本發(fā)明涉及發(fā)現(xiàn)了990207-22-1化合物在固體狀態(tài)下存在的一種新晶ii型物質(zhì)狀態(tài)形式；涉及發(fā)明了一種990207-22-1晶ii型的制備方法；涉及發(fā)明了含有990207-22-1晶ii型或含任意非零比例晶ii型的混合晶型的藥物組合物；本發(fā)明還涉及990207-22-1晶型物質(zhì)作為活性成分在制備抗腫瘤和腫瘤預(yù)防疾病藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

990207-22-1(化學(xué)名：1-哌嗪二硫代甲酸-3-氰基-3，3-二苯基丙酯鹽酸鹽)

氨基二硫代甲酸酯類化合物在許多領(lǐng)域都有著廣泛的應(yīng)用，特別是在農(nóng)藥領(lǐng)域中常用作殺菌劑。然而，有關(guān)該類化合物的抗腫瘤活性方面的研究卻很少。

gerhauserc等人從十字花科植物中分離出一種氨基二硫代甲酸酯類化合物brassinium，該化合物具有較強的腫瘤預(yù)防作用(cancerresearch1997，57，272-278)。基于這一工作，我們發(fā)現(xiàn)了抗腫瘤作用顯著的哌嗪基二硫代甲酸酯類化合物，在中國專利cn1328999a(公開號)中記載了北京大學(xué)李潤濤等發(fā)明的“哌嗪基二硫代甲酸酯類化合物，它們的制備方法和在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用”。其中，涉及了新穎的哌嗪基二硫代甲酸酯類化合物及其可藥用鹽和包含該化合物的藥用組合物，該類化合物可用于抑制腫瘤生長，化合物990207-22-1是最優(yōu)秀的化合物之一。

在中國專利cn1727332a(公開號)中記載了北京大學(xué)李潤濤等發(fā)明的“芳甲氨基二硫代甲酸酯類化合物及其制備方法和應(yīng)用”。其中，涉及了一類結(jié)構(gòu)全新的具有抗腫瘤活性的氨基二硫代甲酸酯類化合物或其可藥用鹽及其包含該化合物的藥物組合物。

上述文獻和專利是從化合物的分離提取、合成純化等制備方法和臨床治療作用方面進行描述，而本發(fā)明切入點與上述文獻和專利存在本質(zhì)差異，即是從990207-22-1固體化學(xué)物質(zhì)存在狀態(tài)研究入手，通過多晶型篩選技術(shù)研究，在藥物活性成分的原料層面上尋找、發(fā)現(xiàn)990207-22-1固體物質(zhì)的新晶型種類與狀態(tài)特征，并將晶型研究與臨床和保健應(yīng)用結(jié)合，為尋找、發(fā)現(xiàn)、開發(fā)具有最佳功效的990207-22-1物質(zhì)狀態(tài)提供基礎(chǔ)科學(xué)研究數(shù)據(jù)；同時，也為從990207-22-1固體晶型原料物質(zhì)基礎(chǔ)上申請國家或國際的知識產(chǎn)權(quán)發(fā)明專利保護提供科學(xué)依據(jù)。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的之一：是提供990207-22-1晶ii型的固體物質(zhì)存在狀態(tài)和描述方式。

本發(fā)明目的之二：是提供990207-22-1晶ii型的制備方法。

本發(fā)明目的之三：是提供含有990207-22-1晶ii型純品、或含有任意非零比例晶ii型的混合晶型的固體藥物及其組合物。

本發(fā)明目的之四：提供使用990207-22-1晶ii型固體物質(zhì)作為藥物活性成分的每日用藥劑量在10-300mg范圍內(nèi)。

本發(fā)明目的之五：提供使用990207-22-1的晶ii型固體物質(zhì)作為藥物活性成分原料而制備開發(fā)出供臨床使用的各種片劑、膠囊、丸劑、針劑、緩釋或控釋制劑藥物。

本發(fā)明目的之六：是提供990207-22-1晶ii型在抗腫瘤活性和腫瘤預(yù)防方面中的作用，以及在治療疾病過程中由于晶型物質(zhì)而提高生物體內(nèi)血藥濃度而發(fā)揮藥物有效治療作用。

本發(fā)明目的之七：是提供使用990207-22-1晶ii型或含有任意非零比例晶ii型的混合晶型固體物質(zhì)作為藥物有效成分的原料，在制備抗腫瘤和腫瘤預(yù)防藥物中的應(yīng)用。

本專利發(fā)明了990207-22-1化合物的一種新晶ii型固體物質(zhì)存在狀態(tài)，并發(fā)明了該晶型樣品的制備方法；本發(fā)明發(fā)現(xiàn)990207-22-1一種新晶ii型固體物質(zhì)在生物體內(nèi)具有吸收優(yōu)勢；此外，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了990207-22-1晶ii型在制備抗腫瘤和腫瘤預(yù)防藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)特征

1.990207-22-1晶ii型樣品的形態(tài)特征：

1.1本發(fā)明涉及的990207-22-1晶ii型固體物質(zhì)，其特征在于當(dāng)使用粉末x射線衍射分析采用cuka輻射實驗條件時，表現(xiàn)為衍射峰位置：2-theta值或d值和衍射峰相對強度：峰高值(height％)或峰面積值(area％)具有如下特征峰值時的固體物質(zhì)(表1，圖1)：

表1晶ii型990207-22-1樣品的粉末x射線衍射特征峰值

1.2本發(fā)明涉及的990207-22-1晶ii型，其特征是在使用紅外光譜技術(shù)分析時，表現(xiàn)為2997、2957、2914、2743、2699、2648、2620、2432、2241、1571、1491、1469、1448、1402、1383、1362、1339、1311、1257、1243、1202、1158、1141、1077、1057、1027、1016、1000、980、912、893、870、852、810、776、766、752、729、698cm^-1處存在紅外光譜特征峰，其中紅外光譜特征峰的允許偏差為±2cm^-1(圖2)。

1.3本發(fā)明涉及的990207-22-1晶ii型固體物質(zhì)，其特征是在使用差示掃描量熱技術(shù)分析時，表現(xiàn)為當(dāng)升溫速率為每分鐘10℃的dsc圖譜中含有1個peak吸熱峰在202℃±3℃處(圖3)。

1.4本發(fā)明的990207-22-1晶ii型固體物質(zhì)，其特征是使用熔點儀進行樣品分析且升溫速率為每分鐘1℃時，其熔點值為201℃±2℃。

2.990207-22-1晶ii型樣品的制備方法特征：

本發(fā)明的990207-22-1晶ii型的制備方法，使用四氫呋喃和乙酸乙酯按不同比例組合制成的混合溶劑將990207-22-1樣品完全溶解并經(jīng)環(huán)境溫度環(huán)境濕度10％～75％下的重結(jié)晶制備工藝獲得晶ii型固體樣品。

3.990207-22-1的晶型成分、給藥劑量及藥物制劑組合物特征：

3.1一種990207-22-1化合物的混晶固體物質(zhì)，含有任意非零比例的990207-22-1晶ii型成分。

3.2本發(fā)明涉及的藥物組合物，其特征在于，含有有效劑量的990207-22-1晶ii型，或含有990207-22-1混晶固體物質(zhì)和藥學(xué)上可接受的載體。

3.3本發(fā)明涉及的藥物組合物，以990207-22-1晶型固體物質(zhì)作為藥物活性成分，每日用藥劑量在1-300mg范圍內(nèi)。

3.4本發(fā)明涉及的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物是片劑、膠囊、丸劑、針劑、緩釋制劑、控釋制劑。

3.5本發(fā)明涉及990207-22-1晶ii型或含有任意非零比例的990207-22-1晶ii型混晶成分在制備抗腫瘤和腫瘤預(yù)防藥物中的應(yīng)用。

4.990207-22-1晶ii型樣品的吸收特征：

本發(fā)明涉及使用了990207-22-1晶ii型物質(zhì)作為活性成分開發(fā)的藥物及其藥物組合物經(jīng)口服后的生物學(xué)吸收作用，其特征在于使用了含有如權(quán)利要求1中所述的990207-22-1晶ii型物質(zhì)作為活性成分通過胃腸道或血液中迅速達到最大濃度值而在防治疾病中發(fā)揮的優(yōu)勢作用(圖4)。

附圖說明

圖1990207-22-1晶ii型樣品的粉末x射線衍射圖譜

圖2990207-22-1晶ii型樣品的紅外圖譜

圖3990207-22-1晶ii型樣品的差示掃描量熱圖譜

圖4990207-22-1晶ii型樣品經(jīng)口服吸收后在大鼠體內(nèi)的血藥濃度曲線

具體實施方式

為更好說明本發(fā)明的技術(shù)方案，特給出以下實施例，但本發(fā)明并不僅限于此。

實施例1

990207-22-1晶ii型樣品的制備方法1：

使用60ml四氫呋喃溶劑在室溫下將500mg的990207-22-1樣品完全溶解后，再加入60ml乙酸乙酯，在室溫條件下重結(jié)晶制備獲得990207-22-1晶ii型樣品，其粉末x射線衍射圖譜與圖1一致。

990207-22-1晶ii型樣品的制備方法2：

使用比例為2∶1的四氫呋喃∶乙酸乙酯混合溶劑在40℃下將500mg的990207-22-1樣品完全溶解后，在40℃條件下重結(jié)晶制備獲得990207-22-1晶ii型樣品，其粉末x射線衍射圖譜與圖1一致。

實施例2

組合藥物制劑的制備方法1(片劑)：

一種組合藥物制劑的制備方法，其特征在于使用幾種賦形劑將990207-22-1晶ii型純品、或含有任意比例晶ii型的混晶固體物質(zhì)作為組合藥物的原料藥，制成每片含藥量在10～300mg的片劑，表2給出片劑配方：

表2990207-22-1組合藥物片劑的制備配方

將990207-22-1晶ii型純品或含有任意比例晶ii型的混晶原料藥制備成片劑制劑的方法是：將幾種賦形劑與原料藥混合均勻，加入1％羥甲基纖維素鈉溶液適量，制成軟料，過篩制粒，濕粒烘干，過篩整粒，加入硬脂酸鎂和滑石粉混合均勻，壓片，即得。

實施例3

組合藥物制劑的制備方法2(膠囊)：

一種組合藥物制劑的制備方法，其特征在于使用幾種賦形劑將990207-22-1晶ii型純品、或含有任意比例晶ii型的混晶固體物質(zhì)作為組合藥物的原料藥，制成每粒含藥量在10～300mg的膠囊，表3給出膠囊配方：

表3990207-22-1組合藥物膠囊的制備配方

將990207-22-1晶ii型純品、或含有任意比例晶ii型的混晶原料藥制備成膠囊制劑的方法是：將幾種賦形劑與原料藥混合均勻，加入1％羥甲基纖維素鈉溶液適量，制成濕粒，烘干，過篩整粒，加入硬脂酸鎂，混合均勻，插入膠囊制得?；虿皇褂弥屏２襟E，而直接將原料藥與幾種賦形劑混合均勻，過篩后，直接裝入膠囊制得。

實施例4

990207-22-1新晶ii型在大鼠體內(nèi)吸收特征和血藥濃度特征：

采用體重190～210g的spf級sd大鼠常規(guī)飼養(yǎng)條件飼養(yǎng)，自由飲水，禁食12h后，按150mg/kg灌胃給予藥物，于給藥前及給藥后45min、2h、4h、6h、8h、10h、12h、13.5h、14.5h、16h和24h，由眼內(nèi)眥取血于肝素化試管中，離心，取血漿0.15ml，加內(nèi)標(biāo)10μl混均后，加0.8ml乙酸乙酯，振蕩混均3min，13，400rpm離心10min，取上清液氮氣吹干.以流動相100μl復(fù)溶，上樣20μl進行hplc檢測，用樣品與內(nèi)標(biāo)峰面積比進行定量分析。hplc檢測系統(tǒng)為aligent1200高效液相色譜系統(tǒng)，色譜柱為agilentzorbaxsb-c18(4.6×250mm，5μm)，采用梯度洗脫的流動相系統(tǒng)(見表4)，進樣量為20μl，流速為1ml/min，檢測波長為254nm，柱溫為結(jié)果顯示，大鼠口服990207-22-1新晶ii型樣品在4h后血液中即可檢測出活性成分。

表4.梯度洗脫的流動相系統(tǒng)數(shù)據(jù)

表5.大鼠口服990207-22-1晶ii型樣品后的藥時曲線數(shù)據(jù)

實施例5

990207-22-1新晶ii型物質(zhì)作為活性成分的藥品給藥劑量：

使用990207-22-1新晶ii型樣品作為藥物活性成分制備開發(fā)的藥物片劑或其他制劑，其特征是含有990207-22-1新晶ii型作為藥物的活性成分，每日給藥劑量為300mg，可分別制備成每日3次/每次1片100mg普通片劑，每日2次/每次1片150mg普通片劑或每日1次/每次1片300mg的片劑類型。

需要說明的問題：本發(fā)明涉及的990207-22-1新晶ii型藥物組合物在有效成分的給藥劑量上存在有許多因素影響，例如：用于預(yù)防和治療的用途不同而造成每日用藥劑量的不同；患病性質(zhì)與患病嚴(yán)重程度不同而造成每日用藥劑量的不同；患者性別、年齡、體表面積的不同，給藥途徑、給藥次數(shù)、治療目的不同而造成每日用藥劑量的不同；此外，晶型樣品間存在的吸收和血藥濃度不同等，亦造成本發(fā)明在使用990207-22-1新晶ii型成分的每日合適劑量范圍為1～300mg/kg體重，優(yōu)選為1～100mg/kg體重。使用時應(yīng)根據(jù)實際的預(yù)防與治療不同情況需求制定990207-22-1新晶ii型有效成分總劑量方案，并可分為多次或一次給藥方式完成。