本發(fā)明涉及化學(xué)合成領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及純化奧貝膽酸中間體的方法。

背景技術(shù)：

奧貝膽酸(oca)屬法尼醇x受體激動劑，能夠選擇性激活膽汁酸核受體fxr。臨床前和臨床研究提示，其具有較好的抗膽汁淤積、抗炎癥和抗纖維化的作用。奧貝膽酸是一種半合成的初級膽汁酸鵝去氧膽酸(cdca)的類似物，其合成起始原料鵝去氧膽酸的純度難以保證。膽酸類化合物的合成復(fù)雜性，以及合成各步中間體的相似性，導(dǎo)致其部分殘留雜質(zhì)極難純化，其中殘留的中間體klca(式2所示化合物)對后續(xù)步驟影響較大，而且大部分市場購買和目前工藝合成的奧貝膽酸中間體中klca的含量高達5％左右，以致衍生反應(yīng)到最終奧貝膽酸產(chǎn)品時，klca及其衍生雜質(zhì)均很難純化和除去，所以需要在中間體的制備過程中就嚴格控制雜質(zhì)含量，以便使得終產(chǎn)品中klca及其衍生雜質(zhì)能夠控制在0.15％以下，以達到藥品質(zhì)控標準。

3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸(式1所示化合物，oca-e)作為奧貝膽酸合成的重要中間體，其良好的純度對保證最終活性化合物奧貝膽酸的純度具有十分重要的意義。

現(xiàn)有技術(shù)中對3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的純化有用乙酸乙酯進行純化的，然而對很多雜質(zhì)和klca無法達到預(yù)期效果。

因此，目前3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的純化方法仍有待改進。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決相關(guān)技術(shù)中的技術(shù)問題之一或提供一種有用的商業(yè)選擇。為此，本發(fā)明的一個目的在于提出一種純化式1所示奧貝膽酸中間體的方法。利用 該方法可以高效的純化奧貝膽酸中間體3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸，能有效控制3α-羥基-7-氧代-5β-膽烷酸(klca)雜質(zhì)(式2所示化合物)的含量以及減少其他未知雜質(zhì)的含量，從而為奧貝膽酸的合成提供合格的原料。

根據(jù)本發(fā)明的一個發(fā)面，本發(fā)明提出一種純化式1所示奧貝膽酸中間體的方法，包括將低級醇和水的混合溶液與式1所示化合物粗品進行接觸。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，本發(fā)明采用的操作步驟少，純化工藝簡潔，效果明顯，所用溶劑量少，生產(chǎn)效率高，成本低，且所得終產(chǎn)品收率、純度高，副產(chǎn)物極少，工業(yè)三廢容易處理，安全環(huán)保。有利于式1所示化合物純品的工業(yè)化生產(chǎn)。根據(jù)本發(fā)明實施例的方法，純化式1所示化合物的總收率可以達到70％左右，產(chǎn)品純度可以達到99.5～99.7％，klca含量控制在0.3％左右，由此在后續(xù)反應(yīng)之后，可使得終產(chǎn)品中klca及其衍生雜質(zhì)控制到0.15％以下，達到藥品質(zhì)控標準。相比之下，現(xiàn)有技術(shù)中的乙酸乙酯重結(jié)晶的工藝，收率僅在60％，純度也僅為98～99％之間，klca含量在1.5％左右，在后續(xù)反應(yīng)這后，很難將終產(chǎn)品中klca及其衍生雜質(zhì)控制到0.15％以下，不能達到藥品控制標準。

本文中所使用的術(shù)語“接觸”應(yīng)做廣義理解，其可以是任何能使得至少兩種反應(yīng)物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的方式，例如可以是將兩種反應(yīng)物在適當?shù)臈l件下進行混合。在本文中，“化合物n”在本文中有時也稱為“式n所示化合物”，在本文中n為1～2的任意整數(shù)，例如“化合物2”在本文中也可以稱為“式2所示化合物”。

在本發(fā)明的描述中，需要理解的是，術(shù)語“第一”、“第二”僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示相對重要性或者隱含指明所指示的技術(shù)特征的數(shù)量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隱含地包括一個或者更多個該特征。在本發(fā)明的描述中，“多個”的含義是兩個或兩個以上，除非另有明確具體的限定。

下面詳細描述本發(fā)明的實施例的純化式1所示化合物的方法。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，所述純化方法包括：

(1)將所述式1所示化合物粗品與所述低級醇和水的混合溶液、脫色劑接觸，攪拌加熱、回流；

(2)趁熱濾去脫色劑，向所得濾液緩慢滴加純化水；

(3)攪拌，緩慢降溫，加入晶種，析晶；

(4)繼續(xù)攪拌降溫，過濾，得式1所示化合物純品。

由此可以制得高純度的式1所示化合物。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，所述低級醇為選自乙醇、異丙醇和丁醇中的至少一種，優(yōu)選為乙醇。由此可以制得高純度的式1所示化合物。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，所述低級醇和水的混合溶液與所述式1所示化合物粗品的體積/質(zhì)量比為4.4ml/g～6ml/g，優(yōu)選為5ml/g。由此可以充分溶解，并同時抑制低級醇與式1所示化合物生成酯雜質(zhì)，又不至過量而影響后續(xù)純化純度和收率。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，所述低級醇和水的混合溶液中低級醇與所述水的體積比為2:1～10:1，優(yōu)選為4:1。由此可以充分溶解，并同時抑制酯雜質(zhì)的生成，又不至過量而影響后續(xù)純化純度和收率。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，所述步驟(1)中所述脫色劑與所述式1所示化合物粗品的質(zhì)量比為1:10～1:25，優(yōu)選為1:20。由此可以達到脫色和吸附的功效，同時又不會影響收率。

根據(jù)本發(fā)明的具體實施例，所述脫色劑為選自活性炭、硅藻土、分子篩、活性白土中的至少一種，優(yōu)選為活性炭。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，所述步驟(2)中滴加的純化水的量與所述式1所示化合物粗品的體積/質(zhì)量比為1ml/g～2ml/g，優(yōu)選為1.5ml/g。由此可以滿足達到過飽和臨界點，同時又不會造成過快析晶而影響純度。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，所述步驟(2)緩慢滴加純化水的速率為1ml/min～4ml/min，優(yōu)選為1.5ml/min～3ml/min。。由此可以防止水滴加速度過快而導(dǎo)致局部降溫并達到過飽和，使產(chǎn)品過早析出。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，所述步驟(3)緩慢降溫的速率為0.2℃/min～1.2℃/min，優(yōu)選為0.4℃/min。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，步驟(3)緩慢降溫到65～80攝氏度，優(yōu)選70攝氏度，此時方加入晶種。由此可以為晶種的加入和析晶創(chuàng)造合適的條件。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，所述步驟(4)繼續(xù)攪拌降溫至10～30攝氏度，優(yōu)選為20～30攝氏度。由此可以保證濾出固體的收率，同時降低雜質(zhì)含量。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，所述步驟(4)過濾得固體后，進一步用乙酸乙酯進行洗滌。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，進一步對式1所示化合物純品進行真空干燥。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，真空干燥的溫度為30～50攝氏度，優(yōu)選為45攝氏度。由此可以充分干燥同時不影響產(chǎn)品性質(zhì)。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，真空干燥的時間為8～16小時，優(yōu)選為12小時。由此可以 充分干燥同時不影響產(chǎn)品性質(zhì)。

根據(jù)本發(fā)明實施例的純化式1所示化合物的方法可以實現(xiàn)下列優(yōu)點至少之一：

1、根據(jù)本發(fā)明實施例的純化式1所示化合物的方法，可以高效地制備式1所示化合物純品；

2、本發(fā)明實施例的純化式1所示化合物的方法的操作工藝簡潔，步驟少，易控制，可提高生產(chǎn)效率，成本低，且安全環(huán)保，有利于工業(yè)化大批量生產(chǎn)；

3、根據(jù)本發(fā)明實施例的純化式1所示化合物的方法制備得到的產(chǎn)品色澤好，收率和純度大大提高，雜質(zhì)極少，有利于該產(chǎn)品的工業(yè)化生產(chǎn)，并具有很高的市場價值；

4、本發(fā)明實施例的純化式1所示化合物的方法通過高效去除式2雜質(zhì)，解決現(xiàn)有技術(shù)難題，推動技術(shù)進步；

5、本發(fā)明實施例的純化式1所示化合物的方法用低級醇和純化水的混合溶液替代乙酸乙酯，打破了3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸純化難的僵局，并有效降低了3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸產(chǎn)品中的雜質(zhì)成分。

6、本發(fā)明實施例的純化式1所示化合物的方法提供了非常高純度的目標產(chǎn)品，為其生產(chǎn)新藥時，減少產(chǎn)品中雜質(zhì)，控制藥物質(zhì)量提供保障。

本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發(fā)明的實踐了解到。

附圖說明

本發(fā)明的上述和/或附加的方面和優(yōu)點從結(jié)合下面附圖對實施例的描述中將變得明顯和容易理解，其中：

圖1為根據(jù)本發(fā)明實施例1純化前的3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸粗品的檢測圖譜；

圖2為根據(jù)本發(fā)明實施例1純化后的3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的檢測圖譜；

圖3為根據(jù)本發(fā)明實施例3純化后的3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的檢測圖譜。

具體實施方式

下面詳細描述本發(fā)明的實施例。下面描述的實施例是示例性的，僅用于解釋本發(fā)明，而不能理解為對本發(fā)明的限制。實施例中未注明具體技術(shù)或條件的，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

原材料：

3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸粗品(純度95％左右，檢測klca含量4.2％左右)，自制；

乙醇(工業(yè)藥用級)；

水(純化水)；

活性炭(工業(yè)藥用級)。

分析測試儀器：

agilent1260hplc帶elsd380檢測器

色譜柱：thermobdsc18(4.6×150mm,5um),004the001

實施例13α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的純化工藝

在裝有攪拌機、溫度計、滴液漏斗的100ml三口燒瓶中，加入藥用乙醇40ml和10ml純化水，于攪拌下加入3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸粗品10g，加熱攪拌回流至溶清，加入活性炭0.5g，攪拌15分鐘，趁熱過濾去除活性炭。濾液放置在裝有攪拌機、溫度計、滴液漏斗的100ml三口燒瓶中，于加熱攪拌回流下，用滴液漏斗慢慢加入純化水約15ml到燒瓶中，保溫攪拌15分鐘后，繼續(xù)攪拌，緩慢降溫，降溫至70℃時加入晶種，繼續(xù)攪拌降溫至25℃，過濾出固體，使用少量乙酸乙酯洗滌，45℃干燥12h，得到6.8g純化產(chǎn)品，收率68％，產(chǎn)品純度99.7％，其中klca雜質(zhì)含量為0.29％。

實施例23α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的純化工藝

在裝有攪拌機、溫度計、滴液漏斗的1000ml三口燒瓶中，加入藥用乙醇400ml和100ml純化水，于攪拌下加入3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸粗品100g，加熱攪拌回流至溶清，加入活性炭5g，攪拌15分鐘，趁熱過濾去除活性炭。濾液放置在裝有攪拌機、溫度計、滴液漏斗的1000ml三口燒瓶中，于加熱攪拌回流下，用滴液漏斗慢慢加入純化水約150ml到燒瓶中，保溫攪拌15分鐘后，繼續(xù)攪拌，緩慢降溫，降溫至70℃時加入晶種，繼續(xù)攪拌降溫至25℃，過濾出固體，使用少量乙酸乙酯洗滌，45℃干燥12h，得到69.2g純化產(chǎn)品，收率69％，產(chǎn)品純度99.6％，其中klca雜質(zhì)含量為0.36％。

對比例13α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的純化工藝

在裝有攪拌機、溫度計的1000ml三口燒瓶中，加入乙酸乙酯800ml，于攪拌下加入3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸粗品100g，加熱攪拌回流至溶清，加入活性炭5g，攪拌15分鐘，趁熱過濾去除活性炭。濾液放置在裝有攪拌機、溫度計的1000ml三口燒瓶中，繼續(xù)攪拌，緩慢降溫，降溫至65℃時加入晶種，繼續(xù)攪拌降溫至25℃，過濾出固體，使用 少量乙酸乙酯洗滌，45℃干燥12h，得到61.1g純化產(chǎn)品，收率61％，產(chǎn)品純度98.3％，其中klca含量為1.6％。

實驗證明，相較于現(xiàn)有技術(shù)，本申請方法可以高效地純化奧貝膽酸中間體3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸，能有效控制3α-羥基-7-氧代-5β-膽烷酸雜質(zhì)的含量以及減少其他未知雜質(zhì)的含量，從而為奧貝膽酸的合成提供合格的原料。

在本說明書的描述中，參考術(shù)語“一個實施例”、“一些實施例”、“示例”、“具體示例”、或“一些示例”等的描述意指結(jié)合該實施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點包含于本發(fā)明的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述術(shù)語的示意性表述不必須針對的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點可以在任一個或多個實施例或示例中以合適的方式結(jié)合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以將本說明書中描述的不同實施例或示例以及不同實施例或示例的特征進行結(jié)合和組合。

盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，可以理解的是，上述實施例是示例性的，不能理解為對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對上述實施例進行變化、修改、替換和變型。