專利名稱：一種制備聚乳酸納微米球的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物醫(yī)用高分子領(lǐng)域，特別是高效分散劑在制備粒徑可控的納米至亞微米聚乳酸微球的應(yīng)用技術(shù)。
背景技術(shù)：
聚乳酸(PLA)具有優(yōu)良的生物降解及生物相容性能，已經(jīng)獲得美國(guó)食品與醫(yī)藥管理局(R)od and Drug Administration, PDA)批準(zhǔn)可用做醫(yī)用手術(shù)縫合線和注射用微膠囊、 微球及埋植劑等制劑的材料。PLA在體內(nèi)最終代謝產(chǎn)物是(X)2和H2O,中間產(chǎn)物是乳酸，乳酸也是體內(nèi)正常代謝的產(chǎn)物，不會(huì)在器官內(nèi)聚集，近年來(lái)隨著PLA在生物醫(yī)學(xué)材料領(lǐng)域的應(yīng)用基礎(chǔ)研究的不斷深入，PLA納微米球的制備及其在藥物控制釋放載體領(lǐng)域的研究引起科學(xué)工作者的廣泛關(guān)注。載藥PLA微球中釋放的藥物的藥效取決于粒徑大小及其分布以及表面性質(zhì)。采用油/水乳液體系中溶劑揮發(fā)法制備PLA微球，粒徑大小及其分布以及表面性質(zhì)與分散劑的選用密切相關(guān)。目前，制備PLA微球主要采用的分散劑是聚乙烯醇(PVA)，為了得到納米或亞微米尺寸的PLA微球，需要的PVA的用量通常在0. 5 %以上。PLA成球過(guò)程中易與PVA 分子鏈發(fā)生纏結(jié)，很難在洗滌過(guò)程中完全去除，從而影響PLA微球的釋放動(dòng)力學(xué)與體內(nèi)代謝動(dòng)力學(xué)。因此迫切需要尋找一種制備PLA微球的高效分散劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是要克服上述缺陷，提出一種方便制作的制備聚乳酸納微米球的方法。本發(fā)明包括如下步驟
1)將聚乳酸溶于有機(jī)溶劑中，形成有機(jī)相；
2)將上述有機(jī)相加入到水相分散介質(zhì)中；
3)超聲分散；
4)磁力連續(xù)攪拌，待有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，得到聚乳酸微球的懸浮液；
5)將聚乳酸微球的懸浮液經(jīng)1000(Γ20000轉(zhuǎn)/分離心分離，再經(jīng)水洗、冷凍干燥得到聚乳酸微球。本發(fā)明制備PLA微球的高效分散劑方法，制備的聚乳酸納微米球粒徑大小可控、 粒徑分布均勻，殘留分散劑濃度極低，微球具有良好的細(xì)胞相容性。本發(fā)明制備簡(jiǎn)單，在藥物控制釋放載體領(lǐng)域的應(yīng)用廣闊。另，本發(fā)明所述聚乳酸的相對(duì)分子量為100(Γ100000。通過(guò)選擇不同分子量的聚乳酸可以調(diào)節(jié)聚乳酸微球的降解速率，從而控制載體中藥物的緩釋速率。本發(fā)明所述水相分散介質(zhì)為濃度為0.1 %Tl.O %。的磺基琥珀酸雙十三烷基酯鈉水溶液。該濃度范圍內(nèi)的磺基琥珀酸雙十三烷基酯鈉水溶液不僅具有足夠的分散穩(wěn)定性能，而且具有良好的生物相容性。
本發(fā)明所述有機(jī)溶劑為三氯甲烷或二氯甲烷。三氯甲烷和二氯甲烷沸點(diǎn)較低，在室溫條件下均較易揮發(fā)。本發(fā)明所述超聲分散時(shí)間為廣5 min，超聲功率為500W 900W。在該超聲時(shí)間及該超聲功率范圍內(nèi)，可以確保有機(jī)相充分剪切并均勻分散。本發(fā)明所述超聲分散時(shí)的裝置為細(xì)胞粉碎機(jī)。細(xì)胞粉碎機(jī)可以使有機(jī)相有效地分散于水相中。


圖1為實(shí)施案例1制備的聚乳酸粒子的TEM圖。圖2為實(shí)施案例1制備的聚乳酸粒子的DLS圖。圖3為實(shí)施案例6制備的聚乳酸粒子的TEM圖。圖4為實(shí)施案例6制備的聚乳酸粒子的DLS圖。圖5為實(shí)施案例7制備的負(fù)載非洛地平的聚乳酸粒子TEM圖。圖6為實(shí)施案例7制備的負(fù)載非洛地平的聚乳酸粒子DLS圖。
具體實(shí)施例方式一、實(shí)施例1
(1)稱取50 mg磺基琥珀酸雙十三烷基酯鈉溶于50 ml蒸餾水中，磁力條件下攪拌0. 5 h，得到水相分散介質(zhì)。(2)稱取50 mg相對(duì)分子量為1000的聚乳酸溶于5 ml三氯甲烷中，得到有機(jī)相。(3)將制成的水相分散介質(zhì)和有機(jī)相混合，用500W的細(xì)胞粉碎機(jī)超聲分散5 min。(4)磁力條件下連續(xù)攪拌12 h，使氯仿完全揮發(fā)，得到聚乳酸微球的懸浮液。(5)取以上懸浮液經(jīng)20000轉(zhuǎn)/分離心分離、水洗、冷凍干燥得到聚乳酸微球。將該微球形態(tài)由透射電鏡(TEM)測(cè)定，如圖1所示，將粒徑分布由動(dòng)態(tài)光散射儀 (DLS)測(cè)定，如圖2所示。按本實(shí)施例制備的聚乳酸微球平均粒徑為55 nm，粒徑分布較窄(0. 132)，細(xì)胞相容性良好。二、實(shí)施例2
(1)稱取50 mg磺基琥珀酸雙十三烷基酯鈉溶于50 ml蒸餾水中，磁力條件下攪拌0.5 h，得到水相分散介質(zhì)。(2)稱取100 mg相對(duì)分子量為5000的聚乳酸溶于5 ml三氯甲烷中，得到有機(jī)相。(3)將制成的水相分散介質(zhì)和有機(jī)相混合，用900W的細(xì)胞粉碎機(jī)超聲分散1 min。(4)磁力條件下連續(xù)攪拌12 h使氯仿?lián)]發(fā)完全，得到聚乳酸微球的懸浮液。(5)取以上懸浮液經(jīng)18000轉(zhuǎn)/分離心分離、水洗、干燥得到聚乳酸微球。該微球形態(tài)由透射電子顯微鏡鏡測(cè)定，粒徑分布由動(dòng)態(tài)光散射儀測(cè)定。按本實(shí)施例制備的聚乳酸微球平均粒徑為156 nm，粒徑分布較窄(0. 125)。三、實(shí)施例3
(1)稱取50 mg磺基琥珀酸雙十三烷基酯鈉溶于50 ml蒸餾水中，磁力條件下攪拌0.5 h，得到水相分散介質(zhì)。
(2)稱取100 mg相對(duì)分子量8000的聚乳酸溶于5 ml 二氯甲烷中，得到有機(jī)相。(3)將制成的水相分散介質(zhì)和有機(jī)相混合，用700W的細(xì)胞粉碎機(jī)超聲分散3 min。(4)磁力條件下連續(xù)攪拌12 h使氯仿?lián)]發(fā)完全。(5) 16000轉(zhuǎn)/分離心分離、水洗、冷凍干燥得到聚乳酸微球。該微球形態(tài)由透射電鏡(TEM)測(cè)定，粒徑分布由動(dòng)態(tài)光散射儀(DLS)測(cè)定。按本實(shí)施例制備的聚乳酸微球平均粒徑為253 nm，粒徑分布較窄(0. 122)。四、實(shí)施例4
(1)稱取20 mg磺基琥珀酸雙十三烷基酯鈉溶于50 ml蒸餾水中，磁力條件下攪拌0.5 h，得到水相分散介質(zhì)。(2)稱取100 mg相對(duì)分子量為10000的聚乳酸溶于5 ml 二氯甲烷中，得到有機(jī)相。(3)將制成的水相分散介質(zhì)和有機(jī)相混合，用900W的細(xì)胞粉碎機(jī)超聲分散1 min。(4)磁力條件下連續(xù)攪拌12 h使氯仿?lián)]發(fā)完全，得到聚乳酸微球的懸浮液。(5)取以上懸浮液經(jīng)14000轉(zhuǎn)/分離心分離、水洗、冷凍干燥得到聚乳酸微球。該微球形態(tài)由透射電鏡(TEM)測(cè)定，粒徑分布由動(dòng)態(tài)光散射儀(DLS)測(cè)定。按本實(shí)施例制備的聚乳酸微球平均粒徑為356 nm，粒徑分布較窄(0. 132)。五、實(shí)施例5
(1)稱取15 mg磺基琥珀酸雙十三烷基酯鈉溶于50 ml蒸餾水中，磁力條件下攪拌0.5 h，得到水相分散介質(zhì)。(2)稱取200 mg相對(duì)分子量為20000的聚乳酸溶于5 ml三氯甲烷中，得到有機(jī)相。(3)將制成的水相分散介質(zhì)和有機(jī)相混合，用900W的細(xì)胞粉碎機(jī)超聲分散1 min。(4)磁力條件下連續(xù)攪拌12 h使氯仿?lián)]發(fā)完全，得到聚乳酸微球的懸浮液。(5)取以上懸浮液經(jīng)12000轉(zhuǎn)/分離心分離、水洗、冷凍干燥得到聚乳酸微球。該微球形態(tài)由透射電鏡(TEM)測(cè)定，粒徑分布由動(dòng)態(tài)光散射儀(DLS)測(cè)定。按本實(shí)施例制備的聚乳酸微球平均粒徑為453 nm，粒徑分布較窄(0. 123)。六、實(shí)施例6
(1)稱取50 mg磺基琥珀酸雙十三烷基酯鈉溶于50 ml蒸餾水中，磁力條件下攪拌0.5 h，得到水相分散介質(zhì)。(2)稱取50 mg相對(duì)分子量為50000的聚乳酸溶于5 ml 二氯甲烷中，得到有機(jī)相。(3)將制成的水相分散介質(zhì)和有機(jī)相混合，用500W的細(xì)胞粉碎機(jī)超聲分散5 min。(4)磁力條件下連續(xù)攪拌12 h使氯仿?lián)]發(fā)完全。(5)取以上懸浮液經(jīng)10000轉(zhuǎn)/分離心分離、水洗、冷凍干燥得到聚乳酸微球。該微球形態(tài)由透射電鏡(TEM)測(cè)定(圖3)，粒徑分布由動(dòng)態(tài)光散射儀(DLS)測(cè)定 (圖4)。按本實(shí)施例制備的聚乳酸微球平均粒徑為553 nm，粒徑分布較窄(0. 170)。七、實(shí)施例7
(1)稱取50 mg磺基琥珀酸雙十三烷基酯鈉溶于50 ml蒸餾水中，磁力條件下攪拌0.5 h，得到水相分散介質(zhì)。(2)稱取50 mg相對(duì)分子量為100000的聚乳酸及10 mg非洛地平(一種降血壓藥物)溶于5 ml由三氯甲烷和二氯甲烷組成的混合液(三氯甲烷和二氯甲烷的體積比為1:1) 中，得到有機(jī)相。(3)將制成的水相分散介質(zhì)和有機(jī)相混合，用500W的細(xì)胞粉碎機(jī)超聲分散5 min。(4)磁力條件下連續(xù)攪拌12 h使氯仿?lián)]發(fā)完全，得到聚乳酸微球的懸浮液。(5)取以上懸浮液經(jīng)20000轉(zhuǎn)/分離心分離、水洗、冷凍干燥得到聚乳酸微球。該微球形態(tài)由透射電鏡(TEM)測(cè)定，如圖5所示，粒徑分布由動(dòng)態(tài)光散射儀 (DLS)測(cè)定，如圖6所示。按本實(shí)施例制備的聚乳酸微球平均粒徑為59 nm，粒徑分布較窄 (0. 166)。
權(quán)利要求
1.一種制備聚乳酸納微米球的方法，其特征在于包括如下步驟1)將聚乳酸溶于有機(jī)溶劑中，形成有機(jī)相；2)將上述有機(jī)相加入到水相分散介質(zhì)中；3)超聲分散；4)磁力連續(xù)攪拌，待有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，得到聚乳酸微球的懸浮液；5)將聚乳酸微球的懸浮液經(jīng)1000(Γ20000轉(zhuǎn)/分離心分離，再經(jīng)水洗、冷凍干燥得到聚乳酸微球。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備聚乳酸納微米球的方法，其特征在于所述聚乳酸的相對(duì)分子量為1000 100000。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備聚乳酸納微米球的方法，其特征在于所述水相分散介質(zhì)為質(zhì)量百分比濃度為0.1 %。 1.0 %。的磺基琥珀酸雙十三烷基酯鈉水溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備聚乳酸納微米球的方法，其特征在于所述有機(jī)溶劑為三氯甲烷或二氯甲烷。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備聚乳酸納微米球的方法，其特征在于所述超聲分散時(shí)間為 Γ5 min，超聲功率為500W 900W。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述制備聚乳酸納微米球的方法，其特征在于所述超聲分散時(shí)的裝置為細(xì)胞粉碎機(jī)。
全文摘要
一種制備聚乳酸納微米球的方法，涉及一種高效分散劑在制備聚乳酸納微米球中的應(yīng)用。本發(fā)明技術(shù)方案是利用一種高效分散劑，采用溶劑揮發(fā)法制備粒徑可控的聚乳酸納微米球。本發(fā)明解決了制備聚乳酸納微米球時(shí)分散劑用量大，微球中殘留的分散劑濃度高而導(dǎo)致的細(xì)胞生物相容性差，粒徑分布寬、難于控制的缺點(diǎn)。本發(fā)明制備容易，適用于以聚乳酸納微米球?yàn)檩d體的藥物負(fù)載與控制釋放。
文檔編號(hào)C08J3/16GK102516565SQ20111041402
公開(kāi)日2012年6月27日 申請(qǐng)日期2011年12月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月13日
發(fā)明者朱愛(ài)萍, 栗鳳娟 申請(qǐng)人:揚(yáng)州大學(xué)