專(zhuān)利名稱(chēng)：：轉(zhuǎn)移抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及副作用減小的轉(zhuǎn)移抑制劑。癌癥的手術(shù)治療中遇到的最大困難之一是手術(shù)后復(fù)發(fā)。在許多情況下，轉(zhuǎn)移是復(fù)發(fā)的主要誘因。轉(zhuǎn)移包括一系列復(fù)雜的反應(yīng)，包括從原發(fā)性病灶分離癌細(xì)胞，然后浸潤(rùn)到周?chē)M織中，并且在身體的遠(yuǎn)距離部位增殖，從而形成繼發(fā)性、轉(zhuǎn)移病灶。即使從原發(fā)性病灶分離出來(lái)后，癌細(xì)胞受附近存在的細(xì)胞外基質(zhì)阻礙不能進(jìn)一步擴(kuò)散，這些細(xì)胞外基質(zhì)含有糖蛋白，如各種膠原蛋白，纖連蛋白和昆布多糖(laminins)、蛋白聚糖等。另一方面，癌細(xì)胞分裂并降解細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)并遷移，同時(shí)充分利用它們自身或間質(zhì)細(xì)胞分泌的各種蛋白酶和糖苷酶。按這種方式從原發(fā)性病灶分離出來(lái)的癌細(xì)胞侵入維管結(jié)構(gòu)，然后遷移到遠(yuǎn)處器官，浸潤(rùn)到血管內(nèi)皮的基底膜中，最后在遠(yuǎn)處組織中定位增殖。因此，轉(zhuǎn)移的抑制在癌癥治療中起著重要作用。為這一目的，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了多種轉(zhuǎn)移抑制劑，如血小板聚集抑制劑、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑以及粘著因子抑制劑。但是，這并沒(méi)有為抑制轉(zhuǎn)移提供任何有效的方法。本發(fā)明的目的在于提供轉(zhuǎn)移抑制劑，其含有作為活性成分的化合物，該化合物沒(méi)有任何副作用，并且表現(xiàn)出安全性增高和高效的轉(zhuǎn)移抑制活性，而不象通常已知的化療藥物那樣。本發(fā)明人從提高安全性的安全角度出發(fā)，注意到食用植物中含有的天然存在的化合物顯示出的生理活性，并且在尋找一種即使是在口服給藥后也誘發(fā)對(duì)轉(zhuǎn)移的抑制活性的化合物時(shí)，進(jìn)行了廣泛的調(diào)查研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)了以下列化學(xué)式存在的熊果酸，其廣泛分布于各種植物中，如蘋(píng)果、柿子和梨，其能夠通過(guò)口服或靜脈給藥方法抑制轉(zhuǎn)移，我們根據(jù)這一發(fā)現(xiàn)進(jìn)行了進(jìn)一步的累積研究，結(jié)果完成了本發(fā)明本發(fā)明涉及轉(zhuǎn)移抑制劑，其含有熊果酸或其鹽作為活性成份。熊果酸可以是游離酸或藥學(xué)上可接受的鹽如鈉和鉀鹽的形式。熊果酸或其鹽可以給予成年病人的每日劑量范圍是10mg至3,000mg，優(yōu)選約500mg，口服，或胃腸外給藥，例如，注射給藥，如果需要的話(huà)。熊果酸或其鹽可以直接按原樣給予患者或者加工成適宜的劑型給藥。這樣的劑型的具體例子包括內(nèi)服的藥物制劑，如一般的粉末、顆粒、片劑、膠囊和液體(包括糖漿)，可以按照常用的方法將熊果酸與常用的添加劑結(jié)合在一起制備這些藥物制劑。在內(nèi)服的藥物制劑情況下，通常已知的藥物制劑的成分或組分可用作這樣的添加劑，如賦形劑(如淀粉和乳糖)、粘合劑(如纖維素和聚乙烯吡咯烷酮)、崩解劑(如羧甲基纖維素)、潤(rùn)滑劑(如硬脂酸鎂)、包衣劑(如羥乙基纖維素)、調(diào)味劑、著色劑、防腐劑和水乳化劑。熊果酸屬于一種三萜烯，如上面給出的化學(xué)式所示，并且其毒性顯著降低，可以安全地給予患者，可以用事實(shí)證明其在體外對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的增殖不起任何副作用，并且其廣泛用作藥物或食用乳化劑。根據(jù)本發(fā)明的熊果酸表現(xiàn)出令人滿(mǎn)意的轉(zhuǎn)移抑制活性，從下面所述的測(cè)試實(shí)施例可見(jiàn)這一點(diǎn)，并且其可用作針對(duì)各種癌癥，如惡性黑素瘤、子宮肌瘤、食管癌、皮膚癌、胃癌、肺癌、小腸和大腸癌、胰腺癌、乳腺癌和膀胱癌，以及惡性腫瘤，如絨毛膜癌、腦瘤、淋巴肉瘤和白血病的轉(zhuǎn)移抑制劑。本發(fā)明提供了毒性很低、可以口服或注射給予患者的轉(zhuǎn)移抑制劑，即一種副作用得以降低的新型藥物，從而為癌癥的醫(yī)學(xué)治療和藥學(xué)工業(yè)做出了很大貢獻(xiàn)。下列實(shí)施例詳細(xì)地說(shuō)明了本發(fā)明。測(cè)試實(shí)施例1熊果酸對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞增殖的影響(a)測(cè)試方法將人正常成纖維細(xì)胞和B16F10惡性黑素瘤懸浮液(5×104細(xì)胞)培養(yǎng)2天，然后分別在0.1μM和1μM熊果酸的存在下以及無(wú)熊果酸的存在下培養(yǎng)24小時(shí)。收集細(xì)胞，并記下他們的數(shù)目來(lái)確定熊果酸對(duì)細(xì)胞增殖的影響。(b)測(cè)試結(jié)果測(cè)試結(jié)果示于表1，其表明濃度為1μM和0.1μM的熊果酸對(duì)黑素瘤細(xì)胞的增殖沒(méi)有任何影響。表1熊果酸對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的影響</tables>注增殖率(％)以用熊果酸處理過(guò)的增殖細(xì)胞的數(shù)目對(duì)沒(méi)用熊果酸處理過(guò)的增殖細(xì)胞數(shù)目的比值表示。實(shí)施例1按照下列配方制備轉(zhuǎn)移抑制藥物制劑內(nèi)服制劑熊果酸300mg羧甲基纖維素鈉50mg純水加至總量為10ml可注射的溶液熊果酸250mg芝麻油加至總量為5ml實(shí)施例2抑制惡性黑素瘤轉(zhuǎn)移的小鼠試驗(yàn)(a)測(cè)試方法每組含有10只動(dòng)物的幾組小鼠靜脈給予B16F10惡性黑素瘤細(xì)胞的懸浮液。注射黑素瘤細(xì)胞后7至13天期間，每天向小鼠口服給予含熊果酸的口服制劑一次，同時(shí)每天向動(dòng)物腹膜內(nèi)給予可注射的溶液一次，在第14天切除肺以檢查各組中已定位于肺的轉(zhuǎn)移病灶的數(shù)目。用下列化學(xué)式所表示的齊墩果醇酸進(jìn)行同樣的試驗(yàn)，并墩果醇酸在不同的位置上含有熊果酸的29-位甲基基團(tuán)，其也和熊果酸一樣屬于五環(huán)三萜烯。(b)測(cè)試結(jié)果上面的試驗(yàn)結(jié)果列于表2中，其表明腹膜內(nèi)和口服給藥后，同不給予熊果酸治療的對(duì)照組相比較，熊果酸顯著降低了黑素瘤細(xì)胞在肺中的轉(zhuǎn)移。另一方面，即使所給劑量為300mg/kg，齊墩果醇酸仍沒(méi)有表現(xiàn)出顯著的轉(zhuǎn)移抑制作用。表2熊果酸抑制轉(zhuǎn)移的結(jié)果注顯著性試驗(yàn)*，p＜0.10，針對(duì)對(duì)照組**，p＜0.05，針對(duì)對(duì)照組權(quán)利要求1.一種轉(zhuǎn)移抑制劑，其含有熊果酸或其鹽作為活性成分。2.如權(quán)利要求1所要求的轉(zhuǎn)移抑制劑，其適于口服給藥或注射來(lái)使用。3.如權(quán)利要求2所要求的轉(zhuǎn)移抑制劑，對(duì)于成人患者其每日劑量的范圍是10mg至3,000mg。全文摘要本發(fā)明提供了一種新的毒性程序較低的轉(zhuǎn)移抑制劑，其含有熊果酸或其鹽作為活性成分，其可以口服或通過(guò)注射來(lái)向患者給藥，從而使患者能接受手術(shù)后不臥床治療。文檔編號(hào)C07J63/00GK1157716SQ96114489公開(kāi)日1997年8月27日申請(qǐng)日期1996年11月15日優(yōu)先權(quán)日1995年11月16日發(fā)明者石川弘倫,渡邊朋子,西室悟司,廣田滿(mǎn)申請(qǐng)人:日本化學(xué)研究股份有限公司