因此開發(fā)活性更好、抗耐藥性更強、口服生物利用度更高并且具有自主知識產(chǎn)權(quán)的抗HIV-1藥物具有重要的意義。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種四氫噻喃并嘧啶類衍生物及其制備方法，本發(fā)明還提供了四氫噻喃并嘧啶類衍生物作為HIV-1抑制劑的應(yīng)用。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
1.四氫噻喃并嘧啶類衍生物
一種四氫噻喃并嘧啶類衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥，具有通式I或II所示的結(jié)構(gòu)：
其中A為S(＝O)n或CH2；B為S(＝O)n或CH2，并且A和B不能同時為S(＝O)n；n＝0,1或2；
X為O或NH；
R1、R2、R3各自獨立的為：H、鹵素、氰基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C2-C6烯基、三氟甲基、氨基、羥基、氰基乙烯基、氰基乙基或環(huán)丙基；
Ar為：取代苯環(huán)、取代萘環(huán)、各種取代的六元雜環(huán)、各種取代的五元雜環(huán)、各種取代的六元并五元雜環(huán)、各種取代的六元并六元雜環(huán)、各種取代的五元并五元雜環(huán)、各種取代的苯并五元雜環(huán)或各種取代的苯并六元雜環(huán)。
根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，
R1、R3為甲基，R2為CN、Me或CH＝CHCN；Ar為具有通式(a)或者通式(b)的取代苯環(huán)：
其中，R4為H、CN、Me、COR5、COOR5、CONH2、CONHR5、SO2R5、SO2NH2、SO2NHR5、NO2、NH2、NHR5、NHCOR5或NHSO2R5；R5為C1-C10烷烴、環(huán)烷烴、鹵代烷烴、烯烴或芳香烴。優(yōu)選的，R5為Me或CH3CO。
本發(fā)明中所述的“藥學(xué)上可接受的鹽”是指在可靠的醫(yī)藥評價范圍內(nèi)，化合物的鹽類適于與人或較低等動物的組織相接觸而無不適當(dāng)?shù)亩拘?、刺激及過敏反應(yīng)等，具有相當(dāng)合理的收益/風(fēng)險比例，通常是水或油可溶的或可分散的，并可有效地用于其預(yù)期的用途。包括藥學(xué)上可接受的酸加成鹽和藥學(xué)上可接受的堿加成鹽，在這里是可做預(yù)期的用途并與式I化合物的化學(xué)性質(zhì)相容的。適宜的鹽的列表參見S.M.Birge等，J.Pharm.Sci.,1977,66,1-19頁。
本發(fā)明中所述的“前藥”是指藥學(xué)上可接受的衍生物，以便這些衍生物所得的生物轉(zhuǎn)換產(chǎn)物是如式I化合物所定義的活性藥物。
根據(jù)本發(fā)明進一步優(yōu)選的，四氫噻喃并嘧啶類化合物為具有下列結(jié)構(gòu)式的化合物之一：
其中，R1、R2、R3、R4如通式I或II所示。
更進一步優(yōu)選的，四氫噻喃并嘧啶類衍生物為如下具體化合物之一：
2.四氫噻喃并嘧啶類衍生物的制備方法
四氫噻喃并嘧啶衍生物的制備方法，以巰基乙酸甲酯(A)和4-氯丁酸甲酯(B)為原料，在甲醇鈉的條件下反應(yīng)得到4-((2-甲氧基-2-氧代乙基)硫)丁酸甲酯(C)，中間體C在甲醇鈉條件下經(jīng)Dieckmann縮合得到氧代四氫噻喃甲酸酯(D)，中間體D與甲基異硫脲在氫氧化鉀條件下環(huán)合得到2-甲巰基四氫噻喃并嘧啶-2-醇(E)，中間體E在醋酸條件下水解得到四氫噻喃并嘧啶-2,4-二醇(F)，中間體F在三氯氧磷中以N,N-二甲基苯胺為堿氯化得到2,4-二氯四氫噻喃并嘧啶(G)，中間體G在堿性條件下與取代苯酚或苯胺反應(yīng)得到中間體H，中間體H與相應(yīng)的取代苯胺反應(yīng)得到目標(biāo)化合物；或與1-Boc-4-氨基哌啶反應(yīng)，脫去Boc保護之后與相應(yīng)的氯芐或溴芐反應(yīng)得到目標(biāo)化合物。
合成路線如下：
試劑和條件：(i)甲醇鈉，碘化鉀，甲醇，回流；(ii)甲醇鈉，甲苯，105℃；(iii)甲基異硫脲硫酸鹽，氫氧化鉀，甲醇；(iv)醋酸/水，110℃；(v)三氯氧磷，N,N-二甲基苯胺，90℃；(vi)碳酸鉀，N,N-二甲基甲酰胺，取代苯酚或苯胺；(vii)a)1-Boc-4-氨基哌啶，N,N-二異丙基乙胺，N-甲基吡咯烷酮，120-130℃；b)三氟乙酸/二氯甲烷，室溫；c)取代溴芐或氯芐，碳酸鉀，N,N-二甲基甲酰胺，室溫；(viii)1-取代-4-氨基哌啶，N,N-二異丙基乙胺，N-甲基吡咯烷酮，120-130℃；(ix)4-氨基苯甲腈，2,2'-雙-(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘，三(二亞芐基丙酮)二鈀，1,4-二氧六環(huán)。
所述的取代苯酚或苯胺為均三甲基苯酚、2,6-二甲基-4-氰基苯酚、(E)-2,6-二甲基-4-氰基乙烯基苯酚、均三甲基苯胺、2,6-二甲基-4-氰基苯胺或(E)-2,6-二甲基-4-氰基乙烯基苯胺。
所述的取代溴芐或氯芐為鄰氯氯芐、間氯氯芐、對氯氯芐、鄰溴溴芐、間溴溴芐、對溴溴芐、鄰氟氯芐、間氟氯芐、對氟氯芐、2,4-二氟溴芐、3,4-二氟溴芐、鄰氰基氯芐、間氰基氯芐、對氰基氯芐、鄰硝基氯芐、間硝基氯芐、對硝基氯芐、鄰甲氧基氯芐、間甲氧基氯芐、對甲氧基氯芐、對甲磺?；迤S、對磺酰胺基溴芐、間磺酰胺基溴芐、對甲酰胺基溴芐、4-溴甲基苯甲酸乙酯、4-溴甲基苯甲酸酰胺、3-溴甲基苯甲酸酰胺、N-(4-溴甲基苯基)甲磺酰胺。
其中，R1、R2、R3、A、B、X的定義同上通式I或II所述。
本發(fā)明所述的室溫為20-30℃。
3.四氫噻喃并嘧啶類衍生物的抗HIV-1野生株及突變株活性及應(yīng)用
對按照上述方法合成的部分四氫噻喃并嘧啶類衍生物進行了細胞水平的抗HIV-1(IIIB)，單耐藥突變株L100I、K103N、Y181C、Y188L以及雙耐藥突變株RES056(K103N/Y181C)、F227L/V106A的活性篩選。經(jīng)過實驗得出：本發(fā)明的四氫噻喃并嘧啶衍生物是一系列具有新穎骨架的非核苷類HIV-1抑制劑，表現(xiàn)出了極強的抗HIV-1野生株和突變株活性。因此，四氫噻喃并嘧啶類化合物具有進一步研發(fā)的價值，可作為抗HIV-1的先導(dǎo)化合物加以利用。
本發(fā)明的四氫噻喃并嘧啶衍生物可作為非核苷類HIV-1抑制劑應(yīng)用。具體地說，作為HIV-1抑制劑用于制備抗艾滋病藥物。
一種抗HIV-1藥物組合物，包括本發(fā)明的四氫噻喃并嘧啶衍生物和一種或多種藥學(xué)上可接受載體或賦形劑。
本發(fā)明提供了結(jié)構(gòu)全新的四氫噻喃并嘧啶類衍生物、其制備方法、其抗HIV-1活性篩選結(jié)果及其在抗病毒領(lǐng)域中的首次應(yīng)用。經(jīng)實驗證明，本發(fā)明的四氫噻喃并嘧啶類衍生物可作為HIV-1抑制劑應(yīng)用，并具有很高的應(yīng)用價值。具體地說，作為HIV-1抑制劑用于制備抗艾滋病藥物。
具體實施方式
通過下述實例有助于理解本發(fā)明，但不能限制本發(fā)明的內(nèi)容。
實施例中所涉及的合成路線如下：
合成路線一：
實施例1:母環(huán)2,6-二氯-7,8-二氫-6H-噻喃[3,2-d]嘧啶(7)的制備
4-((2-甲氧基-2-氧代乙基)硫)丁酸甲酯(3)的制備。
巰基乙酸甲酯(3.93mL,44mmol)溶于甲醇鈉(2.75g,51mmol)的甲醇(30mL)溶液，攪拌0.5h，加入碘化鉀(50mg)和4-氯丁酸甲酯(6.2mL,51mmol)升溫至65℃，反應(yīng)20h。反應(yīng)液冷卻，過濾后濃縮，加二氯甲烷(100mL)后用水洗(20mL×3)，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾濃縮得淺黃色液體2-甲氧基2-氧代乙硫基丁酸甲酯(8.24g)。中間體無需純化直接進行下一步。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:3.75(s,3H),3.66(s,3H),3.21(s,2H),2.77(t,J＝7.2Hz,2H),2.66(t,J＝7.2Hz,2H),1.93(p,J＝7.2Hz,2H).ESI-MS:m/z 207.3(M+1)+,224.4(M+18)+.C8H14O4S(206.06).
3-氧代四氫-2H-噻喃-2-甲酸甲酯(4)的制備
中間體3(5g,24.3mmol)溶于甲苯(40mL)中，室溫攪拌下加入甲醇鈉(1.43g,26.5mmol)，升溫至105℃反應(yīng)3h。冷卻，反應(yīng)液倒入冷卻的12N HCl(5mL)中，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾濃縮后硅膠柱色譜分離得淺黃色液體(1.93g)。
產(chǎn)率45.8％，1H NMR(CDCl3)δ:12.18(1H,s),2.79-2.83(2H,m),2.42(2H,t,J＝6.6Hz),2.10-2.17(2H,m).ESI-MS:m/z 175.3(M+1)+,192.5(M+18)+.C7H10O3S(174.04).
2-甲巰基-7,8-二氫-6H-噻喃[3,2-d]嘧啶-2-醇(5)的制備
氫氧化鉀(0.57g,10.76mmol)溶于甲醇(30mL)中，加入中間體4a(1.25g,7.17mmol)和甲基異硫脲硫酸鹽(1g,3.58mmol)，室溫攪拌16h。反應(yīng)完成后將反應(yīng)液倒入冰水中(40mL)，加醋酸2mL后過濾，收集沉淀，干燥后得白色固體，反應(yīng)無需純化繼續(xù)進行下一步。
熔點：234-236℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.70(s,1H),2.94-2.84(m,2H),2.61(t,J＝6.3Hz,2H),2.45(s,3H),2.08-1.95(m,2H).ESI-MS:m/z 215.4(M+1)+,237.3(M+23)+.C8H10N2OS2(214.02).
7,8-二氫-6H-噻喃[3,2-d]嘧啶-2,4-二醇(6)的制備
中間體5(1.05g)懸浮于10mL水中，加醋酸20mL后反應(yīng)液在110℃回流反應(yīng)3天。反應(yīng)液冷卻，過濾，水洗得無色晶體(0.5g)。
兩步產(chǎn)率37.7％，熔點：>300℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.17(s,1H),10.82(s,1H),2.84(d,J＝6.0Hz,2H),2.43(t,J＝6.3Hz,2H),2.04-1.91(m,2H).ESI-MS:m/z 185.0(M+1)+,207.2(M+23)+.C7H8N2O2S(184.03).
2,4-二氯-7,8-二氫-6H-噻喃[3,2-d]嘧啶(7)的制備
中間體6(0.42g,2.3mmol)溶于三氯氧磷(2mL)中，加入N,N-二甲基苯胺(70μL)后升溫至90℃反應(yīng)18小時。冷卻至室溫后倒入50mL冰水中，二氯甲烷萃取(30mL×3)，合并有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾后濃縮，硅膠柱色譜分離，得淺灰色固體(0.35g)。
產(chǎn)率69.4％，熔點：105-108℃，1H NMR(CDCl3)δ:3.09-3.13(2H,m),2.99(2H,t,J＝6.3Hz),2.21-2.28(2H,m).ESI-MS:m/z 221.3(M+1)+.C7H6Cl2N2S(219.96).
合成路線二：
實施例2:4-((2-氯-7,8-二氫-6H-噻喃[3,2-d]嘧啶-4-基)氧)-3,5-二甲基苯甲腈(8a)的制備
中間體7(0.5g,2.26mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸鉀(0.38g,2.71mmol)和3,5-二甲基-4-羥基苯甲腈(0.40g,2.71mmol)，室溫攪拌過夜。過濾，蒸干后加二氯甲烷溶解，水洗三次，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾后蒸干乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶得淺灰色粉末(0.54g)。
產(chǎn)率72.5％，熔點：176-179℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.73(s,2H),3.16(d,J＝5.6Hz,2H),2.92(t,J＝6.2Hz,2H),2.23-2.13(m,2H),2.07(s,6H).ESI-MS:m/z 332.4(M+1)+.C16H14ClN3OS(331.05).
2-氯-4-(2,4,6-三甲基苯基)-7,8-二氫-6H-噻喃[3,2-d]嘧啶(8b)的制備
操作步驟同8a，所不同的是起始原料用的是2,4,6-三甲基苯酚代替3,5-二甲基-4-羥基苯甲腈。
淺灰色粉末(0.48g)，產(chǎn)率66.6％，熔點：254-255℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.05(s,2H),3.04-2.93(m,2H),2.66(t,J＝6.1Hz,2H),2.24(s,3H),2.09(dt,J＝12.1,6.1Hz,2H),1.98(s,6H).ESI-MS:m/z 321.4(M+1)+.C16H17ClN2OS(320.08).
E-3-(4-((2-氯-7,8-二氫-6H-噻喃[3,2-d]嘧啶-4-基)氧)-3,5-二甲基苯基)丙烯酰胺(8c)的制備
操作步驟8a，所不同的是起始原料用的是3-(3,5-二甲基-4-羥基苯基)丙烯腈代替3,5-二甲基-4-羥基苯甲腈。
淺灰色粉末(0.7g)，產(chǎn)率86.1％，熔點：240-242℃，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.34(d,J＝16.7Hz,1H),7.19(s,2H),5.82(d,J＝16.6Hz,1H),3.17-3.05(m,2H),2.97(t,J＝6.3Hz,2H),2.30(p,J＝6.2Hz,2H),2.13(s,6H).ESI-MS:m/z 358.3(M+1)+.C18H16ClN3OS(357.07).
實施例3：化合物的制備
中間體8a(0.5g,1.5mmol)和對氨基苯甲腈(0.36g,3mmol)溶于二氧六環(huán)(20mL)中，加入2,2'-雙-(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘(93mg,0.15mmol)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(140mg,0.15mmol)室溫攪拌溶解后加入碳酸銫(0.98g,3mmol)，氮氣保護下升溫至100℃反應(yīng)3h。冷卻過濾后濃縮，乙酸乙酯(100mL)溶解后水洗(20mL×3)，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾后硅膠柱色譜分離得白色固體(0.48g)。
產(chǎn)率77.0％，熔點：253-254℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.98(s,2H),7.78(s,2H),7.45(s,4H),3.19-3.05(m,2H),2.88(t,J＝6.2Hz,2H),2.26-2.16(m,2H),2.11(s,6H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.63,163.07,154.68,154.12,145.20,133.10,133.02,132.98,119.92,119.00,118.05,109.09,104.50,102.39,31.74,26.34,22.96,16.12.ESI-MS:m/z 414.5(M+1)+,431.5(M+18)+.C23H19N5OS(413.13).
操作步驟同IA-1-1，所不同的是使用中間體8c(0.2g)代替中間體8a。
白色粉末(100mg)，產(chǎn)率40.6％。熔點：278-280℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.95(s,1H),7.68(d,J＝16.7Hz,1H),7.54(s,2H),7.48(d,J＝8.6Hz,2H),7.39(d,J＝8.8Hz,2H),6.48(d,J＝16.7Hz,1H),3.19-3.06(m,2H),2.87(t,J＝6.2Hz,2H),2.20(p,J＝6.0Hz,2H),2.08(s,6H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.47,163.30,154.76,152.47,150.45,145.29,132.97,131.93,131.63,128.64,119.95,119.33,118.06,104.49,102.26,96.93,31.71,26.33,22.98,16.40.ESI-MS:m/z 440.6(M+1)+,457.6(M+18)+.C25H21N5OS(439.15).
IA-1-1(200mg,0.48mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，冷卻至-78℃，氮氣保護下滴加間氯過氧苯甲酸(107mg,0.57mmol)的二氯甲烷溶液(3mL)，反應(yīng)1h。反應(yīng)液升至室溫，加飽和亞硫酸氫鈉(30mL)，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾后硅膠柱色譜分離得白色粉末(150mg)。
產(chǎn)率72.2％，熔點：247-249℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.52(s,1H),7.80(d,J＝4.6Hz,2H),7.50(s,4H),3.32-3.19(m,1H),3.09-2.79(m,3H),2.61-2.51(m,2H),2.15(d,J＝14.7Hz,6H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:169.09,167.61,158.94,153.63,144.12,133.16,133.08,119.60,119.31,118.95,111.11,109.44,104.19,60.21,45.19,32.08,16.22,12.89.ESI-MS:m/z 447.5(M+18)+,452.3(M+23)+.C23H19N5O2S(429.13).
IA-1-1(100mg,0.24mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入間氯過氧苯甲酸(125mg,0.73mmol)，室溫攪拌過夜。反應(yīng)液加二氯甲烷萃取(50mL)，飽和亞硫酸氫鈉洗(30mL)，水洗(20mL×2)，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾蒸干后乙酸乙酯/氯仿重結(jié)晶得無色晶體(67mg)。
產(chǎn)率62.2％，熔點：263-265℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.62(s,1H),7.81(s,2H),7.64-7.18(m,4H),3.69-3.55(m,2H),3.02(t,J＝6.0Hz,2H),2.34(d,J＝5.1Hz,2H),2.16(s,6H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:169.89,164.70,158.49,153.31,143.82,133.19,133.08,132.92,119.52,119.44,118.92,112.61,109.52,104.48,52.49,32.08,18.98,16.08.ESI-MS:m/z463.5(M+18)+,468.4(M+23)+.C23H19N5O3S(445.12).
合成路線四：
實施例4:3,5-二甲基-4-((2-(哌啶-4-氨基)-7,8-二氫-6H-噻喃[3,2-d]嘧啶-4-基)氧)苯甲腈(9a)的制備
中間體8a(2g,6.03mmol)和1-Boc-4-氨基哌啶(1.45g,7.23mmol)溶于N-甲基吡咯烷酮(10mL)中，加入N,N-二異丙基乙胺(1.2mL)后升溫至100-120℃反應(yīng)4-6h。冷卻，乙酸乙酯溶解后水洗(30mL×3)，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾蒸干后溶于三氟乙酸和二氯甲烷溶液中，室溫反應(yīng)4h，加飽和碳酸氫鉀調(diào)節(jié)pH顯中性后用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾蒸干后硅膠柱色譜分離得白色粉末(1.5g)。
產(chǎn)率62.9％，熔點：250℃分解，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.00(s,2H),7.67(s,2H),7.02(s,1H),3.14(d,J＝12.5Hz,2H),3.07-2.99(m,2H),2.71(t,J＝6.3Hz,4H),2.18-2.09(m,2H),2.07(s,6H),1.81(s,2H),1.54(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.27,157.76,154.08,132.96,132.77,119.08,108.60,46.02,41.99,31.86,28.05,26.31,23.39,16.18.ESI-MS:m/z 396.4(M+1)+.C21H25N5OS(395.18).
4-(2,4,6-三甲基苯基)-N-(哌啶-4-基)-7,8-二氫-6H-噻喃[3,2-d]嘧啶-2-氨(9b)的制備
操作步驟同9a，所不同的是使用中間體8b(1g)代替中間體8a。
白色粉末(0.34g)，產(chǎn)率28.7％，熔點：290℃分解，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.91(s,2H),6.90(s,3H),3.15(d,J＝12.6Hz,2H),3.07-2.96(m,2H),2.69(t,J＝6.3Hz,4H),2.24(s,3H),2.12(p,J＝5.9Hz,2H),1.98(s,6H),1.82(s,2H),1.54(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:164.00,157.90,147.95,134.59,130.15,129.29,46.06,42.15,31.84,28.14,26.30,23.45,20.81,16.44.ESI-MS:m/z 385.5(M+1)+.C21H28N4OS(384.20).
E-3-(3,5-二甲基-4-((2-(哌啶-4-氨基)-7,8-二氫-6H-噻喃[3,2-d]嘧啶-4-基)氧)苯基)丙烯酰胺(9c)的制備
操作步驟同9a，所不同的是使用中間體8c(0.5g)代替中間體8a。
白色粉末(0.32g)，產(chǎn)率54.2％，熔點：280℃分解，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.85(s,2H),7.59(d,J＝16.7Hz,1H),7.43(s,2H),7.30(s,2H),6.66(s,1H),6.40(d,J＝16.7Hz,1H),3.43(s,2H),3.08-2.95(m,2H),2.68(t,J＝6.2Hz,4H),2.15-2.09(m,2H),2.06(s,1H),2.03(s,6H),1.61(s,4H),1.32(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.65,158.05,152.59,150.58,131.62,131.45,126.05,119.42,96.51,62.02,52.67,49.07,31.89,26.34,23.50,16.46.ESI-MS:m/z 422.5(M+1)+.C23H27N5OS(421.19).
實施例5：化合物的制備
中間體9a(0.2g,0.51mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入對溴甲基苯磺酰胺(0.19g,0.76mmol)和碳酸鉀(0.11g,0.76mmol)室溫下攪拌過夜，反應(yīng)液過濾，真空泵下濃縮，乙酸乙酯溶解(50mL)后水洗(20mL×3)，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾后濃縮，硅膠柱色譜分離，產(chǎn)物用甲醇沖洗滌即得產(chǎn)物(0.24g)。
以不同的取代溴(氯)芐和中間體9a-9c得到目標(biāo)化合物IIA-1-1～IIA-1-13，結(jié)果如下：
白色粉末，產(chǎn)率84.1％，熔點：193-195℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.77(d,J＝8.3Hz,2H),7.66(s,2H),7.45(d,J＝8.0Hz,2H),7.30(s,2H),6.88(s,1H),3.45(s,2H),3.13-2.95(m,2H),2.91-2.57(m,4H),2.16-2.08(m,2H),2.06(s,6H),1.99-0.81(m,6H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6))δ:163.25,157.97,154.22,143.35,143.13,133.02,132.66,129.41,126.04,119.10,108.56,61.97,52.61,49.07,31.86,31.65,26.34,23.48,16.15.ESI-MS:m/z 565.5(M+1)+.C28H32N6O3S2(564.20).
操作步驟同IIA-1-1，所不同的是使用中間體9b(0.2g)代替中間體9a。
白色粉末(157mg)，產(chǎn)率43.6％，熔點：218-220℃，1；H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.77(d,J＝8.3Hz,2H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),7.30(s,2H),6.88(s,2H),6.60(s,1H),3.45(s,2H),3.08-2.91(m,2H),2.79-2.57(m,4H),2.23(s,3H),2.10(dt,J＝11.8,5.4Hz,2H),1.97(s,6H),1.72-1.47(m,2H),1.46-1.10(m,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6))δ:163.97,162.36,158.15,148.02,143.36,143.13,134.49,130.15,129.42,129.22,126.03,61.99,52.65,49.07,31.86,31.74,26.33,23.54,20.80,16.43.ESI-MS:m/z 554.5(M+1)+.C28H35N5O3S2(553.22).
操作步驟同IIA-1-1，所不同的是使用中間體9c(0.2g)代替中間體9a。
白色粉末(0.18g)，產(chǎn)率64.2％，熔點：237-239℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.77(d,J＝8.3Hz,2H),7.59(d,J＝16.7Hz,1H),7.43(s,4H),7.30(s,2H),6.66(s,1H),6.40(d,J＝16.7Hz,1H),3.43(s,2H),3.08-2.95(m,2H),2.68(t,J＝6.2Hz,4H),2.15-2.09(m,2H),2.06(s,1H),2.03(s,6H),1.61(s,4H),1.32(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6))δ:163.65,158.05,152.59,150.58,143.41,143.14,131.62,131.45,129.43,128.33,126.05,119.42,96.51,62.02,52.67,49.07,31.89,31.68,26.34,23.50,16.46.ESI-HRMS:m/z 591.2257(M+1)+.C30H34N6O3S2(590.2134).
操作步驟同IIA-1-1，所不同的是使用3-溴甲基苯磺酰胺(152mg)代替4-溴甲基苯磺酰胺。
白色粉末(0.21g)，產(chǎn)率73.5％，熔點：170-172℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.74(s,1H),7.71(d,J＝7.4Hz,1H),7.67(s,2H),7.51(t,J＝7.5Hz,1H),7.47(d,J＝7.5Hz,1H),7.36(s,2H),6.80(s,1H),3.46(s,2H),3.02(dd,J＝6.7,4.1Hz,2H),2.69(t,J＝6.1Hz,4H),2.19-2.09(m,2H),2.08(s,1H),2.06(s,6H),1.66(s,4H),1.32(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.25,157.84,154.22,144.59,144.09,140.31,133.01,132.74,132.47,129.26,125.92,124.68,119.13,108.55,62.05,52.62,49.07,31.82,31.65,26.30,23.45,16.18.ESI-HRMS:m/z 565.2045(M+1)+.C28H32N6O3S2(564.1977).
操作步驟同IIA-1-1，所不同的是使用4-氯甲基苯甲腈(92mg)代替4-溴甲基苯磺酰胺。
白色粉末(0.21g)，產(chǎn)率81.3％，熔點：184-186℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.77(d,J＝8.2Hz,2H),7.66(s,2H),7.47(d,J＝8.1Hz,2H),6.89(br,1H),3.48(s,2H),3.12-2.95(m,2H),2.69(t,J＝6.3Hz,5H),2.19-2.02(m,8H),1.63(s,4H),1.32(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.26,158.00,154.22,145.26,133.01,132.66,132.58,129.87,119.38,119.10,110.08,108.56,61.93,52.59,48.66,31.84,31.66,26.33,23.47,16.16.ESI-MS:m/z 511.6(M+1)+.C29H30N6OS(510.22).
操作步驟同IIA-1-1，所不同的是使用3-溴甲基苯甲腈(119mg)代替4-溴甲基苯磺酰胺。
白色粉末(0.21g)，產(chǎn)率81.3％，熔點：164-166℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.72(d,J＝7.6Hz,1H),7.68(s,1H),7.65(s,2H),7.62(d,J＝7.8Hz,1H),7.53(t,J＝7.7Hz,1H),6.87(s,1H),3.45(s,2H),3.09-2.94(m,2H),2.69(t,J＝6.3Hz,4H),2.19-2.09(m,2H),2.09(s,1H),2.06(s,6H),1.63(s,4H),1.31(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.26,157.96,154.22,140.90,134.02,133.02,132.68,132.44,131.22,129.89,119.34,119.10,111.65,108.56,61.46,55.38,52.49,31.86,31.64,31.15,26.33,23.47,21.52,16.16.ESI-HRMS:m/z 511.2335(M+1)+.C29H30N6OS(510.2202).
操作步驟同IIA-1-1，所不同的是使用2-溴甲基苯甲腈(92mg)代替4-溴甲基苯磺酰胺。
白色粉末(0.2mg)，產(chǎn)率77.5％，熔點：206-208℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.79(d,J＝7.6Hz,1H),7.70-7.61(m,3H),7.52(d,J＝7.7Hz,1H),7.46(t,J＝7.6Hz,1H),6.86(s,1H),3.56(s,2H),3.10-2.94(m,2H),2.69(t,J＝6.2Hz,4H),2.17-2.09(m,2H),2.09(s,1H),2.06(s,6H),1.59(s,4H),1.30(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.26,158.00,154.22,142.82,133.42,133.41,133.02,132.69,130.48,128.36,119.08,118.11,112.53,108.57,60.36,60.22,52.54,31.88,31.58,31.19,26.33,23.47,16.17,14.56.ESI-MS:m/z 511.3(M+1)+.C29H30N6OS(510.22).
操作步驟同IIA-1-1，所不同的是使用4-氯甲基苯甲酰胺(103mg)代替4-溴甲基苯磺酰胺。
白色粉末(0.2g)，產(chǎn)率74.8％，熔點：261-263℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.91(s,1H),7.81(d,J＝8.1Hz,2H),7.66(s,2H),7.33(d,J＝7.9Hz,2H),7.30(s,1H),6.86(br,1H),3.43(s,2H),3.08-2.94(m,2H),2.69(t,J＝6.2Hz,4H),2.17-2.10(m,2H),2.09(s,1H),2.06(s,6H),1.60(s,4H),1.31(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:168.25,163.26,158.04,154.23,142.60,142.52,133.45,133.02,132.69,128.88,127.88,119.11,108.56,79.65,62.19,52.63,31.84,31.65,31.16,26.33,23.47,16.16.ESI-MS:m/z 529.5(M+1)+,551.6(M+23)+.C29H32N6O2S(528.23).
操作步驟同IIA-1-1，所不同的是使用3-氯甲基苯甲酰胺(103mg)代替4-溴甲基苯磺酰胺。
白色粉末(0.19g)，產(chǎn)率71.1％，熔點：245-247℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.95(s,1H),7.76(d,J＝11.6Hz,2H),7.66(s,2H),7.39(d,J＝7.3Hz,2H),7.33(s,1H),6.86(s,1H),3.43(s,2H),3.02(s,2H),2.77-2.58(m,4H),2.19-2.09(m,2H),2.09(s,1H),2.06(s,6H),1.63(s,4H),1.32(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:168.43,163.26,157.96,154.22,139.22,134.68,133.02,132.68,132.03,128.45,126.44,119.10,108.56,62.44,52.60,48.81,31.87,31.65,31.15,26.33,23.47,16.16.ESI-MS:m/z 529.4(M+1)+,551.6(M+23)+.C29H32N6O2S(528.23).
操作步驟同IIA-1-1，所不同的是使用4-氯甲基苯甲酸乙酯(148mg)代替4-溴甲基苯磺酰胺。
白色粉末(0.16g)，產(chǎn)率56.7％，熔點：181-183℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.91(d,J＝8.1Hz,2H),7.65(s,2H),7.41(d,J＝8.1Hz,2H),6.87(br,1H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),3.46(s,2H),3.09-2.97(m,2H),2.69(t,J＝6.2Hz,4H),2.16-2.09(m,2H),2.09(s,1H),2.06(s,6H),1.60(s,4H),1.31(t,J＝7.1Hz,5H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:166.11,163.26,157.99,154.24,144.87,141.04,133.02,132.74,129.52,129.29,128.98,119.10,108.56,62.16,61.04,56.50,52.62,31.88,31.65,31.16,26.33,23.47,16.15,14.66.ESI-MS:m/z 558.6(M+1)+.C31H35N5O3S(557.25).
操作步驟同IIA-1-1，所不同的是使用4-溴甲基硝基苯(131mg)代替4-溴甲基苯磺酰胺。
淺黃色粉末(140mg)，產(chǎn)率52.2％，熔點：190-192℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.18(d,J＝8.7Hz,2H),7.66(s,2H),7.55(d,J＝8.6Hz,2H),6.88(s,1H),3.53(s,2H),3.11-2.92(m,2H),2.69(t,J＝6.2Hz,4H),2.19-2.10(m,2H),2.09(s,1H),2.06(s,6H),1.59(s,4H),1.33(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.26,157.99,154.23,147.51,146.97,133.02,132.67,130.03,123.80,119.10,108.56,61.63,52.61,31.84,31.66,31.15,26.33,23.47,19.03,16.15.ESI-MS:m/z 531.5(M+1)+.C28H30N6O3S(530.21).
操作步驟同IIA-1-1，所不同的是使用1-氯甲基-4-甲砜基苯(151mg)代替4-溴甲基苯磺酰胺。
白色粉末(0.19g)，產(chǎn)率66.7％，熔點：265-267℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.87(d,J＝8.3Hz,2H),7.66(s,2H),7.54(d,J＝8.2Hz,2H),6.89(br,1H),3.50(s,2H),3.20(s,3H),3.10-2.95(m,2H),2.69(t,J＝6.2Hz,4H),2.11(m,2H),2.09(s,1H),2.06(s,6H),1.64(s,4H),1.32(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.26,158.00,157.98,154.22,145.46,139.81,133.02,132.69,129.77,127.39,119.12,108.56,61.89,52.65,48.68,44.07,31.86,31.66,26.33,23.47,16.16.ESI-MS:m/z 564.5(M+1)+,586.5(M+23)+.C29H33N5O3S2(563.20).
合成路線五：
實施例6：化合物IIA-1-13的制備
鐵粉(0.56g,10mmol)溶于5mL水中，加0.12mL醋酸，50℃條件下攪拌15分鐘，快速加入化合物IIA-1-12(0.53g,1mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)，50℃反應(yīng)1h。冷卻，用碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH>9，硅藻土過濾，固體用乙酸乙酯洗滌，液體用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，硅膠柱色譜分離，甲醇洗滌產(chǎn)物得淡黃色粉末(0.31g)。
產(chǎn)率63.6％，熔點：169-171℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.66(s,2H),6.87(d,J＝8.1Hz,2H),6.49(d,J＝8.2Hz,2H),4.94(s,2H),3.17(s,2H),3.08-2.95(m,2H),2.68(t,J＝6.1Hz,4H),2.12(d,J＝5.3Hz,2H),2.09(s,1H),2.05(s,6H),1.48(s,4H),1.23(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.24,158.03,154.22,147.95,133.01,132.65,130.16,125.66,123.82,119.11,114.01,108.55,62.55,52.39,31.65,26.31,23.46,21.24,19.03,16.16,14.56.ESI-MS:m/z501.5(M+1)+.C28H32N6OS(500.24).
實施例7：化合物IIA-1-14的制備。
化合物IIA-1-13(0.2g,0.4mmol)和三乙胺(32μL,0.4mmol)溶于二氯甲烷中，冰浴條件下滴加甲磺酰氯(100μL,1.2mmol)，反應(yīng)2h后升至室溫攪拌過夜。加水15mL后用飽和碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH>7后用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，甲醇/氯仿重結(jié)晶得白色粉末(40mg)。
產(chǎn)率17.3％，熔點：153-157℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.68(s,1H),7.66(s,2H),7.21(d,J＝8.3Hz,2H),7.14(d,J＝8.4Hz,2H),6.70(br,1H),3.32(s,2H),3.07-2.99(m,2H),2.96(s,3H),2.69(t,J＝6.3Hz,4H),2.11(t,J＝5.7Hz,2H),2.09(s,1H),2.06(s,6H),1.55(s,4H),1.23(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.25,137.49,134.60,133.01,132.90,132.77,132.70,130.12,120.24,119.13,108.54,100.98,62.08,52.56,39.62,36.25,31.81,31.63,31.17,26.30,23.45,16.16.ESI-HRMS:m/z 579.2250(M+1)+.C29H34N6O3S2(578.2134).
合成路線六：
實施例8：化合物IIC-1-1，IIC-1-2及IIC-2-1的制備。
中間體8a(0.2g,0.6mmol)和3-(4-氨基哌啶-1-基)苯甲腈(145mg,0.72mmol)溶于N-甲基吡咯烷酮(5mL)中，加N,N-二異丙基乙胺(120μL)后升溫至100-120℃，反應(yīng)過夜。反應(yīng)液冷卻，加水析出固體，過濾后甲醇/氯仿重結(jié)晶即得白色粉末(129mg)。
產(chǎn)率43.1％，熔點：186-187℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.65(s,2H),7.34(dd,J＝8.5,7.4,1H),7.26(s,1H),7.21(d,J＝8.5Hz,1H),7.09(d,J＝7.4Hz,1H),6.82(br,1H),3.67(s,3H),3.02(p,2H),2.70(t,J＝6.0Hz,3H),2.12(t,J＝5.7Hz,2H),2.08(s,1H),2.07(s,6H),1.69(s,2H),1.35(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.26,157.91,154.17,151.25,133.01,132.73,130.64,121.53,120.26,119.84,119.12,118.11,112.37,108.58,56.52,47.19,31.85,31.16,30.82,26.31,23.42,18.98,16.18.ESI-HRMS:m/z 497.2133(M+1)+.C28H28N6OS(496.2045).
操作步驟同IIC-1-1，所不同的是使用3-(4-氨基哌啶-1-基)苯甲酰胺(0.16g)代替3-(4-氨基哌啶-1-基)苯甲腈。
白色粉末(109mg)，產(chǎn)率35.1％，熔點：232-234℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.91(s,1H),7.68(s,2H),7.38(s,1H),7.29(s,1H),7.25(s,1H),7.23(s,1H),7.03(d,J＝4.1Hz,2H),6.73(s,1H),3.65(s,2H),3.03(d,J＝5.4Hz,2H),2.72(t,J＝6.3Hz,3H),2.13(t,J＝5.7Hz,2H),2.09(s,1H),2.09(s,6H),1.72(s,2H),1.42(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:168.71,163.27,157.95,154.18,151.18,135.40,133.01,132.75,129.25,119.11,118.66,117.98,115.09,108.58,56.50,48.06,31.88,31.16,26.32,23.46,19.04,16.21.ESI-HRMS:m/z 515.2226(M+1)+.C28H30N6O2S(514.2151).
實施例9：目標(biāo)化合物的體外抗HIV活性測試實驗
測試原理
活細胞能夠吸收3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(MTT)，吸收進入細胞內(nèi)的MTT可以在線粒體內(nèi)被還原，由黃色變成藍紫色，吸收波長會發(fā)生變化，而死細胞則不能還原MTT。測定540nM和690nM處的光密度值(OD值)，光密度值與活細胞的數(shù)量成正比，即可求出相應(yīng)的存活率。
感染了HIV病毒的細胞最多能夠存活5-7天，而加入HIV-1抑制劑之后能夠抑制病毒的復(fù)制，從而保護細胞免于病變。向感染HIV病毒的MT-4細胞內(nèi)加入梯度稀釋的抑制劑，培養(yǎng)5-7天以后，用MTT法測定細胞存活率，利用抑制劑濃度與細胞存活率做標(biāo)準(zhǔn)曲線即可得到保護50％細胞免于病變的化合物濃度(即EC50值)。
同理，向正常MT-4細胞內(nèi)加入梯度稀釋的抑制劑，可以計算出使50％正常細胞發(fā)生病變的抑制劑濃度(即CC50值)，然后得出選擇性系數(shù)SI(SI＝CC50/EC50)。
1.測試材料和方法
(1)HIV-1(IIIB)、HIV-2(ROD)毒株、各種HIV-1耐藥株：由比利時魯汶大學(xué)醫(yī)學(xué)院Rega研究所提供。
(2)MT-4細胞：由比利時魯汶大學(xué)醫(yī)學(xué)院Rega研究院提供。
(3)MTT：購自美國Sigma公司。
(4)樣品處理：樣品臨用前溶于DMSO配成適當(dāng)濃度，并用雙蒸水作5倍稀釋，各5個稀釋度。
(5)陽性對照藥：奈韋拉平(NVP)、依法韋侖(EFV)、依曲韋林(ETR)、利匹韋林(RPV)和齊多夫定(AZT)。
(6)測試方法：樣品稀釋后加入到HIV感染MT-4細胞懸濁液中，經(jīng)過一段時間后用MTT比色法測定細胞活力，用酶標(biāo)儀中記錄在590nm下的吸光度(A)值,計算出EC50，CC50以及SI。
(7)MTT比色法：加入樣品溶液培養(yǎng)一段時間后，向每孔加入MTT溶液(5mg/ML)20μL，繼續(xù)培養(yǎng)若干小時后，棄染色液，并向每孔加入150μL DMSO，充分混合，用酶標(biāo)儀中測定590nm下的吸光度(A)值。
2.實驗方法
在96孔細胞培養(yǎng)板上，加入50μL含1×104MT-4細胞培養(yǎng)液，再分別加入20μL感染HIV-1(IIIB、RES056或其它變異株)或HIV-2(ROD)的MT-4細胞混懸液(每毫升含100倍CCID50)或者空白培養(yǎng)基(毒性測定)，然后加入不同濃度的待測化合物溶液或者陽性對照藥物，每個濃度設(shè)計3個復(fù)孔。接著細胞在5％CO2氛圍，37℃下培養(yǎng)5天，向每個孔中加入20μL(5mg/mL)MTT溶液，繼續(xù)培養(yǎng)2小時，然后加入DMSO，使用酶標(biāo)儀測定反應(yīng)溶液在540nm處的吸收度，計算化合物不同濃度下的細胞增值率P％。同時設(shè)空白和藥物對照組和陽性藥物對照組，由此計算化合物保護50％的細胞免于HIV誘導(dǎo)的細胞病變所需濃度(EC50)。選擇指數(shù)的計算：SI＝CC50/EC50。
3.四氫噻喃并嘧啶類衍生物的抗HIV-1野生株及突變株活性及應(yīng)用
對按照上述方法合成的部分四氫噻喃并嘧啶類衍生物進行了細胞水平的抗HIV-1(IIIB)，單耐藥突變株L100I、K103N、Y181C、Y188L以及雙耐藥突變株RES056(K103N/Y181C)、F227L/V106A的活性篩選，以奈韋拉平(NVP)、依法韋倫(EFV)、依曲韋林(ETV)、利匹韋林(RPV)和齊多夫定(AZT)為陽性對照。它們的抗HIV-1活性數(shù)據(jù)列于表1中。
表1部分化合物和參考藥物的結(jié)構(gòu)及其抗HIV-1活性(MT-4細胞)
注：aEC50:保護50％感染HIV-1的MT-4細胞免于細胞病變的化合物濃度；A代表化合物EC50<10nM，B代表化合物EC50值為10-100nM，C代表化合物EC50>100nM；NVP、EFV、AZT、ETV、RPV分別代表上市藥物奈韋拉平、依法韋倫、齊多夫定、依曲韋林和利匹韋林。
4.結(jié)論：
由表1可以看出，本發(fā)明的四氫噻喃并嘧啶衍生物是一系列具有新穎骨架的非核苷類HIV-1抑制劑，表現(xiàn)出了極強的抗HIV-1野生株和突變株活性。絕大部分化合物抑制野生株和突變株的EC50值在1μM以下，其中，化合物IA-1-3的活性尤為突出，其對HIV-1野生株的EC50值是第一代抗艾滋病藥物奈韋拉平(NVP)的30倍以上，與最新一代藥物依曲韋林(ETV)相當(dāng)?；衔颕A-1-3亦表現(xiàn)出了高的安全性，其對HIV-1野生株的選擇性指數(shù)大于1000。對單突變株K103N和Y188L，化合物IA-1-2表現(xiàn)出了與依曲韋林相當(dāng)?shù)囊种苹钚?，對于單突變株L100I，Y181C和雙突變株(F227L/V106A和Y181C/K103N)的抑制活性為依曲韋林的2倍以上。因此，四氫噻喃并嘧啶類化合物具有進一步研發(fā)的價值，可作為抗HIV-1的先導(dǎo)化合物加以利用。