本發(fā)明屬于生物組織培養(yǎng)技術領域,尤其是一種培養(yǎng)基及其用于培養(yǎng)觀賞鳳梨繼代苗的方法。
背景技術:
植物離體保存種質(zhì)資源是將植物外植體在無菌環(huán)境下進行組織培養(yǎng)保存,可克服常規(guī)田間保存法的缺點,不占用土地、節(jié)省貯存空間、免去日常管理、便于運輸和交流等。目前國內(nèi)外對觀賞鳳梨的種質(zhì)保存多采用了離體保存方法,但是在組織培養(yǎng)保存種質(zhì)的過程中,由于培養(yǎng)基營養(yǎng)耗盡、水分蒸發(fā),每隔一段時間,要將培養(yǎng)物及時轉(zhuǎn)移接種到新培養(yǎng)基中,以保證培養(yǎng)物正常生長。觀賞鳳梨組培苗一般3個月左右繼代一次,需要花費人力、物力,同時由于培養(yǎng)材料長期受外源激素的刺激,變異幾率的發(fā)生隨著繼代次數(shù)的增加而越大。隨著離體培養(yǎng)技術的全面展開,以之為基礎的限制生長法離體保存技術也得到了應用。限制生長保存法,即在組培苗繼代保存過程中,通過調(diào)控培養(yǎng)物生長的外界條件,使材料生長降至最小限度,營養(yǎng)消耗減少,從而延長繼代間隔時間,減少繼代次數(shù),既大大節(jié)省試管苗繼代接種的工作量,又降低變異機率,保持種質(zhì)的遺傳穩(wěn)定性。公開于該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解,而不應當被視為承認或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已為本領域一般技術人員所公知的現(xiàn)有技術。
技術實現(xiàn)要素:
針對現(xiàn)有技術的不足,本發(fā)明提供一種培養(yǎng)基及其用于培養(yǎng)觀賞鳳梨繼代苗的方法,改變以前采用低溫培養(yǎng)的保存方法,采用常規(guī)培養(yǎng)方法達到了延長觀賞鳳梨組培苗的保存周期。本發(fā)明是通過以下技術方案來實現(xiàn)的:一種培養(yǎng)基,包括:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂4.0g/L+馬鈴薯汁300g/L。本發(fā)明還提供了一種利用所述的培養(yǎng)基培養(yǎng)觀賞鳳梨繼代苗的方法,包括以下步驟:(1)制備延緩繼代培養(yǎng)基:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂4.0g/L+馬鈴薯汁300g/L,培養(yǎng)基滅菌前調(diào)節(jié)至pH5.8-6.0;(2)將鳳梨組培苗接入延緩培養(yǎng)基中,在25±3℃,光照2000Lx,光照時間12-14h/d的培養(yǎng)條件下保存;(3)待發(fā)現(xiàn)延緩培養(yǎng)基接近干枯或者需要重新擴繁時直接轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基即可。與現(xiàn)有技術相比,本發(fā)明具有如下有益效果:1.本發(fā)明的培養(yǎng)基可以將鳳梨組培苗的繼代間隔時間由3個月延長到18-24個月,大大的減少了繼代接種的工作量,降低了組培苗變異率,節(jié)省了生產(chǎn)成本。2.本發(fā)明的培養(yǎng)基可應用于觀賞鳳梨組培苗種質(zhì)保存,簡單、方便、節(jié)約、有效,為種質(zhì)資源保存提供了新途徑。3.本發(fā)明的培養(yǎng)方法中條件和正常的鳳梨繼代、壯苗、生根培養(yǎng)條件相同,不需要低溫保存,降低了能耗同時沒有空間限制方法步驟更為簡單,可以規(guī)?;谋4鎽谩>唧w實施方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的具體實施方式進行詳細描述,但應當理解本發(fā)明的保護范圍并不受具體實施方式的限制。除非另有其它明確表示,否則在整個說明書和權(quán)利要求書中,術語“包括”或其變換如“包含”或“包括有”等等將被理解為包括所陳述的元件或組成部分,而并未排除其它元件或其它組成部分。實施例1:一種培養(yǎng)基,包括:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂4.0g/L+馬鈴薯汁300g/L。一種利用所述的培養(yǎng)基培養(yǎng)觀賞鳳梨繼代苗的方法,包括以下步驟:(1)制備延緩繼代培養(yǎng)基:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂4.0g/L+馬鈴薯汁300g/L,培養(yǎng)基滅菌前調(diào)節(jié)至pH5.8;(2)將鳳梨組培苗接入延緩培養(yǎng)基中,在溫度25±3℃,光照2000Lx,光照時間12h/d的培養(yǎng)條件下保存;(3)待發(fā)現(xiàn)延緩培養(yǎng)基接近干枯或者需要重新擴繁時直接轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基即可。實施例2:一種培養(yǎng)基,包括:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂4.0g/L+馬鈴薯汁300g/L。一種利用所述的培養(yǎng)基培養(yǎng)觀賞鳳梨繼代苗的方法,包括以下步驟:(1)制備延緩繼代培養(yǎng)基:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂4.0g/L+馬鈴薯汁300g/L,培養(yǎng)基滅菌前調(diào)節(jié)至pH6.0;(2)將鳳梨組培苗接入延緩培養(yǎng)基中,在溫度25±3℃,光照2000Lx,光照時間14h/d的培養(yǎng)條件下保存;(3)待發(fā)現(xiàn)延緩培養(yǎng)基接近干枯或者需要重新擴繁時直接轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基即可。實施例3:一種培養(yǎng)基,包括:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂4.0g/L+馬鈴薯汁300g/L。一種利用所述的培養(yǎng)基培養(yǎng)觀賞鳳梨繼代苗的方法,包括以下步驟:(1)制備延緩繼代培養(yǎng)基:MS+NAA0.01mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂4.0g/L+馬鈴薯汁300g/L,培養(yǎng)基滅菌前調(diào)節(jié)至pH5.9;(2)將鳳梨組培苗接入延緩培養(yǎng)基中,在溫度25±3℃,光照2000Lx,光照時間13h/d的培養(yǎng)條件下保存;(3)待發(fā)現(xiàn)延緩培養(yǎng)基接近干枯或者需要重新擴繁時直接轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基即可。分別采用實施例1-3中所述的培養(yǎng)方法對觀賞鳳梨繼代苗在金花茶扦插繁育中進行培養(yǎng),并對繼代苗的存活率、增殖數(shù)等性能進行測定,同時設置對照,對照是采用普通繼代培養(yǎng)基,其它條件相同,測定結(jié)果見表1。表1本發(fā)明的方法培養(yǎng)觀賞鳳梨繼代苗的性能測定從表1可以看出,采用本發(fā)明的方法在延緩培養(yǎng)基上的鳳梨繼代苗可以保持在18-24個月不用更換培養(yǎng)基,存活率在95%以上,增殖數(shù)在20左右;而使用普通繼代培養(yǎng)基在保存了18-24個月以后,存活率僅有4%,增殖數(shù)5在。與其他觀賞植物在低溫條件下繼代苗保存的效果大致相同。綜上所述,本發(fā)明的培養(yǎng)基可以將鳳梨組培苗的繼代間隔時間由3個月延長到18-24個月,大大的減少了繼代接種的工作量,降低了組培苗變異率,節(jié)省了生產(chǎn)成本。該培養(yǎng)基可應用于觀賞鳳梨組培苗種質(zhì)保存,簡單、方便、節(jié)約、有效,為種質(zhì)資源保存提供了新途徑。前述對本發(fā)明的具體示例性實施方案的描述是為了說明和例證的目的。這些描述并非想將本發(fā)明限定為所公開的精確形式,并且很顯然,根據(jù)上述教導,可以進行很多改變和變化。對示例性實施例進行選擇和描述的目的在于解釋本發(fā)明的特定原理及其實際應用,從而使得本領域的技術人員能夠?qū)崿F(xiàn)并利用本發(fā)明的各種不同的示例性實施方案以及各種不同的選擇和改變。本發(fā)明的范圍意在由權(quán)利要求書及其等同形式所限定。