本發(fā)明屬于中醫(yī)藥科技生物工程領(lǐng)域，產(chǎn)品可用于保健食品及醫(yī)療領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
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本人在日本留學期間以牛眼為原料提取透明質(zhì)酸(HA)質(zhì)量達十萬道爾頓。

技術(shù)實現(xiàn)要素：
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以林蛙皮為原料，以膠體磨作微粉勻漿，用超高壓設(shè)備作細胞壓爆破壁、滅菌。提取透明質(zhì)酸(HA)為國內(nèi)首創(chuàng)，且可提高HA的得率達0.5％。

工藝流程：

1、取長白山林蛙皮以30％Nacl溶液浸洗10min后進入膠體磨磨漿，磨漿標準是使物料干燥后直徑達5μm。以600Mpa超高壓設(shè)備做超高壓10min滅菌，作細胞壓爆破壁，加入20倍物料體積的去離子水，用1mol/L Nacl溶液調(diào)PH值至9。加入等量2％的由脂肪酶、菠蘿酶、堿性蛋白酶混合制成的復(fù)合酶，在37℃條件下酶解8h，之后加入物料的1％硅藻土加壓0.1Mpa過濾于藥典規(guī)定七號篩，使用布袋式離心尼龍濾過器過濾，得濾液。

2、取濾液以0.1mol/L Nacl溶液調(diào)PH值至6.5后加入2倍體積的95％乙醇攪拌，待沉淀發(fā)生充分后，取沉淀物加入乙醚、乙醇依次脫水2次。在真空度為0.1Mpa，溫度為37℃條件下真空干燥得HA中間品。

3、將中間品溶于0.1mol/L Nacl溶液中，溶解濃度為0.5％，同時加入3％乙醚，以0.1mol/L NaoH調(diào)PH值至5.5。再加入等體積的乙醚以60r/min攪拌均勻，靜置6h分離出水相。

4、將上述分離出的水相用1mol/L NaoH調(diào)PH值至8.2后加入5％等量的中性蛋白酶和鏈霉蛋白酶組成的復(fù)合酶，于33℃酶解2h，得酶解液。

5、酶解液加入等體積的1％溴化十六烷基呲啶靜置8h，收集沉淀物。將沉淀物放入0.1mol/L Nacl溶液中，攪拌均勻，解離2h得解液。

6、解液加5％活性炭壓濾得澄清液，后用0.45μm微孔纖維膜濾器精濾，得 長白山林蛙皮透明質(zhì)酸液。再以雙螺旋速凍機干燥進入SGSFGX-30型灌裝流水線，灌裝后進行小包裝，外包裝出廠。本工藝提高得率0.5％，總得率為1.8％，質(zhì)量為十萬道爾頓。