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人源化可變淋巴細(xì)胞受體(VLR)及其相關(guān)組合物和用途的制作方法

文檔序號(hào):12284521閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種分離的經(jīng)修飾的人氨基酸序列,其特異性結(jié)合由一種工藝制得的分子,該工藝包括,

提供結(jié)合一種分子的無(wú)頜類(lèi)脊椎動(dòng)物的可變淋巴細(xì)胞受體(VLR)的氨基酸序列;

評(píng)估該可變淋巴細(xì)胞受體中的哪些氨基酸空間最接近該結(jié)合的分子和/或提供了離子相互作用和/或氫鍵合和/或向提供該可變淋巴細(xì)胞受體中的靶氨基酸的結(jié)合的分子提供了范德華力;

提供了與該可變淋巴細(xì)胞受體(VLR)氨基酸序列具有大于20%或更高序列一致性的一種已知人氨基酸序列;

取代在該已知的人氨基酸序列內(nèi)可變淋巴細(xì)胞受體中的靶氨基酸和靶氨基酸周?chē)淖銐驍?shù)量的氨基酸,來(lái)提供被構(gòu)造來(lái)特異性結(jié)合該分子的經(jīng)修飾的人氨基酸序列;并且

從一種重組核酸表達(dá)該經(jīng)修飾的人氨基酸序列。

2.如權(quán)利要求1所述的分離的經(jīng)修飾的人氨基酸序列,其中該可變淋巴細(xì)胞受體是一種七鰓鰻可變淋巴細(xì)胞受體B(VLRB)。

3.如權(quán)利要求1所述的分離的經(jīng)修飾的人氨基酸序列,其中該已知的人氨基酸序列是人富亮氨酸重復(fù)受體。

4.如權(quán)利要求1所述的分離的經(jīng)修飾的人氨基酸序列,其中該已知的人氨基酸序列是Slit家族蛋白(Slit 1、2、和3)、CD42b、或Nogo-66。

5.如權(quán)利要求1所述的分離的經(jīng)修飾的人氨基酸序列,其中該分子是一種病毒抗原或微生物抗原。

6.如權(quán)利要求5所述的分離的經(jīng)修飾的人氨基酸序列,其中該病毒抗原或微生物抗原是炭疽芽孢桿菌、流行性感冒、或HIV-1抗原。

7.如權(quán)利要求1所述的分離的經(jīng)修飾的人氨基酸序列,其中該分子是是一種腫瘤相關(guān)抗原。

8.如權(quán)利要求1所述的分離的經(jīng)修飾的人氨基酸序列,其中該分子與正?;驉盒匀思?xì)胞特異性有關(guān)。

9.如權(quán)利要求8所述的分離的經(jīng)修飾的人氨基酸序列,其中該正?;驉盒匀思?xì)胞是一種O型血紅細(xì)胞、B細(xì)胞白血病細(xì)胞、或B淋巴瘤細(xì)胞系。

10.一種包括如權(quán)利要求1所述的分離的經(jīng)修飾的人氨基酸序列的重組載體。

11.一種包括如權(quán)利要求12所述的載體的表達(dá)系統(tǒng)。

12.一種融合蛋白,包括如權(quán)利要求1所述的經(jīng)修飾的人氨基酸序列和Fc序列。

13.一種包括如權(quán)利要求13所述的融合蛋白的重組載體。

14.一種包括如權(quán)利要求14所述的載體的表達(dá)系統(tǒng)。

15.一種包括一個(gè)或多個(gè)序列的重組多肽

這些序列包括X L XLXX NKLQTIAKGTFSPLRAIQ X M X LXX(SEQ ID NO:38),其中各位置處的X單獨(dú)地且獨(dú)立地是任何氨基酸,其條件是該多肽不包含以下野生型Slit2-D2序列中的至少一個(gè),這些野生型Slit2-D2序列選自(SEQ ID NO:16)LLSLYD、和(SEQ ID NO:17)TMHLAQ。

16.如權(quán)利要求16所述的重組多肽,包括一種人Fc序列。

17.具有以下序列的如權(quán)利要求16所述的重組多肽

YLDLNNNKLQTIAKGTFGTFSPLRAIQHMWLY(SEQ ID NO:66)、YLDLNNNKLQTIAKGTFGTFSPLRAIQHMWLYQ(SEQ ID NO:67)、或YLDLNNNKLQTIAKGTFGTFSPLRAIQHMWLYG(SEQ ID NO:68)。

18.如權(quán)利要求16所述的重組多肽,其能夠特異性結(jié)合漿細(xì)胞而不結(jié)合B細(xì)胞。

19.包括SEQ ID NO:56,其變體的重組多肽。

20.一種包括編碼如權(quán)利要求20所述的重組多肽的核酸的重組載體。

21.一種包括如權(quán)利要求21所述的載體的表達(dá)系統(tǒng)。

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