技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，具體涉及一種Midkine低表達(dá)的LM3穩(wěn)定細(xì)胞系的構(gòu)建方法。利用RNA干擾技術(shù)，構(gòu)建Midkine穩(wěn)定低表達(dá)的LM3細(xì)胞系。經(jīng)過(guò)引物設(shè)計(jì)、擴(kuò)增目的片斷，構(gòu)建Midkine?shRNA重組質(zhì)粒；然后收集含有病毒的液體培養(yǎng)基，將該液體培養(yǎng)基過(guò)濾后添加到預(yù)先接種LM3細(xì)胞的培養(yǎng)皿中共培養(yǎng)；最后對(duì)轉(zhuǎn)染后的LM3細(xì)胞進(jìn)行Puromycin抗性篩選、傳代，最終獲得Midkine低表達(dá)的LM3穩(wěn)定細(xì)胞系。本細(xì)胞系的建立為研究Midkine在腫瘤中的分子作用機(jī)制以及對(duì)腫瘤能量代謝的調(diào)控作用提供了新的實(shí)驗(yàn)材料。

技術(shù)研發(fā)人員：樸海龍;劉秀梅;夏天
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
文檔號(hào)碼：201510924962
技術(shù)研發(fā)日：2015.12.14
技術(shù)公布日：2017.06.20