本申請(qǐng)要求2015年2月6日提交的國際專利申請(qǐng)PCT/CN2015/072391的優(yōu)先權(quán)。據(jù)此通過引用將上述申請(qǐng)的內(nèi)容完整地并入。發(fā)明背景丙型肝炎病毒(HCV)感染是一個(gè)嚴(yán)重的健康問題，感染HCV會(huì)導(dǎo)致慢性肝臟疾病，如肝硬化和肝癌。HCV感染人群眾多，據(jù)估計(jì)，約占全世界人口的2-15％。根據(jù)美國疾病控制中心估計(jì)，僅美國就有四百五十萬感染者。按照世界衛(wèi)生組織的統(tǒng)計(jì)，全世界有超過2億的感染者，每年至少新增300萬-400萬感染者。在感染人群中，約20％患者可以自動(dòng)清除HCV病毒，但其余患者體內(nèi)駐扎的HCV病毒將會(huì)伴隨他們一生。10-20％的慢性感染者最終發(fā)展成肝硬化或肝癌。HCV疾病為非腸道傳播，它通過污染的血液和血液制品、污染針頭、性傳播或直接由被感染或攜帶者母親傳播給其子女。當(dāng)前用于HCV感染的治療僅限于單獨(dú)使用重組干擾素α或與核苷類似物利巴韋林聯(lián)合的免疫療法，但療效有限。此外，還沒有批準(zhǔn)的HCV疫苗。因此，迫切需要能夠有效治療HCV感染的改進(jìn)藥物。本發(fā)明提供了一種有望滿足該需求的化合物。發(fā)明概述本發(fā)明提供了一種式I化合物其中，R1是芳基或雜芳基；每一個(gè)R2和R3獨(dú)立地選自于氫、烷基、雜芳基，當(dāng)R2和R3中的一個(gè)為氫或烷基時(shí)，另一個(gè)必須為雜芳基；或R2、R3與它們相連的氮原子一起組成一個(gè)5‐7元的雜環(huán)，且可含有1‐2個(gè)除與R2、R3相連的氮原子外的雜原子，所述的雜原子獨(dú)立地選自于O、S或NR6；所述的R6為氫、烷基、?；⒎蓟螂s芳基；所述的雜環(huán)可以在它的碳原子上被烷基、鹵素或烷氧羰基取代；或R4是氫或烷基；R5是氫或烷基；X是一個(gè)鍵、O、NH或N‐烷基；和n是1、2、3或4。在本發(fā)明的一方面，R1是芳基或雜芳基。例如，R1可以是苯基，所述苯基可被1‐3個(gè)獨(dú)立選自于鹵素或烷基的取代基取代。在本發(fā)明的一方面，R1是苯基或萘基。在本發(fā)明的另一方面，R2是氫，R3是雜芳基。例如，R3可以是吡啶或異喹啉。R3的具體例子包括在本發(fā)明的一方面，R2、R3與它們相連的氮原子一起組成一個(gè)5‐6元的雜環(huán)，且可含有1‐2個(gè)除與R2、R3相連的氮原子外的雜原子，所述的雜原子獨(dú)立地選自于O、S或NR6；所述的R6為氫、烷基或酰基；所述的雜環(huán)可以在它的碳原子上被1個(gè)或多個(gè)烷氧羰基取代；具體的例子中雜環(huán)可以是在本發(fā)明的一方面，R2、R3與它們相連的氮原子一起組成一個(gè)取代或未取代的雜芳基；具體的例子中雜芳基可以是在本發(fā)明的另一方面，R4是甲基或乙基。在本發(fā)明的另一方面，R5是甲基、乙基或異丙基。在本發(fā)明的另一方面，X是一個(gè)鍵、O、NH或N‐烷基。在本發(fā)明的另一方面，磷原子是手性的，且至少有90％(如至少97％)的S立體異構(gòu)體。在本發(fā)明的另一方面，n是1、2、3或4。在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明中的化合物是式I化合物藥學(xué)上可接受的鹽。這種鹽的例子包括醋酸鹽、4‐甲苯磺酸鹽、氫溴酸鹽或鹽酸鹽。本發(fā)明中的化合物的具體例子包括但不限于，((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(2‐嗎啡啉乙酰氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(2‐嗎啡啉乙酰氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯4‐甲基苯磺酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯4‐甲基苯磺酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯4‐甲基苯磺酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(二甲基氨基)丁酸酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(吡啶‐2‐位氨基)丁酸酯鹽酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(異喹啉‐1‐位氨基)丁酸酯鹽酸鹽；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(7H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐7‐位)乙酰氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)丁酸酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙酰氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐((3‐嗎啡啉丙酰)氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐纈氨酸甲酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐乙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(((3‐嗎啡啉丙基)氨基甲酰)氧)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(((3‐嗎啡啉丙基)氨基甲酰)氧)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸乙酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(((2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙基)氨基甲酰)氧)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯鹽酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯氫溴酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯甲磺酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯鹽酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯氫溴酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯甲磺酸鹽；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙酰氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯鹽酸鹽；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙酰氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯氫溴酸鹽；和((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙酰氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯甲磺酸鹽。在另一方面，本發(fā)明提供了一種包含至少一個(gè)上述的化合物與藥學(xué)上可接受的基質(zhì)組成的藥用制劑。所述的藥用制劑可用于治療人類HCV感染。在另一方面，本發(fā)明還提供了治療HCV感染的方法，該方法包括給予HCV感染病人一種本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。一方面，該方法還可進(jìn)一步給予HCV感染病人另一種不同于本發(fā)明化合物的其他抗病毒試劑。在另一方面，本發(fā)明還與本發(fā)明中的化合物用途有關(guān)，用于制造一種治療HCV感染的藥物。相比于已經(jīng)報(bào)道的可潛在治療HCV感染的其他化合物，本發(fā)明中的化合物有意想不到的優(yōu)勢(shì)，在臨床應(yīng)用上本發(fā)明中的化合物是更理想的。這些優(yōu)勢(shì)包括但不限于：能形成藥學(xué)上可接受的鹽使得化合物的水溶性和穩(wěn)定性提高、顯示了類似的或更好的藥學(xué)作用，因此本發(fā)明中的化合物更容易做成制劑用于臨床治療。本發(fā)明的具體描述如果無另外說明，這里引用的所有術(shù)語具有與那些本領(lǐng)域的熟練人員理解本發(fā)明相同的含義。如本文所使用的用語“一(a)”或“一(an)”實(shí)體是指一個(gè)或多個(gè)所述實(shí)體，例如，一化合物是指一個(gè)或多個(gè)化合物或者至少一個(gè)化合物。同樣地，術(shù)語“(a)”(或“an”)、“一個(gè)或多個(gè)”以及“至少一個(gè)”在本文可互換使用。如無其他與特定的含義相背的，以復(fù)數(shù)形式表示的詞語也包括一個(gè)單數(shù)詞語的含義。例如，詞語“化合物”也指“一個(gè)化合物”，除非一個(gè)單數(shù)可能與特定的含義相背。如本文所使用的術(shù)語“任選的”或“任選地”是指其后描述的事件或情況可以出現(xiàn)但不是必須出現(xiàn)，并且該描述包括該事件或情況出現(xiàn)的例子和不出現(xiàn)的例子。例如，“任選的鍵”是指該鍵可以存在或不存在，并且該鍵包括單鍵、雙鍵或三鍵。又比如，一個(gè)“任選取代的”基團(tuán)是指該基團(tuán)可以被適當(dāng)?shù)娜〈〈虿槐蝗〈?。術(shù)語“P*”是指磷原子是手性的，且它有一個(gè)相應(yīng)的Cahn‐Ingold‐Prelog命名的“R”或“S”，它有可接受的常見含義。如本文所使用的術(shù)語“純化的”是指一個(gè)給定的化合物的純度。例如，當(dāng)給定化合物是組分中的一個(gè)主要成分時(shí)該化合物被純化，意即至少50％重量比純度。因此，“純化的”包括至少50％重量比純度，至少60％重量比純度，至少70％純度，至少80％純度，至少85％純度，至少90％純度，至少92％純度，至少94％純度，至少96％純度，至少97％純度，至少98％純度，至少99％純度，至少99.5％純度，至少99.9％純度，其中“基本上純的”包括至少97％純度，至少98％純度，至少99％純度，至少99.5％純度，至少99.9％純度。如本文所使用的術(shù)語“代謝物”是指給予一個(gè)客體需要的藥物后在體內(nèi)產(chǎn)生的一個(gè)化合物。如本文所使用的術(shù)語“大約”(也可表示為～)是指援引的數(shù)值是一個(gè)在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)誤差內(nèi)變化的部分范圍。如本文所使用的術(shù)語“基本上無水的”是指一種物質(zhì)最多含10％的水，優(yōu)選最多1％的水，更優(yōu)選最多0.5％的水，最優(yōu)選最多0.1％的水，所述百分?jǐn)?shù)指重量百分?jǐn)?shù)。如本文所使用的術(shù)語“前藥”是指一個(gè)藥物分子的生物轉(zhuǎn)化衍生物，它在體內(nèi)經(jīng)過酶或化學(xué)的轉(zhuǎn)化釋放出活性母藥，然后活性母藥發(fā)揮期望的藥效。關(guān)于前藥也有其他的描述，例如J.Rautio等的文獻(xiàn)(NatRevDrugDiscov.,2008Mar；7(3):255‐70)，據(jù)此通過引用將上述文獻(xiàn)完整地并入。一種溶劑或反相溶劑(在反應(yīng)、結(jié)晶等中使用或晶格和/或吸收的溶劑)包括至少一個(gè)C1‐C8的醇，C2‐C8的醚，C3‐C7的酮，C3‐C7的酯，C1‐C2的氯碳化合物，C2‐C7的腈，其他溶劑，C5‐C12的飽和碳?xì)浠衔?，C6‐C12的芳基碳?xì)浠衔铩1‐C8的醇是指一種直鏈/支鏈和/或環(huán)狀/非環(huán)狀的有那樣的數(shù)量的碳的醇。C1‐C8的醇包括但不限于，甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、異丁醇、己醇和環(huán)己醇。C2‐C8的醚指一種直鏈/支鏈和/或環(huán)狀/非環(huán)狀的有那樣的數(shù)量的碳的醚。C2‐C8的醚包括但不限于，二甲醚、二乙醚、二異丙醚、二丁醚、甲基叔丁基醚(MTBE)，四氫呋喃和二氧六環(huán)。C3‐C7的酮指一種直鏈/支鏈和/或環(huán)狀/非環(huán)狀的有那樣的數(shù)量的碳的酮。C3‐C7的酮包括但不限于，丙酮、甲基乙基酮、丙酮、丁酮、甲基叔丁基酮、甲基丁基酮和環(huán)己酮。C3‐C7的酯指一種直鏈/支鏈和/或環(huán)狀/非環(huán)狀的有那樣的數(shù)量的碳的酯。C3‐C7的酯包括但不限于，乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸正丁酯等。C1‐C2的氯碳化合物指一種有那樣的數(shù)量的碳的氯碳化合物。C1‐C2的氯碳化合物包括但不限于，氯仿、二氯甲烷(DCM)、四氯化碳、1,2‐二氯乙烷和四氯乙烷。C2‐C7的腈指一種直鏈/支鏈和/或環(huán)狀/非環(huán)狀的有那樣的數(shù)量的碳的腈。C2‐C7的腈包括但不限于，乙腈、丙腈等。其他的溶劑指通常在有機(jī)化學(xué)中使用的溶劑，包括但不限于，二乙二醇、二甘醇二甲醚(二乙二醇二甲醚)、1,2‐二甲氧基‐乙烷、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙二醇、丙三醇、六甲基磷酰胺、六甲基亞磷酰三胺、N‐甲基‐2‐吡咯烷酮、硝基甲烷、吡啶、三乙胺和乙酸。C5‐C12的飽和碳?xì)浠衔镏敢环N直鏈/支鏈和/或環(huán)狀/非環(huán)狀的碳?xì)浠衔?。C5‐C12的飽和碳?xì)浠衔锇ǖ幌抻?，正戊烷、石油?石油英)、正己烷、正庚烷、環(huán)己烷和環(huán)庚烷。C6‐C12的芳基碳?xì)浠衔镏溉〈臀慈〈挠斜交谄涔羌苌系奶細(xì)浠衔?。?yōu)選的碳?xì)浠衔锇ū?、二甲苯、甲苯、氯苯、鄰二甲苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯，更優(yōu)選的是甲苯。如本文所使用的術(shù)語“鹵素”包括氯、溴、碘和氟。術(shù)語“封端基團(tuán)”指表現(xiàn)出下列特點(diǎn)的化學(xué)基團(tuán)。“基團(tuán)”衍生自一個(gè)“保護(hù)的化合物”。該基團(tuán)對(duì)伯羥基的選擇性超過仲羥基、可以在與氨基磷酸酯(pH2‐8)的穩(wěn)定性一致的條件下加上并賦予所得產(chǎn)物顯著不同的物理性質(zhì)，因此，允許3’‐磷酰胺‐5’‐新基團(tuán)的產(chǎn)品更容易從未反應(yīng)的目標(biāo)化合物中分離。這個(gè)基團(tuán)必須選擇性的反應(yīng)并以良好的收率得到保護(hù)的產(chǎn)物，且該產(chǎn)物在設(shè)計(jì)的反應(yīng)中是穩(wěn)定的(見ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,3nded.T.W.GreeneandP.G.M.Wuts,JohnWiley&Sons,NewYork,N.Y.,1999)?；鶊F(tuán)的例子包括但不限于：苯甲?；?、乙?；?、苯基取代的苯甲?；?、四氫吡喃、三苯甲基、DMT(4,4’‐二甲氧基三苯甲基)、MMT(4‐單甲氧基三苯甲基)、三甲氧基三苯甲基、苯基呫噸基(9‐苯基氧雜蒽‐9‐位)、苯基硫雜呫噸基(9‐苯基硫雜蒽‐9‐位)或9‐(p‐甲氧基苯基)氧雜蒽‐9‐位(MOX)等；C(O)‐烷基、C(O)Ph、C(O)芳基、CH2O‐烷基、CH2O‐芳基、SO2‐烷基、SO2‐芳基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基?？s醛，如MOM或THP等等被認(rèn)為是可能的基團(tuán)。氟代化合物也是涵蓋的，目前它們能夠連接到化合物上且能夠通過傳遞一個(gè)氟固相提取基質(zhì)選擇性脫除。具體例子包括氟化三苯甲基類似物、三苯甲基類似物1‐[4‐(1Η,1H,2H,2H‐全氟癸基)苯基]‐1,1‐二苯基甲醇。還涵蓋三苯甲基、BOC、FMOC、CBz等其他氟代類似物?；酋Ｂ?如對(duì)甲苯磺酰氯)可在5’位置選擇性反應(yīng)?？蛇x擇性形成酯諸如乙酸酯和苯甲酸酯。二羧基酸酐諸如琥珀酸酐和其衍生物可與游離羧酸產(chǎn)生酯鍵，這種例子包括但不限于，草酰基、丙二酰基、琥珀酰基、戊二?；?、己二酰基、庚二酰基、辛二?；?、壬二酰基、癸二?；?、鄰苯二甲?；?、異鄰苯二甲?；?、對(duì)鄰苯二甲酰基等。游離羧酸極大地增加了極性且還可將其用于將反應(yīng)產(chǎn)物萃取到溫和堿性水相(如碳酸氫鈉溶液)中。磷酰胺基團(tuán)在酸性介質(zhì)中是相對(duì)穩(wěn)定的，因此還可使用需要酸性反應(yīng)條件的基團(tuán)(如四氫吡喃基)。術(shù)語“保護(hù)基團(tuán)”衍生自“保護(hù)化合物”，具有其常見和普通的含義，意即至少一個(gè)保護(hù)基或封端基結(jié)合到至少一個(gè)允許化學(xué)修飾至少一個(gè)其他官能團(tuán)的官能團(tuán)(如‐OH、‐NH2等)上。保護(hù)基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于，苯甲?；?、乙酰基、苯基取代的苯甲酰基、四氫吡喃基、三苯甲基、DMT(4,4’‐二甲氧基三苯甲基)、MMT(4‐單甲氧基三苯甲基)、三甲氧基三苯甲基、苯基呫噸基(9‐苯基氧雜蒽‐9‐位)、苯基硫雜呫噸基(9‐苯基硫雜蒽‐9‐位)或9‐(p‐甲氧基苯基)氧雜蒽‐9‐位(MOX)等；C(O)‐烷基、C(O)Ph、C(O)芳基、C(O)O(低級(jí)烷基)、C(O)O(低級(jí)亞烷基)芳基(如，‐C(O)OCH2Ph)、C(O)O芳基、CH2O‐烷基、CH2O‐芳基、SO2‐烷基、SO2‐芳基、包含至少一個(gè)硅原子的保護(hù)基團(tuán)，諸如叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、Si(低級(jí)燒基)2OSi(低級(jí)燒基)2OH(如，‐Si(iPr)2OSi(iPr)2OH)。如本文所用的術(shù)語“保護(hù)的化合物”，如無另外指明，指含有“保護(hù)基團(tuán)”并且能夠與含有需被保護(hù)的官能團(tuán)的化合物反應(yīng)的化合物。如本文所用的術(shù)語“離去基團(tuán)”，具有對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言相同的意思(AdvancedOrganicChemistry:reactions,mechanismsandstructure—FourthEditionbyJerryMarch,JohnWileyandSonsEd.；1992pages351‐357)，它是底物分子的一部分并與之連接的基團(tuán)；在底物分子進(jìn)行取代反應(yīng)的反應(yīng)中(例如親核試劑)，離去基團(tuán)隨之被取代。離去基團(tuán)的例子包括但不限于：鹵素(F、Cl、Br和I)，優(yōu)選Cl、Br或I；甲苯磺酸酯基、甲磺酸酯基、三氟甲基磺酸酯基、乙酸酯基、、樟腦磺酸酯基、芳氧基和至少一個(gè)吸電子基團(tuán)取代的芳氧基(例如對(duì)硝基苯氧基、2‐氯苯氧基、4‐氯苯氧基、2,4‐二硝基苯氧基、五氟苯氧基等)等。術(shù)語“吸電子基團(tuán)”此處具有其通常含義。吸電子基團(tuán)的例子包括但不限于鹵素、‐NO2、‐C(O)(低級(jí)烷基)、‐C(O)(芳基)‐C(O)O(低級(jí)烷基)、C(O)O(芳基)等。如本文所用的術(shù)語“堿性試劑”是能夠使羥基去質(zhì)子化的化合物。堿性試劑的例子包括但不限于(低級(jí)烷)氧化物((低級(jí)烷基)OM)并聯(lián)合醇溶劑，其中(低級(jí)烷)氧化物包括但不限于MeO‐、EtO‐、nPrO‐、iPrO‐、tBuO‐、iAmO‐(異戊氧化物)等，且其中M是堿金屬陽離子，例如Li+，Na+,K+等。醇溶劑包括(低級(jí)烷基)OH，例如MeOH、EtOH、nPrOH、iPrOH、tBuOH、iAmOH等。還可以使用非‐烷氧基堿，例如氫化鈉、六甲基二甲硅基胺鈉、六甲基二甲硅基胺鋰、二異丙基酰胺鋰、氫化鈣、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、DBU、DBN、Grignard試劑，例如(低級(jí)烷基)Mg(鹵素)，其包括但不限于MeMgCl、MeMgBr、tBuMgCl、tBuMgBr等。術(shù)語“堿”(包括術(shù)語“堿性試劑”)，是指能夠?qū)⒑|(zhì)子的化合物去質(zhì)子化的化合物，即Bronsted堿。除了上述援引例子，堿的其他例子包括但不限于吡啶、三甲基吡啶、2,6‐(低級(jí)烷基)‐吡啶、二甲基‐苯胺、咪唑、N‐甲基‐咪唑、吡唑、N‐甲基‐吡唑、三乙胺、二異丙基乙基胺等。術(shù)語“吸電子基團(tuán)”具有其平常含義。吸電子基團(tuán)的例子包括但不限于鹵素(F、Cl、Br或I)、‐NO2、‐C(O)(低級(jí)烷基)、‐C(O)(芳基)、‐C(O)O(低級(jí)烷基)、‐C(O)O(芳基)等。術(shù)語“共晶”包括4、RP‐4或SP‐4與鹽結(jié)合的共晶，所述鹽包括藥學(xué)上可接受的鹽。如本文所用的術(shù)語“鹽”是指含陽離子和陰離子的化合物，其可通過可接受質(zhì)子部位的質(zhì)子化和/或可供質(zhì)子部位的去質(zhì)子化來產(chǎn)生。值得注意的是，可接受質(zhì)子部位的質(zhì)子化導(dǎo)致形成陽離子類物質(zhì)，其電荷通過生理陰離子的存在而平衡，而可供質(zhì)子部位的去質(zhì)子化導(dǎo)致形成陰離子類物質(zhì)，其電荷通過生理陽離子的存在而平衡。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”指鹽是藥學(xué)上可接受的。藥學(xué)上可接受的鹽的例子包括但不限于：(1)酸加成鹽，與無機(jī)酸形成，如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等等；或與有機(jī)酸形成，如羥基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、3‐(4‐羥基苯甲?；?苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2‐乙烷‐二磺酸、2‐羥基乙烷磺酸、苯磺酸、4‐氯苯磺酸、2‐萘磺酸、4對(duì)甲苯磺酸、樟腦酸、十二烷基硫酸、葡萄糖酸、谷氨酸、水楊酸、順式‐已二烯二酸等等；或(2)堿加成鹽，和上述無機(jī)酸的任一種的共軛堿形成，其中共軛堿包含選自Na+、K+、Mg2+、Ca2+、NHgR”’4‐g+中的陽離子組分，其中R”’是C1‐3烷基，g是選自0、1、2、3或4的整數(shù)。應(yīng)該理解，所有涉及藥學(xué)上可接受的鹽都包括相同酸加成鹽的本文中所定義的溶劑加成形式(溶劑化物)或晶體形式(多晶型物)。術(shù)語“烷基”是指含有1至30個(gè)碳原子的非支鏈或支鏈、飽和、單價(jià)烴基。術(shù)語“C1‐M烷基”是指包含1至M個(gè)碳原子的烷基，其中M是具有下列數(shù)值的整數(shù)：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30。術(shù)語“C1‐4烷基”是指含有1至4個(gè)碳原子的烷基。術(shù)語“低級(jí)烷基”表示包含1至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴基。本文中使用的“C1‐20烷基”是指包含1至20個(gè)碳原子的烷基。本文中使用的“C1‐10烷基”是指包含1至10個(gè)碳原子的烷基。烷基的例子包括但不限于低級(jí)烷基，包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基或戊基、異戊基、新戊基、己基、庚基和辛基。術(shù)語“(芳)烷基”或“(雜芳基)烷基”是指烷基任選地分別被芳基或雜芳基取代。術(shù)語“更低級(jí)的烷基”是指包含1至8個(gè)碳原子的烷基。這里所用的術(shù)語烷氧基指“烷基‐O‐”。術(shù)語“烯基”指具有一個(gè)或兩個(gè)烯雙鍵、優(yōu)選一個(gè)烯雙鍵的、具有2至10個(gè)碳原子的不飽和烴鏈基團(tuán)。術(shù)語“C2‐N烯基”是指包含2至N個(gè)碳原子的烯基，其中N是具有下列數(shù)值的整數(shù)：3、4、5、6、7、8、9或10。術(shù)語“C2‐10烯基”是指包含2至10個(gè)碳原子的烯基。術(shù)語“C2‐4烯基”是指包含2至4個(gè)碳原子的烯基，例如包括但不限于乙烯基、1‐丙烯基、2‐丙烯基(烯丙基)或2‐丁烯基(巴豆基)。本文中使用的術(shù)語“雜環(huán)”是指至少具有一個(gè)選自于O、S、N或P的雜原子的單環(huán)或多環(huán)化合物。雜環(huán)化合物可以是芳香族的或非芳香族的、飽和的或不飽和的；它包括單環(huán)的3‐8元環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)融合環(huán)系統(tǒng)。例如，雜環(huán)化合物包括環(huán)乙胺、環(huán)氧乙烷、硫雜丙環(huán)、氮丙啶、環(huán)氧乙烯、噻丙烯、氮雜環(huán)丁烷、氧雜環(huán)丁烷、硫雜環(huán)丁烷、氮雜環(huán)丁烯、氧雜環(huán)丁烯、硫雜環(huán)丁烯、吡咯烷、氧雜環(huán)戊烷、硫雜環(huán)戊烷、吡咯、呋喃、噻吩、哌啶、氧雜環(huán)己烷、硫雜環(huán)己烷、吡啶、吡喃、噻喃、高哌啶、氧雜環(huán)庚烷、硫雜環(huán)庚烷、氮雜環(huán)庚三烯、氧雜環(huán)庚三烯、硫雜環(huán)庚三烯、吲哚、喹諾酮、咔唑、吖啶和二苯并氮雜卓。如無另外說明，本文中使用的術(shù)語“芳基”是指取代或未取代的單環(huán)或多環(huán)融合系統(tǒng)，如苯基(Ph)、聯(lián)苯基或萘基，術(shù)語芳基，如無特別說明，包括取代或未取代的芳基(苯基或取代苯基)。芳基可被一或多個(gè)選自以下的部分取代：羥基、F、Cl、Br、I、氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸基、硫酸酯基、膦酸基、磷酸酯基以及膦酸酯基，其根據(jù)需要可保護(hù)或不保護(hù)，如本領(lǐng)域的技術(shù)人員所知，例如，如T.W.Greene及P.G.M.Wuts，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”第三版，JohnWiley&Sons，1999中所指導(dǎo)。本文中使用的術(shù)語“雜芳基”是指含碳原子、氫原子以及一個(gè)或多個(gè)雜原子(如1‐3個(gè)雜原子)的一個(gè)單環(huán)或多環(huán)的芳香環(huán)，其中雜原子獨(dú)立選自于氮、氧和硫。如本領(lǐng)域的技術(shù)人員所知，雜芳環(huán)相比它們的全碳環(huán)有更少的芳香特征。雜芳基的說明性例子包括但不限于吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡唑基、三嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、(1,2,3,)‐和(1,2,4)‐三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異噁唑、噻唑和噁唑。雜芳基可以是未取代的也可以被一個(gè)或兩個(gè)適合的取代基取代。在本發(fā)明的實(shí)例中，雜芳基是一個(gè)單環(huán)，其中該環(huán)含有2‐5個(gè)碳原子和1‐3個(gè)雜原子，此處引用為“(C2‐C5)雜芳基”。除非另有說明，本文中使用的術(shù)語"芳氧基"是指取代或未取代的苯氧基(PhO‐)、對(duì)苯基‐苯氧基(p‐Ph‐PhO‐)或萘氧基，優(yōu)選術(shù)語芳氧基是指取代或未取代的苯氧基。芳氧基可被選自下列的一個(gè)或多個(gè)部分所取代：羥基、F、Cl、Br、I、‐C(O)(低級(jí)烷基)、‐C(O)O(低級(jí)烷基)、氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸基、硫酸酯基、膦酸基、磷酸酯基以及膦酸酯基，根據(jù)需要不保護(hù)或保護(hù)，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，例如在T.W.GreeneandP.G.Μ.Wuts,“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”第三版，JohnWiley&Sons，1999中所指導(dǎo)。術(shù)語“制劑”或“劑型”特指包括活性化合物的固體和液體配方且本領(lǐng)域的技術(shù)人員將了解活性成分可以不同制劑形式存在，這取決于所需劑量及藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。本文中所用的術(shù)語“賦形劑”指的是用于制備藥物組合物的化合物，一般安全無毒且生物學(xué)或其他方面都不需要，且包括為獸用及人類藥用所接受的賦形劑。術(shù)語“結(jié)晶的”指的是SP‐4或RP‐4的固體樣品當(dāng)通過X射線粉末衍射或單晶X射線技術(shù)測(cè)定時(shí)具有結(jié)晶特征的情況。術(shù)語“晶體樣”指的是SP‐4或Rp‐4的固體樣品當(dāng)通過一種手段(例如肉眼或通過光學(xué)或偏振顯微鏡)測(cè)定時(shí)具有結(jié)晶特征，但當(dāng)通過另一手段(例如X射線粉末衍射)測(cè)定時(shí)不具有結(jié)晶特征的情況。通過肉眼或通過光學(xué)或偏振顯微鏡肉眼確定固體樣品的結(jié)晶度的方法公開于USP<695>和<776>中，兩篇文獻(xiàn)皆以引用方式并入。呈“晶體樣”的SP‐4或RP‐4的固體樣品在某些條件下可變?yōu)榫偷模?dāng)經(jīng)受其他條件時(shí)可變成非晶型的。術(shù)語“無定形的”是指其中Sp‐4或RP‐4的固體樣品既不是晶體的也不是晶體樣的情形。下述實(shí)施例是為了更好的闡釋本發(fā)明的某些具體體現(xiàn)而不能被解釋為以任何方式限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1.制備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(2‐嗎啡啉乙酰氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯(I‐1)化合物1(0.30g,0.57mmol)，化合物2(0.12g,0.68mmol)和DiPEA(0.22g,1.70mmol)溶解在DCM(15mL)中。室溫下攪拌5分鐘后，加入TBTU(0.22g,0.68mmol)，混合物繼續(xù)攪拌20hrs。旋干溶劑，EA(100mL)萃取，合并的有機(jī)層依次用水洗(2x50mL)和飽和食鹽水洗(50mL)，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮后柱層析純化得到目標(biāo)產(chǎn)物I‐1(0.28g,76％)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.59(s,1H),7.50(d,J＝8.4Hz,1H),7.34(t,J＝8.0Hz,2H),7.23(d,J＝8.4Hz,2H),7.18(t,J＝7.2Hz,1H),6.19(d,J＝18.8Hz,1H),5.58(d,J＝8.0Hz,1H),5.24(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.0Hz,1H),5.05‐4.95(m,1H),4.55‐4.50(m,1H),4.34(dd,J1＝1.2Hz,J2＝7.2Hz,1H),4.27‐4.22(m,1H),4.02‐3.92(m,1H),3.85(t,J＝10.4Hz,1H),3.75(t,J＝4.4Hz,3H),3.37(d,J＝3.6Hz,2H),2.65‐2.58(m,4H),1.40‐1.38(m,6H),1.24(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例2.制備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(2‐嗎啡啉乙酰氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯4‐甲基苯磺酸鹽(I‐2)化合物I‐1(0.500g,0.76mmol)溶解在DCM(12mL)中，然后加入對(duì)甲基苯磺酸(0.145g,0.76mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌0.5h后濃縮，重結(jié)晶得到目標(biāo)鹽(0.450g)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.71(d,J＝7.2Hz,2H),7.50(d,J＝7.2Hz,1H),7.30‐7.27(m,2H),7.21‐7.14(m,6H),6.05(brs,1H),5.63(d,J＝7.8Hz,1H),5.30(brs,1H),4.95‐4.91(m,1H),4.52‐4.28(m,3H),3.95‐3.65(m,6H),3.25‐3.08(m,2H),2.82(s,4H),2.32(s,3H),1.44‐1.35(m,6H),1.18(d,J＝6.0Hz,6H).實(shí)施例3.制備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯(I‐3)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成3‐嗎啡啉乙酸可制備得到化合物I‐3。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.43(s,1H),7.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.36(t,J＝8.0Hz,2H),7.26‐7.23(m,2H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),6.24(d,J＝18.8Hz,1H),5.54(d,J＝8.4Hz,1H),5.28(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.8Hz,1H),5.05‐4.99(m,1H),4.60‐4.55(m,1H),4.34(d,J＝9.6Hz,1H),4.30‐4.25(m,1H),4.03‐3.95(m,1H),3.87(t,J＝6.4Hz,1H),3.69‐3.67(m,4H),2.74‐2.70(m,2H),2.65‐2.62(m,2H),2.48(br,4H),1.40‐1.37(m,6H),1.26(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例4.制備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯4‐甲基苯磺酸鹽(I‐4)化合物I‐3(0.500g,0.75mmol)溶解在DCM(12mL)中，然后加入對(duì)甲基苯磺酸(0.142g,0.75mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌0.5h后濃縮，重結(jié)晶得到目標(biāo)鹽(0.465g)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:10.85(s,1H),7.74(d,J＝8.0Hz,2H),7.48(t,J＝8.4Hz,1H),7.34(t,J＝8.4Hz,2H),7.30‐7.14(m,5H),6.21‐6.06(m,1H),5.67(d,J＝8.4Hz,1H),5.36‐5.22(m,1H),5.03‐4.93(m,1H),4.56‐4.32(m,3H),4.13‐3.85(m,6H),3.60‐3.43(m,6H),3.02‐2.99(m,2H),2.35(s,3H),1.39‐1.32(m,6H),1.21(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例5.制備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯(I‐5)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成4‐嗎啡啉乙酸可制備得到化合物I‐5。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.53(d,J＝8.4Hz,1H),7.33(t,J＝7.6Hz,2H),7.23‐7.19(m,3H),6.21(d,J＝18.4Hz,1H),5.57(d,J＝8.0Hz,1H),5.21(dd,J1＝8.8Hz,J2＝20.0Hz,1H),5.04‐4.97(m,1H),4.56‐4.51(m,1H),4.33‐4.30(m,1H),4.26‐4.21(m,1H),4.06‐3.96(m,1H),3.72‐3.70(m,4H),2.48‐2.46(m,4H),2.42‐2.36(m,2H),1.89‐1.81(m,2H),1.38‐1.32(m,6H),1.24(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例6.制備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯4‐甲基苯磺酸鹽(I‐6)化合物I‐5(0.277g,0.40mmol)溶解在DCM(10mL)中，然后加入對(duì)甲基苯磺酸(0.077g,0.40mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌0.5h后濃縮，重結(jié)晶得到目標(biāo)鹽I‐6(0.310g,89％)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:10.44(s,1H),9.05(s,1H),7.73(d,J＝8.0Hz,2H),7.50(t,J＝8.4Hz,1H),7.33(t,J＝8.4Hz,2H),7.30‐7.11(m,5H),6.14(d,J＝16.4Hz,1H),5.68(d,J＝8.0Hz,1H),5.30‐5.20(m,1H),4.99‐4.96(m,1H),4.45‐4.25(m,4H),3.95‐3.87(m,5H),3.56‐3.47(m,2H),3.21‐3.10(m,2H),2.83‐2.69(m,2H),2.51‐2.34(m,2H),2.25(s,3H),2.12‐2.10(m,2H),1.37‐1.31(m,6H),1.21(d,J＝5.6Hz,6H).實(shí)施例7.制備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(二甲基氨基)丁酸酯(I‐7)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成4‐(二甲基氨基)丁酸可制備得到化合物I‐7。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.35(t,J＝7.2Hz,2H),7.23(t,J＝8.4Hz,2H),7.19(d,J＝7.2Hz,1H),6.22(d,J＝18.8Hz,1H),5.54(d,J＝8.0Hz,1H),5.22(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.4Hz,1H),5.03‐4.97(m,1H),4.56‐4.52(m,1H),4.32‐4.31(m,1H),4.26‐4.21(m,1H),4.13‐4.11(m,1H),4.08‐4.03(m,1H),4.00‐3.95(m,1H),2.50(t,J＝7.2Hz,2H),2.42‐2.36(m,3H),2.26(s,6H),1.89‐1.81(m,2H),1.37‐1.32(m,6H),1.23(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例8.制備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(吡啶‐2‐位氨基)丁酸酯鹽酸鹽(I‐8)按照合成化合物I‐1和化合物I‐2的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成4‐((叔丁氧羰基)(吡啶‐2‐位)氨基)丁酸、對(duì)甲基苯磺酸換成鹽酸氣可制備得到化合物I‐8。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.00(brs,1H),7.66‐7.64(m,1H),7.55(d,J＝8.0Hz,1H),7.33(t,J＝7.6Hz,2H),7.24(t,J＝8.4Hz,2H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),7.02(dd,J1＝5.6Hz,J2＝6.8Hz,1H),6.22(d,J＝18.4Hz,1H),5.47(dd,J1＝1.2Hz,J2＝20.8Hz,1H),5.20(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.8Hz,1H),5.03‐4.94(m,1H),4.57‐4.54(m,1H),4.31‐4.29(m,1H),4.27‐4.22(m,1H),4.01‐3.98(m,2H),3.96‐3.88(m,1H),2.51(t,J＝8.4Hz,2H),2.05‐1.96(m,2H),1.38‐1.32(m,6H),1.22(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例9.制備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(異喹啉‐1‐位氨基)丁酸酯鹽酸鹽(I‐9)按照合成化合物I‐1和化合物I‐2的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成4‐((叔丁氧羰基)(異喹啉‐1‐位)氨基)丁酸、對(duì)甲基苯磺酸換成鹽酸氣可制備得到化合物I‐9。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.38(d,J＝6.0Hz,1H),8.08(d,J＝1.6Hz,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,1H),7.86(d,J＝8.0Hz,1H),7.72‐7.68(m,1H),7.63‐7.59(m,2H),7.55(d,J＝8.0Hz,1H),7.33(t,J＝8.8Hz,2H),7.23(t,J＝8.8Hz,2H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),6.21(d,J＝18.4Hz,1H),5.44‐5.42(m,1H),5.21‐5.13(m,1H),5.01‐4.94(m,1H),4.56‐4.52(m,1H),4.29‐4.24(m,2H),4.10‐4.07(m,1H),4.01‐3.93(m,2H),2.60‐2.57(m,2H),2.00‐1.98(m,2H),1.38‐1.34(m,6H),1.21(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例10.制備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(7H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐7‐位)乙酰氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯(I‐10)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成2‐(7H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐7‐位)乙酸可制備得到化合物I‐10。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.59(brs,1H),7.49(d,J＝8.0Hz,1H),7.31(t,J＝8.4Hz,2H),7.23‐7.17(m,3H),6.20(d,J＝18.4Hz,1H),5.71(d,J＝7.6Hz,1H),5.03‐4.97(m,1H),4.56‐4.51(m,1H),4.47‐4.43(m,1H),4.36‐4.30(m,1H),4.15‐4.09(m,1H),3.98‐3.90(m,2H),1.40‐1.35(m,6H),1.24(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例11.制備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)丁酸酯(I‐11)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成4‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)丁酸可制備得到化合物I‐11。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.73(brs,1H),8.30(dd,J1＝4.8Hz,J2＝1.6Hz,1H),7.91(dd,J1＝1.6Hz,J2＝8.0Hz,1H),7.54(d,J＝8.0Hz,1H),7.34(t,J＝8.0Hz,2H),7.23‐7.21(m,3H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(dd,J1＝4.8Hz,J2＝8.0Hz,1H),6.46(d,J＝3.6Hz,1H),6.22(d,J＝18.4Hz,1H),5.55(d,J＝8.0Hz,1H),5.23(dd,J1＝8.8Hz,J2＝20.4Hz,1H),5.02‐4.92(m,1H),4.57‐4.53(m,1H),4.40‐4.36(m,2H),4.29‐4.24(m,2H),4.13‐4.08(m,1H),4.03‐3.93(m,1H),2.44(t,J＝6.8Hz,2H),2.26‐2.20(m,2H),1.38‐1.35(m,6H),1.21(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例12.制備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙酰氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯(I‐12)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙酸可制備得到化合物I‐12。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.68(brs,1H),8.29(dd,J1＝4.8Hz,J2＝1.6Hz,1H),7.93(dd,J1＝1.6Hz,J2＝7.6Hz,1H),7.47(d,J＝8.8Hz,1H),7.31(t,J＝8.0Hz,2H),7.25‐7.14(m,4H),7.09(dd,J1＝4.8Hz,J2＝8.0Hz,1H),6.54(d,J＝3.6Hz,1H),6.18(d,J＝18.4Hz,1H),5.50(d,J＝8.4Hz,1H),5.20(s,2H),4.96‐4.90(m,1H),4.53‐4.48(m,1H),4.30‐4.23(m,2H),3.94‐3.89(m,2H),1.36‐1.31(m,6H),1.17(d,J＝6.0Hz,6H).實(shí)施例13.制備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐((3‐嗎啡啉丙酰)氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐纈氨酸甲酯(I‐13)化合物I‐13按照下列流程制備：在‐50℃下向苯基二氯磷酸酯(2.005g,9.5mmol)的DCM(15mL)溶液中加入三乙胺(5.235g,51.8mmol)和五氟苯酚(1.595g,8.6mmol)的DCM(20mL)溶液。反應(yīng)液攪拌20分鐘后滴加化合物13‐1(0.980g,8.6mmo和三乙胺(0.872g,8.6mmol)的DCM(15mL)溶液。加畢繼續(xù)在‐50℃攪拌3小時(shí)。旋干溶劑，EA(50mL)萃取，合并的有機(jī)層依次用水洗(2x50mL)和飽和食鹽水洗(50mL)，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮后柱層析純化得到油狀的目標(biāo)中間體13‐2(3.100g)。0℃攪拌下，向起始原料13‐3(0.200g,0.77mmol,J.Med.Chem.2005,48,5504‐5508)的無水THF(10mL)溶液中滴加叔丁基氯化鎂(1.62mL,1.6mmol)。繼續(xù)攪拌30分鐘后，滴加中間體13‐2(0.350g,0.77mmol)的無水THF(5mL)溶液。0℃繼續(xù)攪拌1小時(shí)后自然升至室溫?cái)嚢?8小時(shí)。加入飽和氯化銨溶液(50mL)淬滅后用EA(2x50mL)萃取。合并的有機(jī)層依次用水洗、飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮后柱層析純化得到目標(biāo)化合物13‐4(0.165g,40％)?；衔?3‐4(0.165g,0.31mmol)，化合物2(0.051g,0.31mmol)和DiPEA(0.080g,0.62mmol)溶解在DCM(8mL)中。室溫下攪拌5分鐘后，加入TBTU(0.119g,0.37mmol)，反應(yīng)液攪拌20小時(shí)。旋干溶劑，EA(50mL)萃取，合并的有機(jī)層依次用水洗(2x30mL)和飽和食鹽水洗(30mL)，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮后柱層析純化得到目標(biāo)產(chǎn)物I‐13(0.108g,54％)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.12(s,1H),7.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.31(t,J＝8.0Hz,2H),7.23‐7.15(m,3H),6.21(d,J＝19.2Hz,1H),5.52(d,J＝8.4Hz,1H),5.24(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.8Hz,1H),4.58‐4.54(m,1H),4.32‐4.23(m,2H),3.81‐3.77(m,1H),3.67‐3.65(m,7H),2.72‐2.69(m,2H),2.63‐2.60(m,2H),2.46(br,4H),2.07‐2.02(m,1H),1.37(d,J＝22.4Hz,3H),0.93‐0.85(m,6H).實(shí)施例14.制備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐乙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷酰)氧)甲基)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯(I‐14)按照合成化合物I‐13的方法，將化合物13‐1換成L‐丙氨酸乙酯可制備得到化合物I‐14。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.45(s,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.35‐7.32(m,2H),7.26‐7.23‐7.16(m,3H),6.21(d,J＝18.8Hz,1H),5.53(d,J＝8.4Hz,1H),5.25(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.4Hz,1H),4.57‐4.52(m,1H),4.35‐4.24(m,2H),4.20‐4.11(m,2H),4.06‐3.96(m,1H),3.87‐3.81(m,1H),3.69‐3.65(m,4H),2.71‐2.69(m,2H),2.64‐2.61(m,2H),2.42(brs,4H),1.42‐1.37(m,6H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H).實(shí)施例15.制備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(((3‐嗎啡啉丙基)氨基甲酰)氧)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯(I‐15)化合物I‐15按照下列流程制備：化合物15‐1(0.144g,1.0mmol)和DiPEA(0.300g,2.3mmol)溶解在DCM(12mL)中。0℃下分批加入固體三光氣(0.158g,0.53mmol)后繼續(xù)攪拌3小時(shí)。旋干溶劑后將殘余物重新溶解在DCM(10mL)中。0℃下將叔丁基氯化鎂(0.20ml,0.2mmol)滴加到起始原料1(0.085g,0.16mmol)的無水DCM(10mL)中。攪拌30分鐘后，將上述中間體15‐2的DCM(10mL)溶液滴加到反應(yīng)液中。保溫繼續(xù)攪拌一小時(shí)后自然升至室溫反應(yīng)過夜。加入飽和氯化銨溶液(30mL)淬滅后用EA(2x30mL)萃取。合并的有機(jī)層依次用水洗、飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮后柱層析純化得到目標(biāo)化合物I‐15(0.068g,61％)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.34‐7.30(m,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),7.15(t,J＝7.2Hz,1H),6.50(t,J＝5.2Hz,1H),6.22(d,J＝18.8Hz,1H),5.44(d,J＝8.0Hz,1H),5.09(dd,J1＝9.2Hz,J2＝21.2Hz,1H),5.02‐4.95(m,1H),4.57‐4.53(m,1H),4.33‐4.24(m,3H),4.05‐3.97(m,1H),3.75‐3.72(m,4H),3.38‐3.31(m,1H),3.29‐3.21(m,1H),2.58‐2.46(m,6H),1.75‐1.72(m,2H),1.38‐1.32(m,6H),1.22(d,J＝6.0Hz,6H).實(shí)施例16.制備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(((3‐嗎啡啉丙基)氨基甲酰)氧)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸乙酯(I‐16)按照合成化合物I‐15的方法，將化合物1換成((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐3‐羥基‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸乙酯可制備得到化合物I‐16。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.29(brs,1H),7.54(d,J＝8.4Hz,1H),7.35‐7.31(m,2H),7.22(d,J＝8.4Hz,2H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),6.48(t,J＝4.8Hz,1H),6.22(d,J＝18.8Hz,1H),5.40(d,J＝8.4Hz,1H),5.09(dd,J1＝8.8Hz,J2＝20.8Hz,1H),4.57‐4.53(m,1H),4.28‐4.24(m,2H),4.18‐4.11(m,3H),4.08‐4.01(m,1H),3.72‐3.70(m,4H),3.41‐3.33(m,1H),3.30‐3.23(m,1H),2.55‐2.40(m,6H),1.71‐1.65(m,2H),1.39‐1.33(m,6H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H).實(shí)施例17.制備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(((2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙基)氨基甲酰)氧)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷酰)‐L‐丙氨酸異丙酯(I‐17)按照合成化合物I‐15的方法，將3‐嗎啡啉丙烷‐1‐胺換成2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙烷‐1‐胺可制備得到化合物I‐17。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.06(brs,1H),8.29(dd,J1＝1.2Hz,J2＝4.8Hz,1H),7.91(dd,J1＝1.2Hz,J2＝8.0Hz,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,1H),7.34‐7.30(m,2H),7.24‐7.09(m,4H),7.07‐7.05(m,1H),6.46(d,J＝3.6Hz,1H),6.14(t,J＝5.2Hz,1H),5.40(d,J＝8.4Hz,1H),5.01‐4.94(m,1H),4.53‐4.43(m,3H),4.24‐4.16(m,3H),4.03‐3.97(m,1H),3.68‐3.65(m,2H),1.37‐1.30(m,6H),1.21(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例18.制備化合物I‐3鹽酸鹽(I‐18)化合物I‐3(0.500g,0.75mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然后加入濃鹽酸(0.09ml,1.12mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌1小時(shí)后過濾得到目標(biāo)鹽(0.350g)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:13.16(brs,1H),8.63(s,1H),7.41(d,J＝8.0Hz,2H),7.28(t,J＝7.6Hz,2H),7.19‐7.09(m,3H),6.07(d,J＝18.0Hz,1H),5.61(d,J＝6.8Hz,1H),5.21(dd,J1＝8.0Hz,J2＝18.4Hz,1H),4.97‐4.88(m,1H),4.41‐4.28(m,3H),4.17‐3.85(m,6H),3.39‐3.09(m,6H),2.98‐2.69(m,2H),1.34‐1.30(m,6H),1.17(d,J＝6.0Hz,6H).實(shí)施例19.制備化合物I‐3氫溴酸鹽(I‐19)化合物I‐3(0.500g,0.75mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然后加入氫溴酸(0.07ml,1.12mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌1小時(shí)后過濾得到目標(biāo)鹽(0.400g)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:11.96(brs,1H),8.56(s,1H),7.41(d,J＝8.0Hz,2H),7.29(t,J＝7.6Hz,2H),7.19‐7.10(m,3H),6.07(d,J＝18.8Hz,1H),5.64(dd,J1＝2.0Hz,J2＝8.4Hz,1H),5.22(dd,J1＝8.4Hz,J2＝17.2Hz,1H),4.97‐4.87(m,1H),4.43‐4.29(m,3H),4.25‐4.12(m,2H),3.97‐3.82(m,4H),3.42‐3.11(m,6H),2.98‐2.77(m,2H),1.34‐1.29(m,6H),1.17(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例20.制備化合物I‐3甲磺酸鹽(I‐20)化合物I‐3(0.500g,0.75mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然后加入甲磺酸(0.07ml,1.12mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌1小時(shí)后過濾得到目標(biāo)鹽(0.385g).1H‐NMR(400MHz,DMSO‐d6)δ:11.56(brs,1H),9.74(s,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,2H),7.40(t,J＝8.0Hz,2H),7.22‐7.17(m,3H),6.06‐6.00(m,1H),5.68(dd,J1＝2.0Hz,J2＝8.0Hz,1H),5.33(br,1H),4.90‐4.81(m,1H),4.34‐4.24(m,3H),3.99‐3.84(m,2H),3.74‐3.63(m,4H),3.40‐3.30(m,4H),3.12‐2.99(m,4H),2.36(s,3H),1.37‐1.31(m,6H),1.22(d,J＝6.4Hz,3H),1.17(d,J＝6.4Hz,3H).實(shí)施例21.制備化合物I‐5鹽酸鹽(I‐21)化合物I‐5(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然后加入濃鹽酸(0.09ml,1.12mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌1小時(shí)后過濾得到目標(biāo)鹽(0.370g).1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:13.55(brs,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),7.26(t,J＝7.6Hz,2H),7.16‐7.11(m,3H),6.05(d,J＝18.4Hz,1H),5.64(d,J＝7.2Hz,1H),5.15(dd,J1＝8.4Hz,J2＝18.8Hz,1H),4.97‐4.89(m,1H),4.30‐4.15(m,4H),3.99‐3.85(m,5H),3.40‐3.35(m,2H),3.21‐3.10(m,2H),2.80‐2.30(m,4H),2.05‐1.90(m,2H),1.37‐1.31(m,6H),1.17(d,J＝6.0Hz,6H).實(shí)施例22.制備化合物I‐5氫溴酸鹽(I‐22)化合物I‐5(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然后加入氫溴酸(0.07ml,1.12mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌1小時(shí)后過濾得到目標(biāo)鹽(0.410g).1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:11.56(brs,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),7.25(t,J＝8.0Hz,2H),7.17‐7.10(m,3H),6.07(d,J＝18.4Hz,1H),5.65(d,J＝7.6Hz,1H),5.17‐5.14(m,1H),4.99‐4.87(m,1H),4.32‐4.13(m,4H),3.98‐3.83(m,5H),3.43‐3.30(m,2H),3.25‐3.08(m,2H),2.83‐2.35(m,4H),2.06‐1.93(m,2H),1.37‐1.30(m,6H),1.17(d,J＝6.0Hz,6H).實(shí)施例23.制備化合物I‐5甲磺酸鹽(I‐23)化合物I‐5(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然后加入甲磺酸(0.07ml,1.12mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌1小時(shí)后過濾得到目標(biāo)鹽(0.370g).1H‐NMR(400MHz,DMSO‐d6)δ:11.10(brs,1H),9.70(s,1H),7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.36(t,J＝8.0Hz,2H),7.20‐7.13(m,3H),6.06‐6.01(m,1H),5.69(d,J＝7.6Hz,1H),5.26‐5.20(m,1H),4.92‐4.80(m,1H),4.25‐4.05(m,4H),3.83‐3.65(m,5H),3.42‐3.03(m,4H),2.90‐2.43(m,4H),2.39(s,3H),2.10‐1.90(m,2H),1.37‐1.31(m,6H),1.17(d,J＝6.0Hz,6H)實(shí)施例24.制備化合物I‐12鹽酸鹽(I‐24)化合物I‐12(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然后加入濃鹽酸(0.09ml,1.12mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌1小時(shí)后過濾得到目標(biāo)鹽(0.355g).1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.39‐8.34(m,3H),7.45‐7.39(m,3H),7.24‐7.20(m,4H),7.10‐7.04(m,1H),6.80(d,J＝2.8Hz,1H),6.19(d,J＝18.8Hz,1H),5.43‐5.39(m,2H),5.29(dd,J1＝8.4Hz,J2＝18.8Hz,1H),4.98‐4.91(m,1H),4.63‐4.56(m,2H),4.45‐4.43(m,2H),4.03‐3.97(m,1H),1.36‐1.30(m,6H),1.18(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例25.制備化合物I‐12氫溴酸鹽(I‐25)化合物I‐12(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然后加入氫溴酸(0.07ml,1.12mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌1小時(shí)后過濾得到目標(biāo)鹽(0.390g).1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.54(d,J＝7.6Hz,1H),8.39‐8.37(m,1H),7.56(t,J＝6.0Hz,2H),7.48(d,J＝8.0Hz,1H),7.26‐7.20(m,4H),7.12(t,J＝7.2Hz,1H),6.89(s,1H),6.16‐6.05(m,2H),5.62(d,J＝18.4Hz,1H),5.51(d,J＝8.4Hz,1H),5.32‐5.26(m,2H),5.00‐4.91(m,1H),4.80‐4.72(m,1H),4.64‐4.60(m,1H),4.51‐4.49(m,1H),4.02‐3.98(m,1H),1.39‐1.32(m,6H),1.19(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例26.制備化合物I‐12甲磺酸鹽(I‐26)化合物I‐12(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然后加入甲磺酸(0.07ml,1.12mmol)。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌1小時(shí)后過濾得到目標(biāo)鹽(0.386g).1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.54‐8.48(m,2H),7.51‐7.44(m,3H),7.30‐7.21(m,4H),7.14‐7.11(m,1H),6.84(d,J＝2.8Hz,1H),6.13(d,J＝18.4Hz,1H),5.65‐5.45(m,2H),5.33‐5.25(m,1H),5.02‐4.88(m,1H),4.56‐4.53(m,2H),4.45‐4.43(m,2H),3.99‐3.89(m,1H),2.89(s,3H),1.41‐1.31(m,6H),1.19(d,J＝6.4Hz,6H).實(shí)施例27.Caco‐2透膜性本試驗(yàn)的目的是利用Caco‐2細(xì)胞單層來評(píng)價(jià)受試化合物的腸透膜性。試驗(yàn)步驟按照實(shí)際測(cè)試方法描述如下：1)在37℃水浴中預(yù)熱HBSSBuffer；2)從‐20℃冰箱里取出化合物，超聲幾分鐘(不少于1分鐘)；3)溶液制備：給體溶液緩沖液：含0.3％DMSO和5μMLY的HBSS緩沖液：將150μLDMSO和50μLLY(5mM)加入到50mlHBSS緩沖液(pH7.4)中；含0.1％DMSO和5μMLYHBSS的緩沖液：將50μLDMSO和50μLLY(5mM)加入到50mLHBSS緩沖液(pH7.4)中。受體溶液緩沖液：制備含0.4％DMSO的緩沖液：將200μLDMSO加入到50mlHBSS緩沖液(pH7.4)中。4)將細(xì)胞培養(yǎng)皿從培養(yǎng)箱中取出，用HBSS緩沖液清洗細(xì)胞單層，然后在室溫條件下測(cè)試TEER值。5)在4000rpm下將化合物溶液離心5分鐘，然后載入到受體室；6)基于下表列出的溶劑量添加溶液(確保吸取額外的100uL給體樣品作為T0備份)；7)為了測(cè)試頂室LY濃度，從頂室吸取100μL樣品注入一個(gè)不透明培養(yǎng)皿作為LYT0；8)37℃預(yù)熱頂面培養(yǎng)皿和底面培養(yǎng)皿約5分鐘，然后將頂面培養(yǎng)皿放到底面培養(yǎng)皿上開始轉(zhuǎn)運(yùn)；9)培養(yǎng)皿放在37℃培養(yǎng)箱中90分鐘；10)標(biāo)曲制備；11)培養(yǎng)90分鐘后將頂面培養(yǎng)皿從底面培養(yǎng)皿中分離；12)從底面培養(yǎng)皿中吸取100μL樣品注入到一個(gè)不透明培養(yǎng)皿作為LYT90；13)用熒光計(jì)測(cè)量LYT0和LYT90的LY濃度(485nm激發(fā)/535nm輻射)；14)制備LC‐MS/MS樣品:給體樣品(1:10稀釋)：6μL給體樣品+54μL0.4％DMSOHBSS+60μLACN(帶內(nèi)標(biāo)利膽酚或丙咪嗪)；受體樣品：60μL受體樣品+60μLCAN(帶內(nèi)標(biāo)利膽酚或丙咪嗪)?；衔颯ofosbuvirI‐1I‐3I‐5I‐8I‐12Papp×106/cm·s‐1(A‐B)0.190.851.161.530.920.63上表總結(jié)表明，許多受試化合物顯示了不可預(yù)見的優(yōu)于sofosbuvir的透膜性。實(shí)施例28.熱力學(xué)水溶性將足夠量的化合物懸浮在水中得到化合物的游離形式的最大終濃度≥10mg·ml-1來測(cè)試水溶性。測(cè)量pH值前將懸浮液放在25℃下平衡24小時(shí)。然后用玻璃纖維C過濾器將懸浮液過濾到96孔板。濾液稀釋101倍。將0.1mg·ml-1DMSO標(biāo)準(zhǔn)溶液做參照，HPLC定量。注射不同體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液、稀釋溶液和未稀釋溶液。按照標(biāo)準(zhǔn)注射中主峰相同保留時(shí)間來積分峰，用峰面積來計(jì)算溶解度。相比于報(bào)道的有效治療HCV感染的其他化合物，本發(fā)明的化合物顯示了不可預(yù)見的更高的溶解度，這使得本發(fā)明的化合物可以更理想的用于制備藥物制劑和臨床治療感染HCV的病人。化合物SofosbuvirI‐2I‐4I‐6I‐8I‐9I‐18溶解度(mg/mL)2.06.05.24.7>2.0>2.0>7.0化合物SofosbuvirI‐19I‐20I‐21I‐22I‐23溶解度(mg/mL)2.0>7.03.95.14.23.8實(shí)施例29.生物活性在96孔白色/不透明板內(nèi)，將1breplicon細(xì)胞系按照3000個(gè)細(xì)胞/孔(50μL)鋪板，或在384孔白色/不透明板內(nèi)，將1breplicon細(xì)胞系按照1500個(gè)細(xì)胞/孔(25μL)鋪板。將50μL化合物(2復(fù)孔)加入96孔板或25μL化合物(2復(fù)孔)加入384孔板，37℃、5％濕度CO2氣體的細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)4天。培養(yǎng)后，加入Bright‐Glo試劑(96孔板50μL；384孔板25μL)，螢火蟲螢光素酶報(bào)告測(cè)試HCV復(fù)制。相對(duì)空白對(duì)照計(jì)算抑制百分率。相比于報(bào)道的有效治療HCV感染的其他化合物，本發(fā)明的化合物不可預(yù)見的顯示了低的EC50值，其小于0.2uM甚至0.15uM或0.10uM。所有受試化合物(CC50>100uM)相比于市場(chǎng)上抑制HCV病毒的對(duì)照藥物(CC50＝63uM)顯示了更低的細(xì)胞毒性?；衔顴C50(uM)化合物EC50(uM)化合物EC50(uM)I‐10.312I‐20.235I‐30.156I‐40.083I‐50.145I‐60.099I‐70.075I‐80.187I‐90.290I‐100.133I‐110.539I‐120.082I‐133.28I‐140.159I‐154.87I‐160.694I‐179.86Sofosbuvir0.134實(shí)施例30.大鼠PK研究在體內(nèi)評(píng)價(jià)了本發(fā)明的化合物，口服后測(cè)試了肝中活性尿嘧啶三磷酸代謝物的水平。每一個(gè)化合物大鼠口服劑量為30mg/kg，肝摘除后肝提取液用于分析其NTP(2’‐脫氧‐2’‐α‐F‐2’‐β‐C‐甲基尿嘧啶三磷酸)水平。下表列出了PK研究結(jié)果。相比于報(bào)道的有效治療HCV感染的其他化合物，本發(fā)明的化合物不可預(yù)見的顯示了比sofosbuvir更高的Cmax值。更重要的是，所有受試化合物在肝內(nèi)有更高的活性NTP代謝物藥物暴露。所有上述結(jié)果表明，本發(fā)明提供了一種有優(yōu)秀PK性質(zhì)的新型抗HCV的抑制劑化合物。上述實(shí)例只為說明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思及特點(diǎn)，其目的在于讓熟悉本領(lǐng)域的人能夠了解本發(fā)明的內(nèi)容并據(jù)以實(shí)施，并不能以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。此處提及的所有出版物據(jù)此通過引用完整地并入。凡根據(jù)本發(fā)明精神實(shí)質(zhì)所做的等效變換或修飾，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3