技術(shù)特征:
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了抗羊IgMμ鏈單克隆抗體、分泌該抗體的雜交瘤細(xì)胞株及其用途。本發(fā)明以分泌型IgM蛋白為靶蛋白,克隆獲得IgMμ鏈基因的完整開放閱讀框,亞克隆至原核表達(dá)載體,利用鎳柱純化重組蛋白,并對6?8周齡的雌性BALB/c小鼠進(jìn)行免疫,當(dāng)抗體滴度在1∶10000以上時(shí),對免疫小鼠脾細(xì)胞的單細(xì)胞懸液與對數(shù)生長期的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,篩選獲得分泌抗羊IgMμ鏈的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株;向6?8周齡的經(jīng)產(chǎn)BALB/c小鼠腹腔注射雜交瘤細(xì)胞,注射7天左右收集腹水,protein?G/A瓊脂糖珠純化腹水,獲得純度較高的抗羊IgMμ鏈的單克隆抗體。本發(fā)明提供的單克隆抗體效價(jià)高,可用于羊IgM免疫球蛋白的檢測,并且有望實(shí)現(xiàn)對多種羊病的早期篩查與監(jiān)測,具有廣泛的應(yīng)用范圍和社會需求。
技術(shù)研發(fā)人員:蒙學(xué)蓮;朱學(xué)亮;竇永喜;才學(xué)鵬;張志東
受保護(hù)的技術(shù)使用者:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所
技術(shù)研發(fā)日:2016.03.09
技術(shù)公布日:2017.09.19