專利名稱：食用菌提取核酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食用菌，是一種在食用菌中提取核酸的方法。
國際研究公認核酸具有抗腫瘤、降血壓、降血脂、修復(fù)基因，改變基因位點及使基因重組等作用。目前，核酸的提取一般采用綿羊、牛胸腺等，提取這種具有生物活性的核酸，主要用于分子生物學(xué)研究。有報道商品名為“珍奧”的核酸，是在植物內(nèi)提取，但由于其提取率很低，一般為1％左右，成本極高。本發(fā)明經(jīng)檢索，未發(fā)現(xiàn)采用食用菌提取核酸的公開文獻。
本發(fā)明的目的是，提供一種采用食用菌提取核酸的方法，使其提取率可達8-30％左右，降低核酸的生產(chǎn)成本。
本發(fā)明為完成上述發(fā)明目的，提供一種在食用菌中提取核酸的方法，本方法采用的食用菌，可以是食用菌子實體，也可以是食用菌發(fā)酵液，采用食用菌發(fā)酵液的提取方法是，用斜面菌種進行一級種子培養(yǎng)、二級種子培養(yǎng)及三級種子培養(yǎng)，再進行發(fā)酵培養(yǎng)，將發(fā)酵液的溫度加熱到60-100℃，終止發(fā)酵后，在發(fā)酵液中加入0.1-0.2N的NaOH，使其最終濃度為1％-2％，控制溫度50-100℃，維持1-2小時，經(jīng)泵壓將發(fā)酵液放到料槽中，經(jīng)板框壓濾，濾渣用蒸餾水沖洗，濾液混合備用，然后將濾液減壓濃縮，使之體積為原濾液體積的1/5-1/10，再加4倍體積的95％乙醇進行醇析，調(diào)整PH值，使其在2-3之間，再進行離心，得到沉淀物核酸。采用食用菌子實體粉碎，加入5-10倍蒸餾水，加熱至60-100℃，過濾，將濾渣加入蒸餾水，加熱至60-100℃，保持1-2小時后過濾，將濾液混合濃縮至原液的1/3-1/5，加入4-5倍的乙醇，調(diào)整PH值為1.5-3.5保持24-36小時，過濾后得到核酸。所述的斜面菌種組份是，淀粉150-250g，麥麩30-60g，蔗糖10-20g，葡萄糖3-10g，瓊脂15-25g，水1000毫升。所述一級種子培養(yǎng)，二級種子培養(yǎng)及三級種子培養(yǎng)的組份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，蔗糖0.5-2％，葡萄糖0.5-2％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％。發(fā)酵培養(yǎng)的組份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％，豆油適量。一級種子培養(yǎng)、二級種子培養(yǎng)及三級種子培養(yǎng)的發(fā)酵條件是，攪拌速度120-150r/min，通氣量1∶0.5-v/v.min，培養(yǎng)溫度25-30℃，培養(yǎng)時間，5-7天，接種量1-5％，罐壓為0.3-0.5kg/cm2。發(fā)酵培養(yǎng)的發(fā)酵條件是攪拌速度150-220r/min，通氣量1∶0.5-1∶1v/v.min，培養(yǎng)溫度20-30℃，培養(yǎng)時間7-12天，接種量10-15％，罐壓0.3-0.5kg/cm2。
本發(fā)明的貢獻在于，提供了一種采用食用菌提取核酸的方法。采用本發(fā)明的方法在食用菌中提取核酸，其優(yōu)點在于其提取率可達8-30％左右，采用發(fā)酵液提取可達到30％左右，采用子實體提取可達到8-10％，提取率比在已有植物中提取大幅度提高，大幅度降低了核酸的生產(chǎn)成本，為增強體質(zhì)，增強免疫功能提供了核酸的可食用性。
本發(fā)明采用發(fā)酵液提取核酸的實施例將篩選后的菌種加入1000毫升水，并加入馬鈴薯液體200g，麥麩液體60g(也可以只采用馬鈴薯或麥麩)，蔗糖14g，葡萄糖3g(也可在此兩種糖中任選一種)，瓊脂22g，將PH值保持自然，然后進行一級種子培養(yǎng)、二級種子培養(yǎng)及三級種子培養(yǎng)，這三級種子培養(yǎng)的組份是，玉米淀粉0.8％，蛋白胨(也可采用硫酸0.1-0.3％銨)，KH2PO40.15％，MgSO40.1％，在培養(yǎng)罐中加入一定量的水，一般根據(jù)罐的容量決定，通常是罐容量的60％。上述三種種子培養(yǎng)的發(fā)酵條件是攪拌速度120r/min，通氣量1∶1v/v.min，培養(yǎng)溫度25℃，培養(yǎng)時間7天，接種量4％，罐壓0.5kg/cm2。再進行發(fā)酵培養(yǎng)，其組份是，玉米淀粉1％，蛋白胨0.2％，硫酸銨0.1％，KH2PO40.1％，MgSO40.1％，再加入適量豆油(也可加入菜子油替代)，便于消沫，PH值保持自然。此時的發(fā)酵條件是，攪拌速度200r/min，通氣量1∶0.5v/v.min，培養(yǎng)溫度25℃，培養(yǎng)時間10天，接種量10％，罐壓0.3kg/cm2，當發(fā)酵終止后，將發(fā)酵液加熱到70℃，并加入0.2N的NaOH，使其最終濃度為2％，攪拌速度為750r/min，維持2小時，然后經(jīng)泵壓將發(fā)酵液放到料槽中經(jīng)板框壓濾，濾渣用蒸餾水沖洗，濾液混合備用，然后將濾液減壓濃縮，使體積為原濾液的1/5，再加4倍體積的95％乙醇進行，用濃鹽酸調(diào)整PH值為2，進行離心，得到沉淀物核酸。
本發(fā)明采用食用菌子實體提取核酸，實施例將食用菌干品粉碎成20目，加入8倍蒸餾水，加熱至80℃，進行過濾，將濾渣加入2倍蒸餾水，加熱至75℃，保持1小時后過濾，將濾液混合濃縮至原液的1/5，加入4倍的乙醇，調(diào)整PH值為2，保持24-36小時，過濾后得到核酸。用本發(fā)明方法提取的核酸，可用于制作口服液或膠囊等，供人們?nèi)粘ｏ嬘谩?br> 權(quán)利要求
1.食用菌提取核酸的方法，其特征在于本方法采用的食用菌，可以是食用菌子實體，也可以是食用菌發(fā)酵液，采用食用菌發(fā)酵液的提取方法是，用斜面菌種進行一級種子培養(yǎng)、二級種子培養(yǎng)及三級種子培養(yǎng)，再進行發(fā)酵培養(yǎng)，將發(fā)酵液的溫度加熱到60-100℃，終止發(fā)酵后，在發(fā)酵液中加入0.1-0.2N的NaOH，使其最終濃度為1％-2％，控制溫度50-100℃，維持1-2小時，經(jīng)泵壓將發(fā)酵液放到料槽中，經(jīng)板框壓濾，濾渣用蒸餾水沖洗，濾液混合備用，然后將濾液減壓濃縮，使之體積為原濾液體積的1/5-1/10，再加4倍體積的95％乙醇進行醇析，調(diào)整PH值，使其在2-3之間，再進行離心，得到沉淀物核酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于采用食用菌子實體粉碎，加入5-10倍蒸餾水，加熱至60-100℃，過濾，將濾渣加入蒸餾水，加熱至60-100℃，保持1-2小時后過濾，將濾液混合濃縮至原液的1/3-1/5，加入4-5倍的乙醇，調(diào)整PH值為1.5-3.5，保持24-36小時，過濾后得到核酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于所述的斜面菌種組份是，淀粉150-250g，麥麩30-60g，蔗糖10-20g，葡萄糖3-10g，瓊脂15-25g，水1000毫升。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于所述一級種子培養(yǎng)，二級種子培養(yǎng)及三級種子培養(yǎng)的組份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，蔗糖0.5-2％，葡萄糖0.5-2％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于發(fā)酵培養(yǎng)的組份是玉米淀粉0.5-2％；蛋白胨0.1-0.3％，KH2PO40.1-0.3％，MgSO40.05-0.15％，豆油適量。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于一級種子培養(yǎng)、二級種子培養(yǎng)及三級種子培養(yǎng)的發(fā)酵條件是，攪拌速度120-150r/min，通氣量1∶0.5-v/v.min，培養(yǎng)溫度25-30℃，培養(yǎng)時間，5-7天，接種量1-5％，罐壓為0.3-0.5kg/cm2。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食用菌提取核酸的方法，其特征在于發(fā)酵培養(yǎng)的發(fā)酵條件是攪拌速度150-220r/min，通氣量1∶0.5-1∶1v/v.min，培養(yǎng)溫度20-30℃，培養(yǎng)時間7-12天，接種量10-15％，罐壓0.3-0.5kg/cm2。
全文摘要
本發(fā)明涉及食用菌,是一種在食用菌中提取核酸的方法。本方法采用的食用菌,可以是食用菌子實體,也可以是食用菌發(fā)酵液,其提取率可達8—30%左右,采用發(fā)酵液提取可達到30%左右,采用子實體提取可達到8—10%,提取率比在已有植物中提取大幅度提高,大幅度降低了核酸的生產(chǎn)成本,為增強體質(zhì),增強免疫功能提供了核酸的可食用性。
文檔編號C07H21/00GK1297893SQ9911257
公開日2001年6月6日 申請日期1999年11月26日 優(yōu)先權(quán)日1999年11月26日
發(fā)明者宋愛榮 申請人:萊陽農(nóng)學(xué)院