專利名稱：薪草多糖及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于草本植物的提取、改性、精制技術(shù)，具體地說，涉及薪草多糖的制備方法以及由此得到的薪草多糖。
背景技術(shù)：
薪草(Mesona chinensis Benth.)是唇形科、多年生草本植物；通常高15～50厘米，莖方柱狀，下部伏地，上部直立，多少分枝；小枝具4棱，初被長柔毛或剛毛狀長柔毛。葉對生，紙質(zhì)或近膜質(zhì)，卵形、闊卵形或近圓形，長2～5厘米或過之，頂端短尖或鈍，基部極闊的楔尖、鈍或圓，邊緣有鋸齒。兩面被柔毛或近無毛；側(cè)脈每邊6～7條，在上面平坦或微凹；葉柄通常長不超過15毫米。夏、秋季開花；花白色或淡紅色，甚小，長約3毫米，排成頂生且多花的總狀花序，總花梗短；苞片圓形或菱形卵圓形，頂端尾尖、通常比花略短，常有顏色；花萼鐘形，長2～2.5毫米，被白色柔毛，脈不明顯，上唇的中間裂片特大，下唇通常全緣；花冠外面被微柔毛，冠管極短，喉部闊大，冠檐二唇形，上唇4裂，側(cè)身裂片明顯較中間裂片大，下唇舟狀，全緣；雄蕊4枚，伸出，后2枚雄蕊的花絲基部具齒狀附屬物。果萼增大，簡狀或近壇狀，長3～5毫米，有10縱脈，脈間蜂巢狀。淺根且根系發(fā)達，再生能力強。生于水溝邊、疏林下斜坡的濕潤地或沙地草叢中，我國長江流域及江南各省區(qū)均有栽種。
薪草含有多糖、3-谷甾醇、谷甾烯醇、谷甾醇葡萄糖、槲皮素、熊果酸、齊墩果酸及與其結(jié)構(gòu)極為相似的五環(huán)三萜酸化合物等生理活性成分，以及多種氨基酸、維生素，以B族維生素含量較高；和少量蛋白質(zhì)、脂肪、色素等，還含有較多礦物元素。
薪草作為中草藥在我國已有悠久的歷史，作為食用具有保健功能?！侗静菥V目》記載...不溫不火，性味澀、甘、寒，具有清肺、化痰、利尿、解熱毒，適合四季養(yǎng)生之雇傭...。在江南民間，也有將其用于食品、飲料中的一些傳統(tǒng)做法，如將其粉碎后直接加入食品中，但現(xiàn)有的都是粗放式的應(yīng)用，一直缺少一種工業(yè)化的提純、改性方法，影響了薪草的應(yīng)用范圍和其附加值的提高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的問題是薪草中有效成分的提取，提供一種薪草多糖的制備方法。
本發(fā)明的另一目的是提供改性、提純后的薪草多糖。
本發(fā)明采用的技術(shù)方案是這樣的薪草多糖的制備方法，包括以下的步驟a)將薪草的干燥全草洗凈、粉碎，以有機溶劑回流，脫色處理后用熱水浸提，過濾；b)調(diào)節(jié)濾液的PH值，加入果膠酯酶，在30-50℃下靜置2-4小時，然后滅酶，調(diào)PH至中性；c)加入鋁鹽使之沉析，對所得鋁中間體過濾脫水，加入雙氧水，在50-80℃下保溫半小時以上脫水；d)加入采用有機酸配制的酸性乙醇，在室溫下攪拌2-4小時，過濾去醇，干燥。
優(yōu)選的方案是步驟a)中采用的有機溶劑為乙醇，體積濃度大于75％；步驟d)中的酸性乙醇為乙醇中加入2-30％的檸檬酸配制而成；步驟d)中過濾去醇后再次用濃度在80％以上的乙醇洗滌，過濾去醇，然后干燥。
本發(fā)明在b)步驟中加入果膠酯酶(EC3.1.1.11)，對該薪草多糖進行修飾，使薪草多糖組成性單糖成分的半乳糖醛酸的甲基化羧基去甲氧基化。若加入的系霉菌果膠酯酶，需先加酸將濾液PH調(diào)節(jié)至3～5；若加入的系植物或細菌果膠酯酶，需先加堿將濾液PH調(diào)節(jié)至7.5～8。所以，在b)步驟這一環(huán)節(jié)，有兩種優(yōu)選方案，一是先加酸調(diào)濾液的PH至3.5-5，加入0.1-1‰果膠酯酶，在40-50℃下靜置2-4小時，然后滅酶，調(diào)PH至中性；另一方案是先加堿調(diào)濾液的PH至7.5-8，加入0.1-1‰果膠酯酶，在40-50℃下靜置2-4小時，然后滅酶，調(diào)PH至中性。
采用所述方法后即得到改性、提純后的薪草多糖，完成本發(fā)明的第二發(fā)明目的。
本發(fā)明在c)步驟中加入無毒的脫色劑雙氧水，對原薪草所帶來的植物色素進行脫色反應(yīng)。所以對薪草多糖鋁中間體進行脫色，是由于在薪草多糖鋁鹽與水的混合液中色素與薪草多糖鋁鹽為松散吸附，色素分散性好，裸露比表面大，易于反應(yīng)，可提高脫色效果。
本發(fā)明在d)步驟中，應(yīng)用有機絡(luò)合理論，采用能與金屬鋁離子形成絡(luò)合物的檸檬酸進行脫鋁轉(zhuǎn)化。
具體實施例方式
以下通過實施例進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明的范圍并不限于實施例。
實施例1將薪草的干燥全草100g洗凈，粉碎至40目；用體積濃度大于75％的乙醇回流2次，每次2小時，進行脫色預(yù)處理；殘渣加10倍水，在60℃下提取2次，每次2小時，過濾棄渣；2次提取液合并，加入鹽酸將該液體的PH值調(diào)至3～5左右，再加入0.5‰霉菌果膠酯酶在40～50℃下保溫3小時，然后加溫至80℃持續(xù)5分鐘以滅酶，然后調(diào)PH值中性，離心除去產(chǎn)生的沉淀；在攪拌的同時往該液體中加入結(jié)晶硫酸鋁的飽和水溶液使之沉析，對所得鋁鹽中間體過濾脫水；在攪拌條件下在3％H2O2溶液中加入該鋁鹽中間體，于60℃下保溫60分鐘進行脫色，過濾脫水；然后在攪拌條件下往85％乙醇中加入檸檬酸5％使之充分溶解后，將脫色后的鋁鹽中間體加入，并在室溫下反應(yīng)3小時，過濾去醇；再用乙醇洗滌二次，過濾去醇，干燥。
實施例2將薪草的干燥全草100g洗凈，粉碎至40目；用體積濃度大于75％的乙醇回流2次，每次2小時，進行脫色預(yù)處理；殘渣加10倍水，在98℃下提取2次，每次2小時，過濾棄渣；2次提取液合并，加入氫氧化鈉將該液體的PH值調(diào)至7.5～8左右，再加入0.5‰植物或細菌果膠酯酶在40～50℃下保溫3小時，然后加溫至80℃持續(xù)5分鐘以滅酶，然后調(diào)PH值中性，離心除去產(chǎn)生的沉淀；在攪拌的同時往該液體中加入結(jié)晶硫酸鋁的飽和水溶液使之沉析，對所得鋁鹽中間體過濾脫水；在攪拌條件下在3％H2O2溶液中加入該鋁鹽中間體，于60℃下保溫60分鐘進行脫色，過濾脫水；然后在攪拌條件下往85％乙醇中加入檸檬酸25％使之充分溶解后，將脫色后的鋁鹽中間體加入，并在室溫下反應(yīng)3小時，過濾去醇；再用乙醇洗滌二次，過濾去醇，干燥。
實施例1和實施例2得到的為薪草多糖粗品，為檢測其物化性能，可將上述薪草多糖用Sephadex G-75柱層析，0.9％NaCl溶液洗脫，分部收集。用苯酚—硫酸法鑒定多糖部位，收集多糖單一峰，蒸餾水透析脫鹽，濃縮，干燥，得到薪草多糖純品。
上述薪草多糖純品通過紙層析顯示單一斑點；凝膠電泳和醋酸纖維薄膜電泳為單一條帶。
上述薪草多糖純品水溶液點樣于濾紙，用Schiff試劑染色呈現(xiàn)玫瑰紅斑點；用阿利新藍(Alcian Blue 8GS)、甲苯胺藍(ToluidineBlue)染色呈藍色斑點；與Fehling試劑、碘—碘化鉀反應(yīng)呈陰性，與硫酸蒽酮、硫酸咔唑反應(yīng)呈陽性。
同時，經(jīng)紫外掃描均未發(fā)現(xiàn)核酸(260nm)和蛋白質(zhì)(280nm)特征吸收峰。
實施例1和實施例2所得到的薪草多糖可應(yīng)用于食品行業(yè)作增稠劑、凝固劑、穩(wěn)定劑、冰晶抑制劑、被膜劑、乳化劑或懸浮劑等使用，也可用于化妝品及制藥等行業(yè)。
經(jīng)藥理實驗證明，具有增強小白鼠機體免疫機能的功效，對小白鼠腸瘤S180呈抑制作用，抑制率可達60％左右；對H2O2所致大鼠肝均漿MDA的生成具有明顯的抑制作用(P＜0.01)，并呈現(xiàn)出一定的量效關(guān)系，具有顯著的抗脂質(zhì)過氧化作用。
權(quán)利要求
1.薪草多糖的制備方法，包括以下的步驟a)將薪草的干燥全草洗凈、粉碎，以有機溶劑回流，脫色處理后用熱水浸提，過濾；b)調(diào)節(jié)濾液的PH值，加入果膠酯酶，在30-50℃下靜置2-4小時，然后滅酶，調(diào)PH至中性；c)加入鋁鹽使之沉析，對所得鋁中間體過濾脫水，加入雙氧水，在50-80℃下保溫半小時以上脫水；d)加入采用有機酸配制的酸性乙醇，在室溫下攪拌2-4小時，過濾去醇，干燥。
2.如權(quán)利要求1所述的薪草多糖的制備方法，其特征在于步驟a)中采用的有機溶劑為乙醇，體積濃度大于75％。
3.如權(quán)利要求1所述的薪草多糖的制備方法，其特征在于步驟b)中先加酸調(diào)濾液的PH至3.5-5，加入0.1-1‰果膠酯酶，在40-50℃下靜置2-4小時，然后滅酶，調(diào)PH至中性。
4.如權(quán)利要求1所述的薪草多糖的制備方法，其特征在于步驟b)中先加堿調(diào)濾液的PH至7.5-8，加入0.1-1‰果膠酯酶，在40-50℃下靜置2-4小時，然后滅酶，調(diào)PH至中性。
5.如權(quán)利要求3或4所述的薪草多糖的制備方法，其特征在于步驟d)中的酸性乙醇為乙醇中加入2-30％的檸檬酸配制而成。
6.如權(quán)利要求3或4任一項所述的薪草多糖的制備方法，其特征在于步驟d)中過濾去醇后再次用濃度在80％以上的乙醇洗滌，過濾去醇，然后干燥。
7.薪草多糖，以權(quán)利要求1-6中任一項所述的方法制備而成。
全文摘要
本發(fā)明涉及薪草多糖及其制備方法，將薪草的干燥全草洗凈、粉碎，以有機溶劑回流，脫色處理后用熱水浸提，過濾；調(diào)節(jié)濾液的pH值，加入果膠酯酶，在30－50℃下靜置2－4小時，然后滅酶，調(diào)pH至中性；加入鋁鹽使之沉析，對所得鋁中間體過濾脫水，加入雙氧水，在50－80℃下保溫半小時以上脫水；加入采用有機酸配制的酸性乙醇，在室溫下攪拌2－4小時，過濾去醇，干燥。本發(fā)明可從薪草中提取薪草多糖，得到改性、提純后的薪草多糖。
文檔編號C08B37/00GK1690084SQ20041001803
公開日2005年11月2日 申請日期2004年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月29日
發(fā)明者魯銘 申請人:魯銘