本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥分析領(lǐng)域，具體涉及一種抗生素類藥物的微生物檢測(cè)方法。

背景技術(shù)：

抗生素類藥又叫抗細(xì)菌藥也稱為"抗細(xì)菌劑"，是一類用于抑制細(xì)菌生長(zhǎng)或殺死細(xì)菌的藥物。在不引起歧義的情況下，抗細(xì)菌藥也可簡(jiǎn)稱為"抗菌藥"?？股仡愃幣c抗生素并不是相同的概念，抗生素僅為抗生素類藥下的一個(gè)分類。抗生素類藥除了包括青霉素、四環(huán)素等抗生素，還包括抗真菌藥以及磺胺類、喹諾酮類等藥物。

抗生素的種類有很多，現(xiàn)在常用的抗生素有以下幾類：β-內(nèi)酰胺類：青霉素類、頭孢類；大環(huán)內(nèi)酯類（紅霉素類）：乙酰螺旋霉素、麥迪霉素、羅紅霉素、琥乙紅霉素、阿奇霉素、克拉霉素等； 喹諾酮類（含針劑）：諾氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、洛美沙星、司帕沙星、帕珠沙星、依諾沙星等；氨基糖苷類：慶大霉素、阿米卡星等；其他類（分子結(jié)構(gòu)各不相同，屬于幾個(gè)小類）：甲氧芐啶、磺胺甲基異惡唑、磺胺嘧啶；林可霉素、克林霉素；呋喃妥因、呋喃唑酮等。還有一大類是四環(huán)素類如土霉素、四環(huán)素、米諾環(huán)素，美滿環(huán)素等，這類藥副作用比較大，現(xiàn)已很少用。

大環(huán)內(nèi)酯類新品種（新大環(huán)內(nèi)酯類）有阿奇霉素、克拉霉素、羅紅霉素等，其對(duì)流感嗜血桿菌、肺炎支原體或肺炎衣原體等的抗微生物活性增強(qiáng)、口服生物利用度提高、給藥劑量減小、不良反應(yīng)亦較少、臨床應(yīng)用非常廣泛。

藥品微生物限度檢驗(yàn)是控制藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)之一,藥品染菌程度直接影響其內(nèi)在質(zhì)量.藥品被微生物污染,其有效成分會(huì)遭到破壞,從而失去有效性。 近年來，各國(guó)藥物分析人員及藥典對(duì)藥物微生物污染的重要性更加重視。微生物檢查方法的研究是為了找到科學(xué)、合理、有效的方法對(duì)微生物進(jìn)行研究。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在提供一種抗生素類藥物的微生物檢測(cè)方法。

為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明一種抗生素類藥物的微生物檢測(cè)方法，其具體內(nèi)容如下：

本發(fā)明所述一種抗生素類的微生物檢測(cè)方法，其特征在于，采用薄膜過濾法，包括如下步驟 ：

（1）配制稀釋液

配制氯化鈉-蛋白胨緩沖液，用500~1000ml水溶解，分裝，滅菌;滅菌溫度115℃~ 121℃，滅菌時(shí)間 15~30min ；

(2) 配制供試液

取抗生素類藥物，轉(zhuǎn)移至步驟（1）所得到的 氯化鈉-蛋白胨緩沖液中；

（3）薄膜過濾和沖洗

將步驟（2）得到的供試液進(jìn)行薄膜過濾，后用沖洗液分次沖洗濾膜；

（4）檢查

按照《中國(guó)藥典》2010年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢驗(yàn)所述檢查法檢查。

本發(fā)明所述的檢測(cè)方法，所述抗生素類藥物種類為β-內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素、喹諾酮類藥。

本發(fā)明所述所述的檢測(cè)方法，稀釋液中所述氯化鈉-蛋白胨其配方為蛋白胨1.0~5.0g,磷酸氫二鈉5.0~10.0g，磷酸二氫鉀1.0~5.0g，氯化鈉3.0~7.0g，聚乙二醇-400 1~10ml。

本發(fā)明所述的檢測(cè)方法，所述沖洗液選自0.9%（w/v）氯化鈉溶液、0.1%（w/v）蛋白胨水溶液、pH7.0 氯化鈉蛋白胨緩沖液或者含中和劑（1~3% 聚山梨酯 80 ）的 pH7.0 氯化鈉蛋白胨緩沖液中的一種或幾種組合。

本發(fā)明所述的檢測(cè)方法，所述沖洗次數(shù)為1~5次，沖洗量為100~500ml。

具體實(shí)施方式

下面實(shí)施例只為進(jìn)一步說明本發(fā)明，不以任何形式限制本發(fā)明范圍。

實(shí)施例1

取阿奇霉素分散片10g,加入氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml,充分搖勻，做1:10溶液。取1:10溶液1ml加氯化鈉-蛋白胨緩沖液至10ml做供試液。取供試液做薄膜過濾法處理，用0.9%氯化鈉溶液分次沖洗（每膜沖洗量100~500ml,每次沖洗量不超過100ml），以大腸埃希菌作為陽性對(duì)照菌，按照《中國(guó)藥典》2010 年版二部附錄Ⅺ J 微生物限度檢驗(yàn)所述檢查法檢查，檢測(cè)各菌液回收率大于70%，控制菌檢查結(jié)果為陰型。

各菌回收率檢測(cè)結(jié)果如下表：

控制菌檢查結(jié)果如下表：

實(shí)施例2

取羅紅霉素膠囊10g,加入氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml,充分搖勻，做1:10溶液。取1:10溶液1ml加氯化鈉-蛋白胨緩沖液至10ml做供試液。取供試液做薄膜過濾法處理，用0.9%氯化鈉溶液分次沖洗（每膜沖洗量100~500ml,每次沖洗量不超過100ml），以大腸埃希菌作為陽性對(duì)照菌，按照《中國(guó)藥典》2010 年版二部附錄Ⅺ J 微生物限度檢驗(yàn)所述檢查法檢查，檢測(cè)各菌液回收率大于70%，控制菌檢查結(jié)果為陰型。

各菌回收率檢測(cè)結(jié)果如下表：

控制菌檢查結(jié)果如下表：

實(shí)施例3

取左氧氟沙星膠囊10g,加入氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml,充分搖勻，做1:10供試液。取供試液做薄膜過濾法處理，用0.9%氯化鈉溶液分次沖洗（每膜沖洗量100~500ml,每次沖洗量不超過100ml），以大腸埃希菌作為陽性對(duì)照菌，按照《中國(guó)藥典》2010 年版二部附錄Ⅺ J 微生物限度檢驗(yàn)所述檢查法檢查，檢測(cè)各菌液回收率大于70%，控制菌檢查結(jié)果為陰型。

各菌回收率檢測(cè)結(jié)果如下表：

控制菌檢查結(jié)果如下表：