專(zhuān)利名稱(chēng)：含有連接碳環(huán)的取代苯并咪唑堿的抗病毒核苷類(lèi)似物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有替代糖基的碳環(huán)的某些嘌呤核苷類(lèi)似物，其可藥用衍生物，以及它們?cè)卺t(yī)療，特別是在治療某些病毒感染方面的用途。
乙型肝炎病毒(HBV)是感染人類(lèi)的含有病毒的小DNA。它是與已知嗜肝DNA病毒密切相關(guān)的一類(lèi)病毒中的一員，這類(lèi)病毒都可以選擇性地感染哺乳動(dòng)物或禽類(lèi)，如土撥鼠和鴨子。
世界范圍內(nèi)，HBV是主要的病毒病原體。它在亞洲國(guó)家極為普遍并流行于亞撒哈拉非洲。該病毒與原發(fā)性肝細(xì)胞癌有病原性的聯(lián)系，而且被認(rèn)為世界上80％的肝癌由它引發(fā)。在美國(guó)，每年有一萬(wàn)以上的人因HBV病就醫(yī)，平均250人死于疾病爆發(fā)。
保守估計(jì)，美國(guó)目前有50萬(wàn)-1百萬(wàn)感染攜帶者。攜帶者中發(fā)展成慢性活動(dòng)性肝炎患者的將超過(guò)25％，而且常常會(huì)發(fā)展成肝硬變。據(jù)估計(jì)在美國(guó)每年有5000人死于與HBV有關(guān)的肝硬變，另外可能有1000人死于與HBV有關(guān)的肝癌。盡管正在全球性推廣HBV疫苗，但仍然需要有效的抗HBV化合物。大量持續(xù)感染的攜帶者，估計(jì)全世界有2.2億人，他們從接種疫苗中得不到任何好處，他們還將有由HBV誘發(fā)成肝病的高危險(xiǎn)性。這個(gè)攜帶者群作為易受感染者源延長(zhǎng)了疾病的存在，特別是在地方病區(qū)域或高危群體如IV藥物濫用者和同性戀者中。因此，十分需要有效的抗病毒劑，既能控制慢性感染又減緩肝細(xì)胞癌的發(fā)展。
HBV感染的臨床表現(xiàn)包括頭疼，發(fā)燒，不適，惡心，嘔吐，厭食和腹痛。在人體持續(xù)數(shù)周或數(shù)月的恢復(fù)過(guò)程中病毒的復(fù)制常常受到免疫反應(yīng)控制，但感染可能更加嚴(yán)重，以致發(fā)展成上述持久慢性肝病。
在“人類(lèi)的病毒感染(Viral Infections of Humans)”(第二版，Evans，A.S.編，(1982)Plenum Publishing Corporation，New York)第12章中有關(guān)于病毒肝炎感染病因的詳細(xì)描述。
對(duì)于DNA病毒，皰疹類(lèi)是許多常見(jiàn)人類(lèi)病毒疾病的來(lái)源。此類(lèi)包括巨細(xì)胞病毒(CMV)，非洲淋巴細(xì)胞瘤病毒(EBV)，水痘帶狀皰疹病毒(VZV)，單純皰疹病毒(HSV)和人體皰疹病毒6(HHV6)。
與其它皰疹病毒一樣，被CMV感染將導(dǎo)致病毒與宿主終身相連，在初次感染之后可能數(shù)年排放病毒。臨床表現(xiàn)從死亡和嚴(yán)重疾病癥(小頭，肝腫大，黃疸，精神發(fā)育遲緩)，經(jīng)過(guò)發(fā)育障礙，胸部敏感和耳部感染到缺少任何明顯病征。AIDS患者中的CMV感染是40-80％成人患者發(fā)病的主要原因，它以潛在的形式存在，而且可以在免疫損傷(immunocompromised)患者體內(nèi)復(fù)活。
EBV引起傳染性單核增生，而且被認(rèn)為是鼻咽癌，免疫細(xì)胞(immunoblastic)淋巴瘤，Burkitt淋巴瘤和毛發(fā)粘膜白斑病的誘發(fā)劑。
VZV引起水痘和帶狀皰疹。水痘是未免疫宿主所患的主要疾病。對(duì)于幼兒，水痘是一種溫和的疾病，其特征是泡狀疹和發(fā)燒。帶狀皰疹是一種經(jīng)常發(fā)生在以前感染過(guò)水痘的成年人身上的病癥。帶狀皰疹的臨床表現(xiàn)包括神經(jīng)痛和泡狀皮膚疹，后者呈單側(cè)和皮膚瘤樣(dermatomal)分布。炎癥的擴(kuò)散可能導(dǎo)致麻痹或抽搐，如果腦膜受到侵害，還會(huì)發(fā)生昏迷。對(duì)于免疫缺陷癥患者，VZV傳播可能會(huì)引起嚴(yán)重甚至致命疾病。
HSV1和HSV2是某些人類(lèi)最常見(jiàn)的感染源。這些病毒中的大多數(shù)能夠在宿主神經(jīng)細(xì)胞中長(zhǎng)期存在。一旦被感染，患者將處在感染的臨床表現(xiàn)重新復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)中，即可能承受身體和生理的雙重痛苦。HSV感染通常的特征為皮膚，嘴和/或生殖器大面積損傷。盡管初次感染有發(fā)展成比以前曾經(jīng)感染過(guò)病毒的患者的感染更嚴(yán)重趨勢(shì)，但其臨床表現(xiàn)并不明顯。HSV引起的眼部感染可以導(dǎo)致角膜炎或白內(nèi)障。對(duì)于新生兒和免疫損傷患者，或感染滲入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，感染將是致命的。HHV6是兒童患幼兒急疹(exanthum subitum)的誘因，其特征為發(fā)燒和發(fā)燒減退后出現(xiàn)紅疹。HHV6還會(huì)引起免疫損傷患者出現(xiàn)發(fā)燒和/或出疹及肺炎或肝炎綜合征。
現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，某些下面將要敘述的取代苯并咪唑化合物可用于治療或預(yù)防某些病毒感染。根據(jù)本發(fā)明第一方面，本發(fā)明提供新的式(I)和(I-1)化合物，
其中R1是H，CH3或CH2OH；R2是H或OH；R3是H或OH；或R2和R3一起形成一個(gè)鍵；R4是氨基，環(huán)丙氨基，環(huán)丁氨基，異丙氨基，叔丁氨基或-NR8R9，其中R8和R9與它們所連接的氮原子一起形成一個(gè)4，5或6員雜環(huán)；R5是H，而R6和R7是氯，但化合物(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇除外，并且條件是，至少R1，R2和R3之一是或者包含OH；優(yōu)選的式(I)和(I-1)化合物是其中R4是環(huán)丙氨基，異丙氨基或叔丁氨基，特別是異丙氨基或叔丁氨基的化合物。
優(yōu)選的式(I)和(I-1)化合物是式(IA)或(IA-1)化合物及其可藥用衍生物，
其中R2是H或OH；R4是氨基，環(huán)丙氨基，異丙氨基，叔丁氨基，尤其是異丙氨基或叔丁氨基，或-NR8R9，其中R8和R9與它們所連接的氮原子一起形成一個(gè)4，5或6員雜環(huán)；R5是H；R6和R7是氯，但化合物(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇除外。
特別優(yōu)選的是其中R4是環(huán)丙氨基，異丙氨基或叔丁氨基；R5是H；R6和R7均是氯的式(IA)和(IA-1)化合物及其可藥用衍生物。
應(yīng)該理解，本發(fā)明包括式(I)和(I-1)描繪的特定對(duì)映體，包括嘌呤的互變異構(gòu)體，單獨(dú)或與它們的鏡像對(duì)映體結(jié)合的形式。式(I)描繪的對(duì)映體是優(yōu)選的，而且最好達(dá)到在一定程度上基本上沒(méi)有相應(yīng)對(duì)映體，即與之混合的相應(yīng)對(duì)映體在整個(gè)混合物中所占的重量比一般小于10％(w/w)，優(yōu)選小于5％(w/w)，更優(yōu)選小于2％(w/w)，最優(yōu)選小于1％(w/w)。式(I-1)描繪的對(duì)映體是最優(yōu)選的，而且最好是達(dá)到基本上沒(méi)有相應(yīng)的對(duì)映體，即與之混合的相應(yīng)對(duì)映體在整個(gè)混合物中所占的重量比一般小于10％(w/w)，優(yōu)選小于5％(w/w)，更優(yōu)選小于2％(w/w)，最優(yōu)選小于1％(w/w)。
本發(fā)明化合物特別優(yōu)選的實(shí)例有(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1R，2S，3S，5S)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；及(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1S，2R，3R，5R)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1S，2R，3R，5R)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；及(1S，2R，3R，5R)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，以及它們的可藥用鹽。
上述式(I)和(I-1)化合物及其可藥用衍生物在本文中被稱(chēng)為本發(fā)明化合物。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了用于醫(yī)療，特別是用于治療或預(yù)防病毒感染如皰疹病毒感染的本發(fā)明化合物。雖然早期結(jié)果預(yù)示本發(fā)明化合物也可能能抵御其它皰疹病毒感染如EBV，VZV，HSV I和II及HHV6，但到目前為止，本發(fā)明化合物已經(jīng)顯示出抵御乙型肝炎病毒(HBV)和巨細(xì)胞病毒(CMV)感染的能力。本發(fā)明化合物特別可用于治療或預(yù)防CMV感染。本發(fā)明還公開(kāi)了本發(fā)明化合物在制備治療病毒感染的藥物方面的用途。
可以根據(jù)本發(fā)明治療的其它病毒疾病在前面的介紹中已經(jīng)討論過(guò)。
本發(fā)明的又一方面內(nèi)容提供了a)一種治療或預(yù)防嗜肝DNA病毒如乙型肝炎感染或皰疹病毒感染如CMV的方法，該法包括給患者施用治療有效量的本發(fā)明化合物。b)本發(fā)明化合物在制備治療或預(yù)防任何上述感染或疾病的藥物方面的用途。
“可藥用衍生物”指所有本發(fā)明化合物的可藥用或生理上可接受的鹽，酯或這些酯的鹽，或在給受者使用后能夠提供(直接或間接)本發(fā)明化合物的任何化合物，或其抗病毒活性代謝物或其殘基。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”指含有一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立選自雜原子氮，氧和硫的飽和或不飽和或部分飽和的環(huán)。這種基團(tuán)的實(shí)例包括氮雜環(huán)丁基，吡咯烷基和哌啶基。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物的酯包括羧酸酯，其中該酯基的非羰基部分選自直鏈和支鏈烷基，如正丙基，叔丁基，烷氧基烷基(例如甲氧基甲基)，芳烷基(例如芐基)，芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)，芳基(例如任意被鹵素，C1-4烷基或C1-4烷氧基或氨基取代的苯基)；磺酸酯如烷基-或芳烷基磺酰基(例如甲磺?；?；氨基酸酯(例如L-纈氨?；騆-異亮氨酰)；及一，二或三磷酸酯。磷酸酯可以被，例如，C1-20醇或其反應(yīng)衍生物或2，3-二(C6-24)?；视瓦M(jìn)一步酯化。
關(guān)于上述酯，除非另有說(shuō)明，否則任何所用烷基部分含有1-18個(gè)碳原子有利，尤其是含有3-6個(gè)碳原子，如戊酸酯。在這些酯中所有芳基部分含有苯基有利。
所有上述化合物的任何基準(zhǔn)也包括其可藥用鹽的基準(zhǔn)。
生理上可接受的鹽包括有機(jī)羧酸鹽如乙酸鹽，乳酸鹽，酒石酸鹽，蘋(píng)果酸鹽，羥乙磺酸鹽，乳糖酸鹽，對(duì)氨基苯甲酸鹽和琥珀酸鹽；有機(jī)磺酸鹽如甲磺酸鹽，乙磺酸鹽，苯磺酸鹽和對(duì)甲苯磺酸鹽和無(wú)機(jī)酸鹽如鹽酸鹽，硫酸鹽，磷酸鹽和氨基磺酸鹽。
上述本發(fā)明化合物及其可藥用衍生物可與治療上述感染或疾病的其它治療劑結(jié)合使用。所說(shuō)治療劑的實(shí)例包括能有效治療病毒感染或相關(guān)疾病的藥物如無(wú)環(huán)核苷(例如，無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷)，免疫調(diào)節(jié)劑如胸腺素，核甘酸還原酶抑制劑如2-乙酰吡啶5-[(2-氯苯胺基)硫代羰基]硫代碳腙，干擾素如α-干擾素，1-β-D-阿拉伯呋喃糖基-5-(1-丙炔基)尿嘧啶，3’-疊氮基-3’-脫氧胸苷，三唑核苷和膦甲酸。這種結(jié)合治療的各部分化合物可同時(shí)給藥，以分開(kāi)或混合制劑形式，或在不同時(shí)間給藥，例如連續(xù)給藥以達(dá)到混合的效果。
為了治療，本發(fā)明化合物(這里也稱(chēng)作活性成份)可通過(guò)任何適宜途徑給藥，包括口服，經(jīng)直腸，鼻，表面(包括皮膚(transdermal)，頰和舌下)，陰道和非腸道(包括皮下，肌肉內(nèi)，靜脈內(nèi)和真皮內(nèi))途徑。優(yōu)選的途徑應(yīng)隨患者的病情和年齡，感染的性質(zhì)和所選活性成份選擇而變化。
對(duì)于上述每種疾病所用的適當(dāng)劑量一般每天為每公斤受者(例如人)體重0.01-250mg，優(yōu)選范圍為每天每公斤體重0.1-100mg，最優(yōu)選每天每公斤體重1.0-20mg。(除非另有說(shuō)明，否則，所有活性成份的重量以式(I)母體化合物計(jì)算；對(duì)于式(I)化合物的鹽或酯，其重量將會(huì)按比例增加。)所需劑量最好在一天中以適當(dāng)間隔分兩，三，四，五，六或更多次的分劑量給藥。這些分劑量可以單劑量形式給藥，例如，每個(gè)劑型單位含有10-1000mg，優(yōu)選20-500mg，最優(yōu)選100-400mg活性成份。
理想地，服用活性成份后應(yīng)使活性化合物在血漿中的峰值濃度達(dá)到約0.025-100μM，優(yōu)選約0.1-70μM，最優(yōu)選約0.25-50μM。這可以例如，通過(guò)靜脈內(nèi)注射0.1-5％活性成份的溶液，任選地在鹽水中，或口服含約0.1-250mg/kg活性成份的藥丸來(lái)實(shí)現(xiàn)。通過(guò)以約0.01-5.0mg/kg/小時(shí)的速度連續(xù)輸注或?qū)⒓s0.4-15mg/kg的活性成份間歇式輸液可以維持理想的血液濃度。
雖然活性成份可以單獨(dú)給藥，但最好是將其制于藥物制劑中。本發(fā)明制劑至少含有一種上述活性成份，以及一種或多種其可接受的載體和可任選的 其它治療劑。每種載體必須是在與制劑中其它成份配伍的意義上是“可接受的”并且對(duì)患者沒(méi)有損害。制劑包括適于口服，經(jīng)直腸，鼻，表面(包括皮膚(transdermal)，頰和舌下)，陰道和非腸道(包括皮下，肌肉內(nèi)，靜脈內(nèi)和真皮內(nèi))給藥的制劑。該制劑可以方便地制成單位劑型并可用藥學(xué)領(lǐng)域已知的任何方法制備。這些方法包括將適當(dāng)?shù)幕钚猿煞菖c一種或多種附加成份構(gòu)成的載體混合的步驟。一般來(lái)講，制劑這樣制備均勻和緊密地將適當(dāng)活性成份與液體載體或精細(xì)的固體載體或兩者混合，然后，如果需要，加工為成型產(chǎn)品。
適于皮膚給藥的組合物可制成獨(dú)立的貼劑(patch)以適于與受者表皮緊密接觸持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間。這種貼劑宜含有活性化合物，1)在任選的緩沖水溶液中，2)溶解于和/或分散于粘合劑中或3)分散于聚合物中。活性化合物的適宜濃度約為1-25％，優(yōu)選約3-15％。作為一種具體情況，可按Pharmarceutical Research(藥物研究)，3(6)，318(1986)概述的電子傳輸法或離子電滲療法將活性化合物從貼劑中放出。
適于口服給藥的本發(fā)明制劑可以每個(gè)含有預(yù)定量活性成份的獨(dú)立的單元形式存在，如膠囊劑，扁形膠囊劑或片劑；或以粉劑或粒劑；水或非水液體中的溶液或懸浮液；或從水包油型的乳濁液或油包水型的乳濁液的形式存在。活性成份也可制成藥丸，干糖漿或糊劑形式。
片劑可以任意帶有一種或多種輔劑通過(guò)擠壓或模壓制成?？梢酝ㄟ^(guò)在適當(dāng)機(jī)器上將自由流動(dòng)狀如粉狀或顆粒狀的活性成份任意與粘合劑(例如，聚乙烯吡咯烷酮，明膠，羥丙基甲基纖維素)，潤(rùn)滑劑，惰性稀釋劑，防腐劑，崩解劑(例如，淀粉羥乙酸鈉，交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)，表面活性劑或分散劑混合制成擠壓型片劑。模壓片劑可在適當(dāng)機(jī)器上將潮濕的粉狀化合物與某種惰性液體稀釋劑形成的混合物模壓而成。片劑可以是包衣的或裸片，或者，可制成使活性成份緩慢或受控釋放的片劑，例如，可以各種比例加入羥丙基甲基纖維素，以達(dá)到所需的釋放性能。片劑也可以任意采用腸衣，以達(dá)到在腸內(nèi)釋放而不是在胃中釋放的目的。
適于在口內(nèi)表面給藥的制劑包括在香味基質(zhì)(通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)中含有活性成份的錠劑；在惰性基質(zhì)如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠中含有活性成份的軟錠劑；以及在適當(dāng)液體載體中含有活性成份的漱口液。
用于直腸給藥的制劑可以是帶有適當(dāng)基體如可可油或水楊酸酯的栓劑。
適于陰道給藥的制劑可制成陰道栓劑，塞，乳膏，凝膠，糊劑，泡沫或噴劑形式，其中除含有活性成份外還有本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適宜的載體。
適于胃腸外給藥的制劑包括水性或非水性等滲無(wú)菌注射液，其中可以含有抗氧化劑，緩沖劑，制菌劑和將制劑等滲于患者血液的溶質(zhì)；水性和非水性無(wú)菌懸浮液，其中包括懸浮劑和增稠劑。這種制劑可以被制成單位劑型或封裝在多倍劑量的容器如安瓿和小瓶中并可以?xún)?chǔ)存在凍干條件下，使用前只要加入無(wú)菌液體載體如注射用水便可使用。臨時(shí)配制的注射液和懸浮液可由上述各種無(wú)菌粉劑，粒劑和片劑制成。
優(yōu)選的單位劑型是含有上述日劑量或單元，日分劑量或它們的適當(dāng)份額的活性成份的制劑。
應(yīng)該理解，除了上面特別指出的成份外，本發(fā)明制劑還可以包含與制劑方面有關(guān)的領(lǐng)域中其它常用的物質(zhì)，例如，適于口服給藥的制劑可以進(jìn)一步含有如甜味劑，增稠劑和調(diào)味劑。
本發(fā)明還包括下列用流程圖表示的本發(fā)明化合物制備方法。
(其中L是離去基團(tuán)，如鹵素，特別是氯)
因此，根據(jù)本發(fā)明另一特征，我們提供了制備式(I)和(I-1)化合物本身或與它們鏡像對(duì)映體的混合物，及其可藥用衍生物的方法，包括(A)使式(II)化合物或其鏡像對(duì)映體
與a)其中R4是H，C1-4烷基或C1-4全氟烷基的式R4CO2H化合物最好在升溫條件下反應(yīng)，或與其中R4是H，C1-4烷基或C1-4全氟烷基及R是C1-4烷基的式R4C(OR)3化合物最好在室溫和酸性介質(zhì)中反應(yīng)，生成其中R4是H的式(I)或(I-1)化合物，或與b)溴化氰反應(yīng)，生成其中R4是NH2的式(I)或(I-1)化合物；或(B)a)例如用N-(Cl，Br或I)琥珀酰亞胺處理，將其中R4是氫的式(I)或(I-1)化合物轉(zhuǎn)變成另一種其中R4是離去基團(tuán)的式(I)或(I-1)化合物，形成其中R4是Cl或Br的化合物，及b)通過(guò)用C1-4烷基胺或二-C1-4烷基胺或R8R9NH處理，其中R8和R9定義如上，將其中R4是Cl或Br的式(I)或(I-1)化合物轉(zhuǎn)變成另一種其中R4是氨基或取代氨基-NR8R9(R8和R9定義如上)的式(I)或(I-1)化合物，或(C)將式(III)化合物
(其中R4，R5，R6和R7定義如上)或其官能等價(jià)物與式(IV)化合物反應(yīng)，
其中R1，R2和R3定義如上，L是離去基團(tuán)如有機(jī)磺酰氧基(例如，對(duì)甲苯磺酰氧基或甲磺酰氧基)，鹵素或三氟甲磺酸酯(OSO2CF3基團(tuán))，例如在堿如碳酸鈉或氫化鈉存在下，在溶劑如二甲基甲酰胺中，最好在升溫如80-100℃條件下反應(yīng)，生成其中R4是氫，鹵素或NR8R9的式(I)或(I-1)化合物；可任意將式(I)或(I-1)化合物轉(zhuǎn)化成其可藥用衍生物。
或者，在上述方法(C)中，式(IV)化合物可用其中L和R3被環(huán)狀硫酸酯置換的化合物替代。
所有上面所示的結(jié)構(gòu)式旨在代表所描繪的對(duì)映體以及其鏡像異構(gòu)體，以及它們的混合物。因此，本發(fā)明既包括外消旋體也包括基本上沒(méi)有其鏡像異構(gòu)體的純對(duì)映體。
式(I)或(I-1)化合物可以通過(guò)與適當(dāng)酯化劑如酰鹵或酸酐反應(yīng)被轉(zhuǎn)化成可藥用酯。式(I)或(I-1)化合物，包括其酯，可用常規(guī)方法，如用適當(dāng)?shù)乃崽幚恚D(zhuǎn)化成可藥用鹽。式(I)或(I-1)化合物的酯或其酯的鹽也可以通過(guò)比如水解轉(zhuǎn)化成母體化合物。
下列實(shí)施例僅為了舉例說(shuō)明而非以任何方式限制本發(fā)明的范圍。用于實(shí)施例中的術(shù)語(yǔ)“活性成份”指式(I)或(I-1)化合物或其可藥用衍生物。實(shí)施例A片劑先用聚乙烯吡咯烷酮溶液將各成份濕潤(rùn)成顆粒，然后加入硬脂酸鎂并擠壓，制備下面的制劑A和B。制劑Amg/片 mg/片(a)活性成份 250 250(b)乳糖B.P. 210 26(c)聚乙烯吡咯烷酮B.P. 159(d)淀粉乙醇酸鈉 2012(e)硬脂酸鎂 5 3500 300制劑Bmg/片 mg/片(a)活性成份 250 250(b)乳糖 150 -(c)Avicel PH 101 60 26(d)聚乙烯吡咯烷酮B.P.15 9(e)淀粉乙醇酸鈉 20 12(f)硬脂酸鎂 53500 300制劑Cmg/片活性成份 100乳糖 200淀粉 50聚乙烯吡咯烷酮 5硬脂酸鎂 4359下面的制劑是將混合成份直接擠壓制成的。制劑E中所用的乳糖是直接擠壓型的(Dairy Crest-”Zeparox”)。制劑Dmg/片活性成份 250預(yù)先膠凝的淀粉NF15 150400制劑Emg/片活性成份 250乳糖 150微晶纖維素 100500制劑F(控制釋放型制劑)
該制劑是先用聚乙烯吡咯烷酮溶液將以下成份濕潤(rùn)成顆粒，然后加入硬脂酸鎂并擠壓制成。
mg/片(a)活性成份 500(b)羥丙基甲基纖維素 112(Methocel K4M Premium)(c)乳糖B.P. 53(d)聚乙烯吡咯烷酮B.P.C. 28(e)硬脂酸鎂 7700實(shí)施例B膠囊劑制劑A該膠囊劑是通過(guò)將上述實(shí)施例A中的制劑D的各種成份混合并裝入兩半硬明膠膠囊中制成。制劑B(見(jiàn)下文)以類(lèi)似方法制備。制劑Bmg/粒(a)活性成份 250(b)乳糖B.P. 143(c)淀粉乙醇酸鈉 25(d)硬脂酸鎂 2420制劑Cmg/粒(a)活性成份 250(b)聚乙二醇4000BP 350600該膠囊劑是通過(guò)熔化聚乙二醇4000BP，將活性成份分散在熔體中并將該熔化物裝入兩半硬明膠膠囊中制成。制劑Dmg/?；钚猿煞?50卵磷脂 100花生油 100450該膠囊劑是通過(guò)將活性成份分散于卵磷脂和花生油中并將此分散體裝入柔軟有彈性的明膠膠囊中制成。制劑E(控制釋放型膠囊劑)下列控制釋放型膠囊劑是先用擠出機(jī)擠出成份a，b和c，然后將擠出物制成球并干燥。將干燥的丸粒用控制釋放膜(d)包衣，然后裝入兩半硬明膠膠囊制成。
mg/粒(a)活性成份 250(b)微晶纖維素 125(c)乳糖B.P. 125(d)乙基纖維素 13513實(shí)施例C注射劑制劑A活性成份0.200g0.1M鹽酸溶液調(diào)至pH 4.0-7.00.1M氫氧化鈉溶液調(diào)至pH 4.0-7.0無(wú)菌水 補(bǔ)充至10ml將活性成份溶解于大部分水(35-40℃)中并用適量鹽酸或氫氧化鈉將pH調(diào)至4.0-7.0之間。該批料用水補(bǔ)足體積，用無(wú)菌微孔過(guò)濾器過(guò)濾后裝入10ml無(wú)菌安瓿狀玻璃小瓶中(類(lèi)型I)，然后用無(wú)菌罩密封并封裝。制劑B活性成份 0.125g無(wú)菌，無(wú)熱源，pH7的磷酸鹽緩沖液補(bǔ)充至25ml實(shí)施例D肌肉內(nèi)注射劑活性成份 0.20g芐醇 0.10g糖糠醛(Glycofurol) 1.45g注射用水 補(bǔ)充至3.00ml將活性成份溶解于糖糠醛。加入芐醇并使之溶解，加水至3ml。然后將混合物用無(wú)菌微孔過(guò)濾器過(guò)濾，最后封裝在無(wú)菌3ml安瓿狀玻璃小瓶中(類(lèi)型I)。實(shí)施例E糖漿活性成份 0.2500g山梨糖醇溶液 1.5000g甘油 2.0000g苯甲酸鈉 0.0050g調(diào)味劑，Peach 17.42.3169 0.0125ml純水 補(bǔ)充至5.0000ml將活性成份溶解于甘油和大部分純水的混合物中，然后加入苯甲酸鈉水溶液，接著加山梨糖醇溶液，最后加調(diào)味劑。用純水補(bǔ)充至所需體積并混合均勻。實(shí)施例F栓劑mg/栓活性成份(631m)*250硬脂肪，BP(Witepsol H15-Dynamit Noble) 17702020*活性成份被制成粉末使用，其中至少90％顆粒的直徑是631m或更小。
將Witepsol H15的1/5熔化于最高45℃的蒸汽套盤(pán)中?；钚猿煞萁?jīng)2001m篩子篩選后在攪拌下加到熔融的基質(zhì)，用裝有削頭(cuttinghead)的silverson混合，直至達(dá)到均勻分散。保持混合物在45℃，將剩下的Witepsol H15加到懸浮液中并攪拌以保證均勻混合。全部懸浮液經(jīng)2501m不銹鋼篩過(guò)篩并在持續(xù)攪拌下自然冷卻至40℃。在38-40℃將2.02g所得混合物裝入適當(dāng)?shù)?ml塑料模具中。將栓劑自然冷卻至室溫。實(shí)施例G陰道栓劑mg/陰道栓活性成份(631m) 250脫水葡萄糖 380馬鈴薯淀粉 363硬脂酸鎂71000將上述化合物直接混合并將所得混合物直接擠壓成陰道栓劑?？共《驹囼?yàn)1.抗HCMV在多孔盤(pán)中對(duì)MRC5細(xì)胞(人體胎肺)單層細(xì)胞內(nèi)的人體巨細(xì)胞病毒(HCMV)進(jìn)行測(cè)定。通過(guò)測(cè)定斑塊減少情況來(lái)確定化合物的活性，其中單層細(xì)胞用HCMV懸浮液感染。然后將一定濃度范圍的試驗(yàn)化合物(已知摩爾數(shù))摻到羧甲基纖維素覆蓋層內(nèi)。每種濃度的斑點(diǎn)數(shù)用對(duì)照組的百分比表示并繪出劑量-響應(yīng)曲線。由該曲線估算50％抑制濃度(IC50)?？笻CMV活性化合物 IC50(μM)實(shí)施例4 1.92.抗HBVa.概述式(I)和(I-1)化合物的抗HBV活性是用評(píng)價(jià)功效的高效測(cè)定法(high-capacity assay)測(cè)定的。將在96孔盤(pán)中培養(yǎng)的產(chǎn)生HBV細(xì)胞(HepG2 2.2.15，P5A細(xì)胞系)的上清液移到微量滴定板的孔中，這些孔已經(jīng)涂覆有針對(duì)HBV表面抗原(HBsAg)的特異性單克隆抗體。上清液中的病毒微粒結(jié)合到抗體上并在其它碎片被洗掉時(shí)仍保持固定。然后將這些病毒微粒變性，使之釋放HBV DNA鏈，接著通過(guò)聚合酶鏈反應(yīng)將該鏈放大并用比色雜交捕獲檢測(cè)法測(cè)定。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合含已知HBV DNA含量的細(xì)胞上清液稀釋度進(jìn)行定量。通過(guò)比較未處理對(duì)照組細(xì)胞上清液與含式(I)或(I-1)化合物的上清液的HBV DNA含量，測(cè)定抗HBV效果。.b.獲得HBV的免疫親和力將HBV產(chǎn)生細(xì)胞接種在裝有RPMI/10％胎牛血清/2mM谷氨酰胺(RPMI/10/2)的96孔培養(yǎng)盤(pán)中(2500細(xì)胞/孔)。培養(yǎng)基在第1，3，5和7天用式(I)或(I-1)化合物在RPMI/10/2中的稀釋液補(bǔ)充，達(dá)到終體積為150μL。將50μL鼠單克隆抗HBsAG抗體(10μg/mL，于PBS中)加到圓底微量滴定板的每個(gè)孔中。在4℃培養(yǎng)過(guò)夜后吸出溶液，代之以100μL 0.1％BSA的PBS溶液。樣品在37℃培養(yǎng)2小時(shí)，然后用PBS/0/01％Tween-20(PBS/T)在Nuns洗刷機(jī)上洗滌3次。將10μL 0.035％Tween-20的PBS通過(guò)Pro/Pette加到所有孔中。將含細(xì)胞外病毒粒子DNA的細(xì)胞上清液(25μL)通過(guò)Pro/Pette轉(zhuǎn)移到各孔中；最終Tween濃度是0.01％。將在RPMI/10/2中的25μLHBV標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基稀釋液加到兩行孔中，作為定量用的內(nèi)標(biāo)曲線。將各盤(pán)密封后在4℃培養(yǎng)過(guò)夜。樣品用PBS/T洗滌5次，用PBS洗滌2次，吸出最后的洗液。然后，通過(guò)Pro/Pette在每個(gè)孔中加入25μL 0.09NNaOH/0.01％NP40。將樣品孔封住并在37℃培養(yǎng)60分鐘，然后用25μL0.09N HCl/100mM Tris(pH8.3)中和樣品。c.聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)對(duì)5μL樣品進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)(Saiki，R.K.等人，Science(科學(xué))，239(4839)487-91(1988))，使用Perkin Elmer PCR試驗(yàn)盒。PCR以終體積為25μL在“MicroAmp管”中進(jìn)行。從HBV基因組的保存區(qū)選擇引物，通過(guò)對(duì)幾個(gè)序列的排序測(cè)定。將一個(gè)引物在5-引物底端進(jìn)行生物素化以易于PCR產(chǎn)物的雜交捕獲檢測(cè)。引物全部從SynthecellCorp.，Rockville，MD 20850購(gòu)得。d.PCR產(chǎn)物的雜交捕獲檢測(cè)基本采用Holodiniy，M.等人，Bio Techniques(生物技術(shù))，12(1)37-39(1992)所述方法，用horse radish過(guò)氧化物酶標(biāo)記的寡核苷酸探針檢測(cè)PCR產(chǎn)物(Synthecell Corp.，Rockville，MD 20850)，該探針直接在包有鏈霉抗生物素蛋白的微量滴定盤(pán)的孔中雜交成變性PCR產(chǎn)物的生物素化鏈。改性包括使用251 PCR反應(yīng)體積和氫氧化鈉變性反應(yīng)代替熱。雜交過(guò)程中生物素部分同時(shí)與束縛于盤(pán)的(plate-dound)的鏈霉抗生物素蛋白結(jié)合，以“捕獲”雜交物。在結(jié)合(雜交)horse radish過(guò)氧化物酶的比色法測(cè)定前洗掉未結(jié)合標(biāo)記探針。通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)比較計(jì)算原始樣品中的HBV DNA的量。然后將這些值與未處理的細(xì)胞培養(yǎng)物的值比較，從而確定抗HBV活性程度。
IC50(半抑制濃度)是使HBV DNA減少50％的化合物用量。實(shí)施例4，13和69化合物的IC50近似值列于下表。
抗HCMV活性化合物IC50(μM)實(shí)施例4 0.74，2.5實(shí)施例32 1.3， 0.79實(shí)施例33 0.44，0.50實(shí)施例40 2.0， 1.4實(shí)施例41 0.4， 0.40鳥(niǎo)嘌異甘醚(ganciclovir)(對(duì)照)1.1(10個(gè)值的平均數(shù)值)實(shí)施例1(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯將N-[2，3-二羥基-4-(羥甲基)-1-環(huán)戊基]氨基甲酸(±)-(1R*，2S*，3R*，4R*)-叔丁酯(6.27g，25.1mmol)和1N鹽酸(50mL)攪拌過(guò)夜。真空濃縮所得的澄清溶液并蒸發(fā)甲醇和乙醇使其干燥，得到(±)-(1S*，2R*，3S*，5R*)-3-氨基-5-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇的鹽酸鹽，為固態(tài)泡沫狀物(4.73g)。將此固態(tài)泡沫狀物與三乙胺(7.5g，75mmol)，1，2，4-三氯-5-硝基苯(5.84g，25.0mmol，為97％，Aldrich)和2-甲氧基乙醇(75mL)劇烈回流24小時(shí)。將所得黑色混合物蒸發(fā)至干，剩余物在硅膠上進(jìn)行色譜分離，產(chǎn)物用甲醇∶氯仿(1∶10)洗脫，得到深橙色玻璃狀物質(zhì)(6.9g)。將其從乙醇-水中結(jié)晶，得到橙色粉末(3.00g)，然后室溫下將其在乙酐(3.0mL)-吡啶(20mL)中攪拌過(guò)夜。蒸發(fā)掉揮發(fā)物，接著從乙酸乙酯-己烷中結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為橙色針晶(2.82g，24％)，m.p.153-156℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.25和7.51(均為單峰，各1H，C6H2)，8.07(d，J＝7.8Hz，1，NH)，5.23和5.09(均為多峰，2，2 CHO)，4.3(m，1，CHN)，4.2-4.0(m，2，CH2O)，2.5-2.35(m，2，2CH)，2.04，2.03，2.02(均為s，9，3 CH3CO)，1.5-1.4(m，1，CH)。元素分析C15H20N2O5Cl2計(jì)算值C，46.67；H，4.35；N，6.05；Cl，15.31；實(shí)測(cè)值C，46.66；H，4.37；N，6.02；Cl，15.38。實(shí)施例2(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯在異丙醇(250ml)中將(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(2.75g，5.93mmol)和阮內(nèi)鎳(水漿液，Aldrich，300mg(濕))在40psi氫氣壓力下在Parr搖動(dòng)器中搖動(dòng)2.25小時(shí)。用硅藻土濾出催化劑，濾液用98％甲酸(5mL)酸化并濃縮成橙色油。再用98％甲酸(45mL)稀釋該油并將所得橙色溶液回流40分鐘。除去揮發(fā)物后將剩余的深色油溶解于氯仿(100mL)。用碳酸氫鈉飽和水溶液(3×10mL)洗滌氯仿溶液，干燥(硫酸鈉)，蒸發(fā)后得到泡沫狀物，在硅膠上進(jìn)行色譜分離。標(biāo)題化合物用甲醇∶氯仿(3∶97)洗脫，從乙酸乙酯得到白色泡沫狀物(2.26g，86％)；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.57，8.17，7.97(均為單峰，各1H，3苯并咪唑CH)，5.6(m，1，CHO)，5.3-5.1(m，2，CHO和CHN)，4.35-4.15(m，2，CH2O)，2.6-2.4(m，與溶劑重疊，2，CH)，2.10，2.06，1.92(均為s)重疊于2.0(m，總共10，3CH3CO和CH)。元素分析C19H20N2O6Cl2計(jì)算值C，51.49；H，4.55；N，6.32；Cl，16.00；實(shí)測(cè)值C，51.39；H，4.58；N，6.22；Cl，16.07。實(shí)施例3(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯將(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸(1.32g，2.98mmol)在干燥的N，N-二甲基甲酰胺(6mL)中加熱至60℃。用5小時(shí)分批(每次約1mmol)加入N-溴琥珀酰亞胺(1.59g，8.93mmol)，再繼續(xù)加熱4小時(shí)。真空除去揮發(fā)物后，剩余物在硅膠上進(jìn)行色譜分離，標(biāo)題化合物用1∶1己烷-乙酸乙酯洗脫，得到褐色粉末(1.1g，69％)。1H-NMR與重結(jié)晶樣品一致，從乙醇-水中重結(jié)晶得到白色粉末樣品，m.p.156-159℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.34，7.97(均為單峰，每個(gè)1，2苯并咪唑CH)，5.6(m，1，OCH)，5.3(m，1，OCH)，5.2-5.0(m，1，NCH)，4.4-4.2(m，2，OCH2)，2.7-2.5(m，1，CH)，2.4-2.0(m)重疊于2.1和2.07(均為單峰，總共8，CH2和2CH3CO)，1.92(s，3，CH3CO)；質(zhì)譜(CI)527(6.6)，525(45)，523(100)，521(65，M+1)，257(48，M-B)。元素分析C19H19N2O6BrCl2計(jì)算值C，43.71；H，3.67；N，5.37；全部鹵素為Br，45.91；實(shí)測(cè)值C，43.64；H，3.63；N，5.30；全部鹵素為Br，45.77。實(shí)施例4(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇將(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(600mg，1.15mmol)加到攪拌的碳酸鈉(122mg)的水(2mL)-乙醇(10mL)-甲醇(10mL)混合物中。在室溫2.5小時(shí)后用冰醋酸將pH調(diào)節(jié)至7。真空除去揮發(fā)物，剩余物用水(5mL)研制，過(guò)濾得到白色固體。該固體從1∶1乙醇-甲醇中重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物為白色粉末(282mg，62％)，m.p.208-211℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.23(s，1，苯并咪唑H7)，7.95(s，苯并咪唑H4)，5.13(t，J＝4.1Hz，1，CH2OH)，5.03(d，J＝6.2Hz，1，OH)，5.0-4.85(m，1，H5)，4.71(d，J＝3.5Hz，1，OH)，4.55-4.45(m，1，H1)，3.85-3.80(m，1，H2)，3.7-3.6和3.55-3.45(均為多峰，各1，OCH2)，2.2-1.95(m，3，H3和2H4)；質(zhì)譜(CI)395(M+1)。元素分析C13H13N2O3Cl2Br計(jì)算值C，39.43；H，3.31；N，7.07；全部鹵素為Br，60.52；實(shí)測(cè)值C，39.50；H，3.33；N，7.02；全部鹵素為Br，60.61。實(shí)施例5苯甲酸(1α，3β，4β)-(3，4-二羥基-1-環(huán)戊基)甲酯向攪拌的4-羥甲基環(huán)戊烯(37.0g，276mmol)(J.-P.，Depres和A.E.Green，J.Org.Chem.(有機(jī)化學(xué)雜志)，1984，49，928-931，此處作為參考)在吡啶(450mL)中的冰冷(0℃)溶液中用30分鐘加入苯甲酰氯(32.1mL，276mmol)。將所得混合物在室溫?cái)嚢?.25小時(shí)。加水(50mL)并真空除去揮發(fā)物。將剩余的油溶解于氯仿并用水萃取該溶液，硫酸鈉干燥。蒸發(fā)溶劑，得到苯甲酸(3-環(huán)戊烯-1-基)甲酯為黃色油(53.94g，91％)，已達(dá)到使用的純度；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.98，7.67，7.56(m，5，C6H5)，5.72(s，2，CH＝CH)，4.19(m，2，OCH2)，2.71(m，1，CH)，2.56-2.77(m，與溶劑重疊，2 CH)，2.21-2.14(m，2，2 CH)。
室溫下將苯甲酸(3-環(huán)戊烯-1-基)甲酯(37.6g，0.161mol)的丙酮(200mL)液用2小時(shí)滴加到攪拌的N-甲基嗎啉-N-氧化物(33.1g，60％，于水中，0.169mol)，四氧化鋨(2.5％叔丁醇溶液，Aldrich，3.0mL)和丙酮(200mL)。繼續(xù)攪拌16小時(shí)。加入氯仿(500mL)和水(150mL)。分離有機(jī)相，用冷1N鹽酸(2×150mL)洗滌，然后用碳酸氫鈉飽和水溶液(100mL)洗滌并干燥(MgSO4)。除去揮發(fā)物，剩余的固體從甲苯(200mL)中結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為白色晶體(26.9g，73％)，m.p.92-94℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.96，7.65，7.56(m，5，C6H5)，4.38(d，J＝4.1Hz，2，2OH)，4.14(d，J＝6.6Hz，2，CH2O)，3.90(m，2，2 OCH)，2.58(m，與溶劑重疊，CH)，1.75(m，2，2 CH)，1.55(m，2，2CH)。元素分析C13H16O4計(jì)算值C，66.09；H，6.83；實(shí)測(cè)值C，66.19；H，6.86。
將母液濃縮，得到10.33g白色固體，它含有混有苯甲酸(±)-(1_，3_，4_)-(3，4-二羥基-1-環(huán)戊基)甲酯的標(biāo)題化合物，1H-NMR分析，比例約為2∶3。實(shí)施例6苯甲酸(3a-α，5α，6a-α)-(四氫-4H-環(huán)戊-1，3，2-二氧雜硫醇-5-基)甲酯S-氧化物將亞硫酰氯(6.04g，50.8mmol)加到苯甲酸(1β，3a，4a)-(3，4-二羥基-1-環(huán)戊基)甲酯(10.0g，42.3mmol)的四氯化碳(150mL)溶液中。將溶液回流1.5小時(shí)。蒸發(fā)除去溶劑，留下的標(biāo)題化合物為濃稠的油狀物，已達(dá)到使用的純度(見(jiàn)下面實(shí)施例)。從甲苯中結(jié)晶，得到蠟狀固體樣品，m.p.48-57℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.96，7.66，7.52(m，5，C6H5)，5.46和5.32(均為多峰，1，2 OCH，由于約1∶1異構(gòu)S-氧化物的混合物)，4.28(m，2，OCH2)，2.90和2.43(均為多峰，1，兩個(gè)異構(gòu)S-氧化物的CH)，2.10和1.74(均為多峰，4，4 CH)。元素分析C13H14O5S計(jì)算值C，55.31；H，5.00；S，11.36；實(shí)測(cè)值C，55.41；H，5.04；S，11.30。實(shí)施例7苯甲酸(3a-α，5α，6a-α)-(四氫-4H-環(huán)戊-1，3，2-二氧雜硫醇-5-基)甲酯S，S-二氧化物將苯甲酸(3a-α，5α，6a-α)-(四氫-4H-環(huán)戊-1，3，2-二氧雜硫醇-5-基)甲酯S-氧化物(實(shí)施例6，42.3mmol)在四氯化碳(40mL)-乙腈(40mL)-水(60mL)中攪拌，同時(shí)加入偏高碘酸鈉(8.98g，42.3mmol)和三氯化釕(44mg，0.21meq)。30分鐘后再加入偏高碘酸鈉(179mg)，用TLC(硅膠，甲醇∶氯仿(1∶19)，用碘顯色)判斷反應(yīng)是否完成。整個(gè)經(jīng)過(guò)1.0小時(shí)后加入二氯甲烷(300mL)。分離有機(jī)相，另用二氯甲烷(300mL)萃取水相。合并的有機(jī)相用碳酸氫鈉飽和水溶液(100mL)洗滌，然后用氯化鈉飽和水溶液(100mL)洗滌，干燥(MgSO4)并真空濃縮，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末(12.37g，98％)，m.p.114-119℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.02，7.70，7.55(均為m，5，C6H5)，5.62(m，2，OCH)，4.34(d，J＝5.8Hz，2，OCH2)，2.79-2.64(m，1，CH)，2.32-2.21和1.97-1.79(m，4，2 CH2)。元素分析C13H14SO6計(jì)算值C，52.35；H，4.73；S，10.75；實(shí)測(cè)值C，52.32；H，4.73；S，10.69。實(shí)施例8(±)-(1R*，2R*，4S*)-2-(5.6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-4-(羥甲基)環(huán)戊醇將氫化鈉(416mg，10.4meq，為60％油分散液)加到5，6-二氯苯并咪唑(L.B.Townsend和G.R.Revankar，Chem.Rev.(化學(xué)綜述)，1970，70，389，在此作為參考)(1.50g，8.00mmol)的無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(35mL)溶液中。將混合物在25℃攪拌45分鐘。用5小時(shí)分批加入苯甲酸(3a-α，5α，6a-α)-(四氫-4H-環(huán)戊-1，3，2-二氧雜硫醇-5-基)甲酯S，S-二氧化物(3.05g，10.2mmol)(制備于實(shí)施例7，8和9)，在室溫繼續(xù)攪拌過(guò)夜。真空除去揮發(fā)物，剩余的油狀物溶解于同4M硫酸(2.3mL)一起回流的1，4-二惡烷(130mL)-水(10mL)中?；亓?0分鐘后，溶液用5N氫氧化鈉堿化，再在50℃加熱1小時(shí)，然后再用酸中和。真空蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余的固體用氯仿萃取以除去未反應(yīng)的5，6-二氯苯并咪唑，然后從乙醇-水結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末(2.09g，87％)。該樣品從乙醇-水重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為白色顆粒，m.p.244-245℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.47，8.05，7.93(均為s，3，芳基CH)，5.19(d，J＝5.3Hz，1，CHOH)，4.71(t，J＝5.3Hz，1，CH2OH)，4.6-4.5(m，1，NCH)，4.37-4.25(m，1，OCH)，3.41(m，2，OCH2)，2.4-2.2和1.95-1.62(m，5，5 CH)。元素分析C13H14N2O2Cl2·0.02C2H5OH計(jì)算值C，51.85；H，4.71；N，9.27；Cl，23.47；實(shí)測(cè)值C，51.87；H，4.74；N，9.28；Cl，23.60。實(shí)施例9乙酸(±)-(1R*，2R*，4S*)-4-(乙酰氧基甲基)-2-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)環(huán)戊酯將(±)-(1R*，2R*，4S*)-2-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-4-(羥甲基)環(huán)戊醇(7.80g，25.8mmol)溶解于吡啶(50mL)-乙酐(50mL)并將溶液攪拌過(guò)夜。真空除去揮發(fā)物，剩余的油在二氯甲烷(150mL)和碳酸氫鈉飽和水溶液(100mL)之間分配。干燥(硫酸鈉)有機(jī)相并蒸發(fā)，得到玻璃狀物(9.91g，99％)；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.58，8.08，7.96(s，3，芳基CH)，5.39-5.32(m，1，OCH)，5.09-5.04(m，1，NCH)，4.11(d，J＝6.6Hz，2，OCH2)，2.59-2.50(m與溶劑重疊，CH)，2.41-2.35(m，1，CH)，2.17-1.86(m重疊于2.06和1.94，均為單峰，總共9，3CH和2CH3CO)。元素分析C17H18N2O2Cl2·0.1CH2Cl2計(jì)算值C，52.96；H，4.70；N，7.26；Cl，18.55；實(shí)測(cè)值C，52.86；H，4.74；N，7.25；Cl，18.50。實(shí)施例10乙酸(±)-(1R*，2R*，4S*)-4-(乙酰氧基甲基)-2-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)環(huán)戊酯將N-溴琥珀酰亞胺(4.54g，25.5mmol)加到乙酸(±)-(1R*，2R*，4S*)-4-(乙酰氧基甲基)-2-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)環(huán)戊酯(8.95g，23.2mmol)的無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(46mL)溶液中。將該溶液保持在約70℃(油浴)5小時(shí)。真空除去揮發(fā)物，剩余的橙色漿液在硅膠上進(jìn)行色譜分離。用氯仿洗脫標(biāo)題化合物，得到淺黃色固體(5.14g，48％)，m.p.122-125℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.16(s，1，苯并咪唑H7)，7.95(s，1，苯并咪唑H4)，5.60-5.55(m，2，OCH)，5.12-5.03(m，1，NCH)，4.15(d，J＝6.3Hz，2，OCH2)，2.66-2.60(m，1，CHCH2)，2.29-2.14(m，3，CH)，2.06(s，3，CH3CO)，1.93(s重疊于m，4，CH3CO+CH)；質(zhì)譜(CI)469(5.8)，467(37.5)，465(95)，463(54，M+1)，199(100，M-B)。元素分析C17H17N2BrCl2O4計(jì)算值C，43.99；H，3.69；N，6.04；全部鹵素為Br，51.65；實(shí)測(cè)值C，44.06；H，3.70；N，5.97；全部鹵素為Br，51.74。實(shí)施例11(-)-(1S，4R)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇及其對(duì)映體(+)-(1R，4S)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇的分析Bruchner，H.，Wittner，R.和Godel，H.的方法“通過(guò)使用鄰苯二醛和N-乙?；腚装彼嵫苌詣?dòng)進(jìn)行氨基酸對(duì)映體的分離”，J.Chrom.(色譜雜志)，476(1989)73-82描述了標(biāo)題化合物樣品的特征。用鄰苯二醛和N-乙?；?L-半胱氨酸作為衍生劑。用Optima IIODS 100×4.5mm，3μm柱(III Supplies Co.，Meriden，CT)，以0.9mL/min洗脫速度梯度洗脫，開(kāi)始用100％乙酸鈉緩沖液(40mM，pH6.5)用15分鐘直線上升至18％乙腈梯度洗脫，然后在18％乙腈保持15分鐘洗脫。在338nm處檢測(cè)。將樣品溶解于0.1摩爾硼酸鹽緩沖液(pH10.4)。樣品的鑒定和純度通過(guò)與權(quán)威標(biāo)準(zhǔn)(見(jiàn)EP 434450(1991年6月26日))比較而確定。(1S，RS)異構(gòu)體的保留時(shí)間約為21分鐘。(1R，4S)異構(gòu)體的保留時(shí)間約為22分鐘。實(shí)施例12(±)-順-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇給一個(gè)2L的干燥三頸燒瓶裝上機(jī)械攪拌器和隔膜，連接氮?dú)庠吹倪M(jìn)氣口接頭上裝有溫度計(jì)。燒瓶用氮?dú)獯迪?，并浸入?丙酮浴，然后通過(guò)套管加入氫化鋁鋰的四氫呋喃溶液(1.0摩爾，800mL，0.8mol，Aldrich)。用無(wú)水四氫呋喃(2×15mL)沖洗氫化鋁鋰溶液。在溶液被冷卻到0℃時(shí)通過(guò)套管加入(±)-順-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-羧酸4-甲苯磺酸鹽的四氫呋喃漿液并以保持溫度在10℃以下的速率充分?jǐn)嚢?，使氫的逸出速度適中(約1小時(shí))。用無(wú)水四氫呋喃(2×15mL)沖洗燒瓶，隔膜用回流冷凝器代替。用大約2小時(shí)將所得清澈淺琥珀色溶液慢慢升溫至微微回流狀態(tài)，此時(shí)，溶液已變得渾濁?；亓鬟^(guò)夜(16小時(shí))后撤去加熱浴，加入氟化鈉(136.3g，3.25mol，試劑級(jí)粉末)，冷凝器復(fù)位以進(jìn)行隨后的蒸餾。蒸餾混合物得到的稀漿液(蒸餾收集700mL餾出液)，在冰浴中冷卻。加入無(wú)水乙醚(500mL)，用盛有水(43mL，2.4mol)的加料漏斗代替冷凝器。非常緩慢(2小時(shí))地加水，同時(shí)，小心控制氫的逸出速率并保持溫度在10±5℃。與此同時(shí)，加水(54mL)到上述回收的蒸餾液中，添加足夠的四氫呋喃使整個(gè)體積達(dá)到900mL(6％H2O)。吸濾反應(yīng)混合物，濾餅用四氫呋喃(100mL)置換洗滌(displace-wash)。用6％水-四氫呋喃溶液(300mL)部分漿洗濾餅，然后將濾餅轉(zhuǎn)入反應(yīng)燒瓶。在6％水-四氫呋喃溶液(400mL)中研制濾餅(25分鐘)，過(guò)濾并用6％水-四氫呋喃(200mL)置換洗滌。真空濃縮合并的濾液，得到淺黃色油(44.07g，HPLC結(jié)果為67.8％，見(jiàn)實(shí)施例3)。此含純標(biāo)題化合物，水和痕量甲苯磺酸鹽的油狀物在室溫條件下顏色迅速變深，它即刻反應(yīng)生成N-BOC衍生物，為穩(wěn)定的晶狀固體(見(jiàn)下面實(shí)施例)。重新將濾餅放入燒瓶并在甲醇(800mL)中研制48小時(shí)。在橡膠擋板下過(guò)濾所得漿液，用甲醇(200mL)洗滌濾餅。真空濃縮濾液，得到黃色固體(56.80g，HPLC分析產(chǎn)率為20.9％；總產(chǎn)率為88.7％)。實(shí)施例13(±)-順-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇用實(shí)施例12方法，但以約兩倍的規(guī)模(97.40g，0.8924mol的(±)-2-氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚-5-烯-3-酮)實(shí)施，得到標(biāo)題化合物為含有標(biāo)題化合物(0.7926mol，理論值的88.8％，考慮到除去的等分試樣，由實(shí)施例11的方法測(cè)定)的萃取物。實(shí)施例14(±)-順-N-[4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯將從上個(gè)實(shí)施例得到的合并的四氫呋喃萃取物真空濃縮成1031g，放入冰水浴冷卻并加入碳酸氫鈉(97.46g，1.16mol)的水(500mL)混合物，接著加入二碳酸二叔丁酯(204.5g，0.9501mol)。將混合物在5℃攪拌2天。將從上個(gè)實(shí)施例得到的甲醇萃取物蒸發(fā)成油性固體(136.64g)，并將其加到上述混合物中。待其升至室溫后真空蒸發(fā)有機(jī)溶劑，所得漿液依次用己烷，二氯甲烷(三次)和己烷(每次200mL)萃取。蒸發(fā)有機(jī)萃取物得到油狀物，將其用己烷(約300mL)結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(154.15g，0.7229mo1)。對(duì)母液進(jìn)行色譜分離又得到產(chǎn)物(10.5g，0.0491mol，從起始內(nèi)酰胺的理論產(chǎn)率的86.6％，考慮到除去的部分)。實(shí)施例15(±)-順-[4-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-2-環(huán)戊烯-1-基]甲醇在0℃將(±)-順-N-[4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(50.0g，0.230mol)在25％三氟乙酸的二氯甲烷溶液(1.5L)中攪拌1.0小時(shí)。蒸發(fā)除去揮發(fā)物，留下實(shí)施例27所述的胺的三氟乙酸鹽，為深色油狀物。向該油中加入叔丁醇(350mL)，碳酸鉀(65g)和1，2，4-三氯-5-硝基苯(Aldrich，54.7g，0.230mol為97％)。將所得混合物劇烈攪拌回流3天。真空除去揮發(fā)物，剩余物用甲醇研制。將該溶于甲醇的物質(zhì)在硅膠上進(jìn)行色譜分離，粗產(chǎn)物用2％甲醇-氯仿洗脫，得到橙色固體(38.0g)。用乙酸乙酯-己烷結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為橙色晶體(34.0g，49％)，m.p.96-98℃；1H-NMR(DMSO-d6)和質(zhì)譜(CI)分析結(jié)果與結(jié)構(gòu)相符并與實(shí)施例18和26所述手性對(duì)映體樣品的一致。元素分析C12H12N2Cl2O3計(jì)算值C，47.55；H，3.99；N，9.24；Cl，23.39；實(shí)測(cè)值C，47.75；H，4.10；N，9.20；Cl，23.52。
繼續(xù)柱洗脫，又得到含有標(biāo)題化合物和少量低Rf雜質(zhì)的流分。將這些流分與上述結(jié)晶過(guò)程產(chǎn)生的母液合并，然后從乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶，又得到橙色固體(16.7g)，它具有與上述產(chǎn)物一致的1H-NMR譜，因而使總產(chǎn)率達(dá)到73％。實(shí)施例16(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯和(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯向(±)-順-[4-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-2-環(huán)戊烯-1-基]甲醇(20.0g，66.0mmol)和N-甲基嗎啉N-氧化物(Aldrich，60％水溶液，12.0mL，69mmo1)的丙酮(280mL)溶液中加入四氧化鋨(2.5％叔丁醇溶液，Aldrich，1.24mL)。室溫?cái)嚢?8小時(shí)后真空除去揮發(fā)物，剩余物在吡啶(200mL)-乙酐(40mL)中再攪拌18小時(shí)。將溶液濃縮成粘稠的紅色油狀物并將其在碳酸鈉飽和水溶液和氯仿之間分配。干燥(硫酸鈉)氯仿相，然后真空濃縮成油。將標(biāo)題化合物的異構(gòu)體混合物通過(guò)硅膠柱色譜分離，用2％甲醇-氯仿洗脫并用乙酸乙酯-己烷結(jié)晶(晶種是實(shí)施例1方法制備的(1R*，2S*)-異構(gòu)體)，得到(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯，為橙色晶體(17.4g，57％)，m.p.154-156℃；1H-NMR(DMSO-d6)分析結(jié)果與實(shí)施例1所述樣品的一致。
母液繼續(xù)用乙酸乙酯-己烷結(jié)晶，得到(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯，為橙色晶體(8.82g，29％)，m.p.105-107℃；1H-NMR(DMSO-d6)。元素分析C18H20N2Cl2O8計(jì)算值C，46.67；H，4.35；N，6.05；Cl，15.31；實(shí)測(cè)值C，46.50；H，4.33；N，5.96；Cl，15.23。實(shí)施例17(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯室溫下將(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(5.00g，10.8mmol)在氨/甲醇(約2N，100mL)中攪拌18小時(shí)。真空除去揮發(fā)物，留下橙色固體(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-3-(乙酰氧基甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，經(jīng)在硅膠TLC板上分析其Rf與實(shí)施例19所述手性樣品的一致。該固體用阮內(nèi)鎳/氫(45psi)在異丙醇(200mL)中還原。用硅藻土濾出催化劑，真空蒸發(fā)濾液-洗滌液至干。如實(shí)施例2所述，將剩余物在甲酸(69％，50mL)中回流1小時(shí)。將蒸發(fā)甲酸余留的油溶解于甲醇。用5N氫氧化鈉水溶液將pH調(diào)至13并將溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)以水解甲酸酯。再用1N鹽酸調(diào)節(jié)pH至7，真空蒸發(fā)除去揮發(fā)物。在剩余物中加入吡啶(100mL)和乙酐(4mL)，混合物在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。真空蒸發(fā)揮發(fā)物，接著在硅膠上色譜分離，用1％甲醇-氯仿洗脫，得到(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯，從乙醇-水中結(jié)晶，為白色晶體(2.6g，53％)，1H-NMR(DMSO-d6)分析結(jié)果與結(jié)構(gòu)相符。將(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(2.5g，5.7mmol)溶解于無(wú)水二惡烷(15mL)?；亓魅芤海瑫r(shí)一次加入剛重結(jié)晶的N-溴琥珀酰亞胺(2.10g，11.5mmol)?；亓?分鐘后真空蒸發(fā)紅棕色溶液，得到紅色油。將該油的氯仿溶液用水洗滌，然后干燥(硫酸鈉)。將氯仿溶液濃縮成油狀物，在硅膠上色譜分離，含產(chǎn)物流分以2-4％甲醇-氯仿洗脫出。用乙酸乙酯-己烷結(jié)晶，得到乳白色固體(1.5g，50％)；1H-NMR(DMSO-d6)分析符合標(biāo)題化合物結(jié)構(gòu)。該樣品重新在硅膠上色譜分離，用氯仿洗脫，得到(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯，用乙酸乙酯-己烷結(jié)晶后為白色晶體，m.p.166-167℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.14和7.96(均為單峰，1每個(gè)，2芳香CH)，5.6-5.35(m，3，2 OCH和NCH)，4.4-4.1(m，2，OCH2)，2.8-2.4(m，與溶劑重疊，2CH)，2.4-2.1(m，與在2.25處的單峰重疊，總共4，CH和CH3)，2.04(s，3，CH3)，1.37(s，1，CH3)；質(zhì)譜(CI)525(53)，523(100)，521(54，M+1)。元素分析C19H19N2BrCl2O6計(jì)算值C，43.70；H，3.67；N，5.37；全部鹵素為Cl，20.37；實(shí)測(cè)值C，43.65；H，3.68；N，5.35；全部鹵素為Cl，20.32。實(shí)施例18(1S，4R)-[4-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-2-環(huán)戊烯-1-基]甲醇用實(shí)施例1方法將(-)-(1R，4S)-N-[4-(羥甲基)-2-環(huán)戊烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(15.00g，70.3mmol)轉(zhuǎn)化成(1S，4R)-[4-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-2-環(huán)戊烯-1-基]甲醇，經(jīng)硅膠柱用1；1己烷-氯仿洗脫并用乙酸乙酯-己烷中重新固化后分離出黃色粉末(9.97g，47％)，m.p.94.5-96.5℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.24(s，1，苯并咪唑CH)，8.09(d，J＝8.1Hz，1，NH)，7.51(s，1，苯并咪唑CH)，5.95和5.85(均為多峰，2，CH＝CH)，4.9-4.7(m，與在4.78的t重疊，J＝5.1Hz，總共2，CHN和OH)，3.4(m，2，CH2O)，2.80(m，1，CH)，2.6-2.4(m，與溶劑重疊，CH)，1.5-1.4(m，1，CH)；質(zhì)譜(CI)303(M+1)；[α]20589+199°，[α]20578+222°，[α]20546+333°(c＝0.267，甲醇)。元素分析C12H12N2Cl2O3·0.18C6H14計(jì)算值C，49.30；H，4.59；N，8.79；Cl，22.25；實(shí)測(cè)值C，49.64；H，4.64；N，8.68；Cl，22.10。實(shí)施例19(1S，2R，3R，5R)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇和(1R，2S，3R，5R)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇向(1S，4R)-[4-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-2-環(huán)戊烯-1-基]甲醇(8.60g，27.6mmol)和N-甲基嗎啉N-氧化物(Aldrich，60％水溶液，5.02mL，29.0mmol)的丙酮(90mL)溶液中加入四氧化鋨(Aldrich，2.5％叔丁醇溶液，0.51mL)。室溫?cái)嚢?8小時(shí)后再加入0.25mL N-甲基嗎啉N-氧化物60％水溶液并將溶液再攪拌5小時(shí)。真空蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余物用95％乙醇重結(jié)晶兩次，得到(1S，2R，3R，5R)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇為黃色粉末(1.78g，19％)，m.p.197-199℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.23(s，1，苯并咪唑CH)，8.1(d，J＝7.0Hz，1，NH)，7.50(s，1，苯并咪唑CH)，5.02(d，J＝4.9Hz，1，OH)，4.74(t，J＝5.1Hz，1，CH2OH)，4.58(d，J＝5.1Hz，1，OH)，4.0-3.8(m，1，NCH)，3.8-3.7(m，2，2OCH)，3.5-3.4(m，2，CH2O)，2.45-2.25(m，1，CH)，2.1-1.9(m，1，CH)，1.4-1.2(m，1，CH)；質(zhì)譜(CI)337(M+1)；[α]20589-106°，[α]20578-118°，[α]20546-182°(c＝0.273，甲醇)。元素分析C12H14N2Cl2O5計(jì)算值C，42.75；H，4.19；N，8.31；Cl，21.03；實(shí)測(cè)值C，42.87；H，4.21；N，8.24；Cl，21.09。
將母液在硅膠上色譜分離，用7-8％甲醇-氯仿洗脫，得到(1R，2S)異構(gòu)體，用90％乙醇固化兩次，得到(1R，2S，3R，5R)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，為黃色粉末(1.57g，17％)，m.p.179-181℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.70(d，J＝7.1Hz，1，NH)，8.22和7.32(均為單峰，各1，2苯并咪唑CH)，5.28(d，J＝5.6Hz，1，OH)，4.77(d，J＝3.9Hz，1，OH)，4.45(t，J＝4.9Hz，1.CH2OH)，4.1-3.9(m，3，2OCH和NCH)，3.6-3.5和3.45-3.35(均為多峰，與H2O部分重疊，2，CH2O)，2.45-2.25(m，1，CH)，2.2-3.9(m，1，CH)，1.35-1.25(m，1，CH)；質(zhì)譜(CI)337(M+1)；[α]20589-15.6°，[α]20578-13.2°，[α]20546-4.00°(c＝0.250，甲醇)。元素分析C12H14N2Cl2O3計(jì)算值C，42.75；H，4.19；N，8.31；Cl，21.03；實(shí)測(cè)值C，42.87；H，4.15；N，8.30；Cl，21.14。
用8-10％甲醇-氯仿洗脫，得到白色固體(2.9g)，1H-NMR顯示其為兩種異構(gòu)體約1∶1的混合物。
繼續(xù)用10-20％甲醇-氯仿洗脫該柱，又得到含(1S，2R，3R，5R)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇的流分，將其從90％乙醇中固化，得到白色粉末(2.23g)，這使這種異構(gòu)體的總產(chǎn)率達(dá)到43％。實(shí)施例20(1S，2R，3R，5R)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯同實(shí)施例16將(1S，4R)-[4-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-2-環(huán)戊烯-1-基]甲醇(3.75g，11.1mmol)在吡啶-乙酐中乙?；４之a(chǎn)物用2％甲醇-氯仿從硅膠柱上洗脫并用乙酸乙酯固化，得到(1S，2R，3R，5R)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯，為黃色粉末(5.13g，100％)。其N(xiāo)MR結(jié)果與實(shí)施例1的一致。將該樣品用乙酸乙酯-己烷結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為黃色粉末。m.p.128-130℃；1H-NMR(DMSO-d6)和質(zhì)譜(CI)結(jié)果與實(shí)施例1的一致；[α]20589-95.8°，[α]20578-107°，[α]20546-165°(c＝0.259，甲醇)。元素分析C18H20N2Cl2O8計(jì)算值C，46.67；H，4.35；N，6.05；Cl，15.31；實(shí)測(cè)值C，46.74；H，4.36；N，5.96；Cl，15.38。實(shí)施例21(1S，2R，3R，5R)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯如實(shí)施例2所述外消旋樣品一樣，將(1S，2R，3R，5R)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(4.42g，9.97mmol)轉(zhuǎn)化成標(biāo)題化合物。粗產(chǎn)物在硅膠上色譜分離，用5％甲醇-氯仿洗脫，蒸發(fā)溶劑，得到(1S，2R，3R，5R)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯，從乙醇中得到乳白色固態(tài)泡沫狀物(4.0g，90％)。1H-NMR(DMSO-d6)和質(zhì)譜(CI)結(jié)果與實(shí)施例2所述外消旋體的一致；[α]20589+25.5°，[α]20578+26.7°，[α]20546+30.6°(c＝0.255，甲醇)。元素分析C19H20N2Cl2O6計(jì)算值C，51.49；H，4.55；N，6.32；Cl，16.00；實(shí)測(cè)值C，51.33；H，4.58；N，6.27；Cl，15.90。實(shí)施例22(1S，2R，3R，5R)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇室溫下將(1S，2R，3R，5R)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(0.96g，2.17mmol)和碳酸鈉(0.23Og，2.17mmol)在水(3mL)-乙醇(15mL)-甲醇(15mL)中攪拌24小時(shí)。用乙酸將pH調(diào)節(jié)至7，真空除去揮發(fā)物。剩余的固體在水(25mL)中漿化并過(guò)濾。用2∶1乙醇-甲醇重新固化，得到(1S，2R，3R，5R)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，為白色粉末(408mg，60％)，m.p.222-225℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.49，8.09和7.96(均為單峰，各1，3苯并咪唑CH)，5.04(d，J＝7.0Hz，1，OH)，4.87(t，J＝5.1Hz，1，CH2OH)，4.8-4.6(m，與在4.76的d重疊，J＝4.3Hz，2，NCH和OH)，4.25-4.10(m，1，OCH)，3.9-3.8(m，1，OCH)，3.6-3.45(m，2，CH2O)，2.45-2.25(m，1，CH)，2.2-2.0(m，1，CH)，1.85-1.65(m，1，CH)；質(zhì)譜(CI)317(M+1)；[α]20589-12.2°，[α]20578-12.9°，[α]20546-14.1°(c＝0.255，甲醇)。元素分析C13H14N2Cl2O3計(jì)算值C，49.23；H，4.45；N，8.83；Cl，22.36；實(shí)測(cè)值C，49.25；H，4.47；N，8.83；Cl，22.46。實(shí)施例23(1S，2R，3R，5R)-5-(2-溴-5.6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇將(1S，2R，3R，5R)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(2.00g，4.51mmol)溶解于無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(9mL)中并加熱至90℃。用5小時(shí)分4批加入N-溴琥珀酰亞胺(1.62g，9.02mmol)。真空蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余物在硅膠上色譜分離，產(chǎn)物用30-50％乙酸乙酯-己烷洗脫，得到黃色玻璃狀物質(zhì)(1.00g，43％)；1H-NMR(DMSO-d6)結(jié)果與結(jié)構(gòu)相符。室溫下用碳酸鈉(203mg，1.9mmol)在水(3mL)-乙醇(15mL)-甲醇(15mL)中將樣品脫保護(hù)。用乙酸將pH調(diào)至7。將溶液真空蒸發(fā)至干，剩余物用水研制，得到白色粉末，將之在硅膠柱上色譜分離，用10-12％甲醇-氯仿洗脫，得到(1S，2R，3R，5R)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，用1∶1乙醇-甲醇固化后為白色粉末(410mg，54％)，m.p.212-215℃；1H-NMR(DMSO-d6)和質(zhì)譜結(jié)果與實(shí)施例4所述外消旋體的一致；[α]20589-31.2°，[α]20578-32.3°，[α]20546-37.3°(c＝0.260，甲醇)。元素分析C13H13N2BrCl2O3計(jì)算值C，39.43；H，3.31；N，7.07；全部鹵素為Cl，26.86；實(shí)測(cè)值C，39.62；H，3.37；N，7.02；全部鹵素為Cl，26.75。實(shí)施例24(1S，2R，3R，5R)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇氮?dú)庀聦?1S，2R，3R，5R)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(500mg，0.958mmol)在水∶乙醇/2∶1(7.5mL)中與環(huán)丙胺(0.66mL，9.6mmol)一起回流18小時(shí)。TLC(硅膠，10％甲醇-氯仿)表明其完全轉(zhuǎn)化成具有Rf較起始原料低的單斑點(diǎn)。加入1N氫氧化鈉(0.96mL)，蒸發(fā)揮發(fā)物。剩余物在硅膠柱上進(jìn)行快速色譜分離，標(biāo)題化合物用10％甲醇-氯仿洗脫，為無(wú)色玻璃狀物質(zhì)，從水∶乙醇/2∶1(5mL)中固化，得到乳白色粉末(207mg，59％)，m.p.116-118℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ和質(zhì)譜結(jié)果與實(shí)施例4所述對(duì)映體的一致；[α]20589-12.2°，[α]20578-12.5°，[α]20546-13.5°(c＝0.312，甲醇)。元素分析C16H19N3Cl2O3計(jì)算值C，51.63；H，5.15；N，11.29；Cl，19.05；實(shí)測(cè)值C，51.37；H，5.10；N，11.16；Cl，19.25。實(shí)施例25(1R，4S)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-甲醇將(-)-(1S，4R)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-羧酸(Chiroscience Ltd.，Cambridge，England；40.00g，0.315mol)的無(wú)水四氫呋喃(300mL)混合物在冰浴中攪拌，其間用1.5小時(shí)加入1M氫化鋁鋰的四氫呋喃液(Aldrich，485mL)，此添加過(guò)程中不允許溫度高于0℃。將混合物升至室溫，然后回流1小時(shí)并保持在回流溫度2.5小時(shí)。讓混合物冷卻至室溫，加入氟化鈉(89.6g)并繼續(xù)攪拌0.5小時(shí)。冷卻(冰浴)混合物并緩慢加水(23mL)，再繼續(xù)攪拌0.5小時(shí)。濾出沉淀并用40％甲醇-四氫呋喃萃取(2×300mL)。真空濃縮濾液-洗滌液，得到無(wú)色油狀物，它在空氣中和光亮處迅速變深，被立即使用(實(shí)施例16)。該樣品在室溫和0.2mmHg條件下被干燥成淺黃色油狀物；1H-NMR(DMSO-d6)結(jié)果與實(shí)施例22所述對(duì)映體的一致；d5.67(m，2，CH＝CH)，3.8-3.7(m，1，CHN)，3.32(d，J＝6.0Hz，被中心在3.18的D2O可交換寬峰重疊，CH2O，OH，NH2和溶劑中的H2O)，2.68-2.56(m，1，H-1)，2.28-2.18(m，1，1/2CH2)，1.08-0.98(m，1，1/2CH2)；質(zhì)譜(CI)114(M+1)；[α]20589+55.0°，[α]20578+58.3°，[α]20546+67.4°，[α]20436+119°(c＝0.242，甲醇)。元素分析C6H11NO·0.31H2O計(jì)算值C，60.69；H，9.86；N，11.80；實(shí)測(cè)值C，61.12；H，9.79；N，11.38。實(shí)施例26(1R，4S)-[4-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-2-環(huán)戊烯-1-基]甲醇將實(shí)施例25得到的濾液-洗滌液濃縮并在剩余的油狀物中加入叔丁醇(400mL)。該溶液用于根據(jù)實(shí)施例10的方法與1，2，4-三氯-5-硝基苯(Aldrich，71.3g，0.315mol為97％)縮合。真空蒸發(fā)揮發(fā)物后將反應(yīng)混合物在硅膠柱上色譜分離，用1∶1己烷-乙酸乙酯和乙酸乙酯洗脫。粗產(chǎn)物重新在硅膠上進(jìn)行色譜分離，用4-6％甲醇-氯仿洗脫。合并含產(chǎn)物的流分，蒸發(fā)溶劑后得到58g帶紅色的固體。將該固體從乙酸乙酯-己烷中重新固化，得到(1R，4S)-[4-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-2-環(huán)戊烯-1-基]甲醇，為黃色粉末(34.5g，36％，由(-)-(1S，4R)-4-氨基-2-環(huán)戊烯-1-羧酸)，m.p.95-97℃；1H-NMR(DMSO-d6)和質(zhì)譜(CI)結(jié)果與實(shí)施例18所述對(duì)映體的一致；[α]20589-195°，[α]20578-217°，[α]20546-326°(c＝0.350，甲醇)。元素分析C12H12N2Cl2O3計(jì)算值C，47.55；H，3.99；N，9.24；Cl，23.39；實(shí)測(cè)值C，47.56；H，4.01；N，9.25；Cl，23.30。
繼續(xù)對(duì)上述硅膠柱洗脫，又得到黃色粉末(18.0g，19％)，1H-NMR顯示其為含有約15％雜質(zhì)(1R，4S)-[4-(2，5-二氯-4-硝基苯胺基)-2-環(huán)戊烯-1-基]甲醇的標(biāo)題化合物。實(shí)施例27(1R，2S，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯和(1S，2R，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯如實(shí)施例16所述將(1R，4S)-[4-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-2-環(huán)戊烯-1-基]甲醇(17.00g，56.1mmol)羥基化并將三醇的混合物乙?；⒁阴；蠓蛛x的粗紅色油狀物在硅膠上色譜分離，標(biāo)題化合物的混合物用2％甲醇-氯仿洗脫。用乙酸乙酯-己烷分級(jí)結(jié)晶，分兩次得到(1R，2S，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯，為黃色針晶(12.78g，49％)，m.p.127-128℃；1H-NMR(DMSO-d6)和質(zhì)譜(CI)結(jié)果與實(shí)施例1所述外消旋樣品的和實(shí)施例55所述對(duì)映體的一致；[α]20589+106°，[α]20578+119°，[α]20546+184°(c＝0.275，甲醇)。元素分析C18H20N2Cl2O8計(jì)算值C，46.67；H，4.35；N，6.05；Cl，15.31；實(shí)測(cè)值C，46.74；H，4.40；N，6.09；Cl，15.22。
繼續(xù)將母液用乙酸乙酯-己烷分級(jí)結(jié)晶，得到(1S，2R，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯，為橙色晶體(2.45g，10％)，m.p.122-124℃；1H-NMR(DMSO-d6)。
蒸發(fā)合并的母液，得到另外9.50g(40％)標(biāo)題化合物約1∶1的混合物(通過(guò)1H-NMR測(cè)定)。實(shí)施例28(1R，2S，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯如實(shí)施例2所述將(1R，2S，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯轉(zhuǎn)化成標(biāo)題化合物。用甲酸處理后將粗產(chǎn)物在硅膠上色譜分離，用10％乙酸乙酯-己烷洗脫。蒸發(fā)含產(chǎn)物流分，得到(1R，2S，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯，由乙酸乙酯得到白色固態(tài)泡沫狀物(1.85g，95％)；1H-NMR(DMSO-d6)和質(zhì)譜(CI)結(jié)果與實(shí)施例2所述外消旋體和實(shí)施例56所述對(duì)映體的一致；[α]20589-25.5°，[α]20578-27.0°，[α]20546-31.2°(c＝0.333，甲醇)。元素分析C19H20N2Cl2O6·0.1EtOAc計(jì)算值C，51.54；H，4.64；N，6.20；Cl，15.68；實(shí)測(cè)值C，51.29；H，4.69；N，6.19；Cl，15.91。實(shí)施例29(1S，2R，3S，5S)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇和(1R，2S，3S，5S)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇室溫下用碳酸鈉(97mg)在1∶1∶1水-乙醇-甲醇(100mL)給約1∶1的(1R，2S，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯和(1S，2R，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(4，5-二氯-2-硝基苯胺基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(4.30g，9.28mmol)混合物脫乙?；?4小時(shí)。用乙酸將pH調(diào)至7，然后真空除去揮發(fā)物。剩余的固體用甲醇萃取。將甲醇濾液真空蒸發(fā)至干。剩余的固體溶解于乙醇(55mL)-水(20mL)中，用硫酸調(diào)節(jié)pH至5-6，再與鐵粉(325目，99.9％，Aldrich，5.18g，93毫克當(dāng)量)和硫酸鐵(II)七水合物(Aldrich，98+％，1.30g，4.58毫克當(dāng)量)一起回流4小時(shí)。濾出固體，將乙醇濾液-洗液濃縮成油狀物。在油狀物中加入原甲酸三乙酯(55mL)和甲磺酸(0.05mL)，并將所得溶液在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。真空濃縮后剩下的油重新溶解于1N鹽酸(50mL)-二惡烷(5mL)。2.5小時(shí)后用1N氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至7并真空蒸發(fā)揮發(fā)物。剩余的固體在硅膠上色譜分離，用10-12％甲醇-氯仿洗脫，得到含(1S，2R，3S，5S)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇流分，將之用乙酸乙酯-己烷結(jié)晶，分離得到白色晶體(540mg，18％)，m.p.201-202℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.42，8.07和7.92(全部單峰，各1，苯并咪唑CH)，5.1-4.8(m，與在5.02，J＝5.7Hz的雙峰和在4.93，J＝3.9Hz的雙峰重疊，總共3，NCH和2OH)，4.54(t，J＝4.8Hz，1，OH)，4.2-4.0(m，2，2OCH)，3.75-3.45(m，2，OCH2)，2.4-1.9(m，3，CH2和CH)；質(zhì)譜(CI)317(M+1)；[α]20589-61.4°，[α]20578-63.1°，[α]20546-72.9°(c＝0.350，甲醇)。元素分析C13H14N2Cl2O3計(jì)算值C，49.23；H，4.45；N，8.83；Cl，22.36；實(shí)測(cè)值C，49.20；H，4.45；N，8.78；Cl，22.37。
繼續(xù)用15-20％甲醇-氯仿從柱上洗脫，得到含標(biāo)題化合物的混合物的流分，接著得到僅含(1R，2S，3S，5S)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇的流分從10％甲醇-氯仿中結(jié)晶，分離出白色晶體(605mg，21％)，m.p.221-222℃；1H-NMR(DMSO-d6)和質(zhì)譜(CI)為317(M+1)；[α]20589+14.5°，[α]20578+15.2°，[α]20546+16.9°(c＝0.290，甲醇)。元素分析C13H14N2Cl2O3計(jì)算值C，49.23；H，4.45；N，8.83；Cl，22.36；實(shí)測(cè)值C，49.29；H，4.46；N，8.87；Cl，22.26。實(shí)施例30(1R，2S，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯如實(shí)施例3所述將(1R，2S，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(1.40g，2.94mmol)溴化。真空除去揮發(fā)物，剩余物在硅膠上色譜分離。粗產(chǎn)物由20-30％己烷-乙酸乙酯洗脫出，為無(wú)色油狀物。用水洗滌該油的氯仿溶液以除去雜質(zhì)琥珀酰亞胺。干燥(硫酸鈉)氯仿溶液并真空蒸發(fā)至干，從乙醇中得到標(biāo)題化合物，為白色固態(tài)泡沫狀物(760mg，50％)；1H-NMR(DMSO-d6)和質(zhì)譜(CI)結(jié)果與實(shí)施例3所述外消旋體的一致；[α]20589+43.8°，[α]20578+45.2°，[α]20546+52.2°(c＝0.345，甲醇)。元素分析C19H19N2BrCl2O6·0.05EtOH計(jì)算值C，43.74；H，3.71；N，5.34；全部鹵素為Cl，20.28；實(shí)測(cè)值C，43.74；H，3.69；N，5.35；全部鹵素為Cl，20.41。實(shí)施例31(1R，2S，3S，5S)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇如實(shí)施例4所述將(1R，2S，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(660g，1.26mmol)脫乙酰化，用1∶1乙醇-甲醇固化后得到標(biāo)題化合物，為白色粉末(415mg，83％)；m.p.213-216℃；1H-NMR(DMSO-d6)和質(zhì)譜(CI)結(jié)果與實(shí)施例4所述外消旋體的一致；[α]20589+35.9°，[α]20578+36.8°，[α]20546+42.1°(c＝0.340，甲醇)。元素分析C13H13N2BrCl2O3計(jì)算值C，39.43；H，3.31；N，7.07；全部鹵素為Cl，26.86；實(shí)測(cè)值C，39.48；H，3.29；N，7.00；全部鹵素為Cl，26.90。實(shí)施例32(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇氮?dú)庀聦?1R，2S，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(500mg，0.958mmol)在水∶乙醇/2∶1(7.5mL)中與環(huán)丙胺(新打開(kāi)的安瓿，Aldrich，0.66mL，9.6mmo1)一起回流18小時(shí)。TLC(硅膠，10％甲醇-氯仿)顯示它完全轉(zhuǎn)化成Rf比起始原料低的單斑點(diǎn)。加入1N氫氧化鈉(0.96mL)并蒸發(fā)揮發(fā)物。剩余物在硅膠柱進(jìn)行快速色譜分離，用10％甲醇-氯仿洗脫，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色玻璃狀物質(zhì)；從水∶乙醇/2∶1(5mL)中固化，得到白色粉末(170mg，48％)，m.p.219-220℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.64和7.46(均為單峰，2，芳香CH)，7.11(m，1，NH)，5.11(t，J＝4.3Hz，1，OH)，4.77(d，J＝7.0Hz，1，OH)，4.67(d，J＝3.7Hz，1，OH)，4.65-4.30(m，2，OCH和NCH)，3.85-3.75(m，1，OCH)，3.7-3.4(m，2，OCH2)，2.85-2.70(m，1，環(huán)丙基的NCH)，2.15-1.80(m，3，環(huán)庚烷的CH2和CH)，0.80-0.50(m，4，環(huán)丙基的2CH2)；質(zhì)譜(CI)372(M+1)；[α]20589+13.4°，[α]20578+15.5°，[α]20546+16.9°(c＝0.277，甲醇)。[見(jiàn)實(shí)施例26-28和30]元素分析C16H19N3Cl2O3計(jì)算值C，51.63；H，5.15；N，11.29；Cl，19.05；實(shí)測(cè)值C，51.36；H，5.06；N，11.25；Cl，19.16。實(shí)施例33(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇氮?dú)庀聦?1R，2S，3S，5S)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(1.00g，1.92mmol)在乙醇(10mL)中與異丙胺(1.6mL，F(xiàn)luka)一起回流24小時(shí)。加入第二批異丙胺(0.80mL)，繼續(xù)回流4小時(shí)。蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余物溶解于乙醇，再加入1N氫氧化鈉(1.90mL)并蒸發(fā)揮發(fā)物。剩余物在硅膠柱上色譜分離，用10％甲醇-乙酸乙酯洗脫，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色玻璃狀物質(zhì)。濃縮乙醇溶液，得到標(biāo)題化合物，為乳白色固態(tài)泡沫狀物(360mg，46％)。通過(guò)用95％水-5％甲醇研制使樣品固化，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末(96％)，m.p.137-138℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.60和7.39(均為單峰，2，芳香CH)，6.64(d，J＝7.4Hz，1，NH)，5.14(t，J＝4.3Hz，1，OH)，4.81(d，J＝7.3Hz，1，OH)，4.70(d，J＝3.5Hz，1，OH)，4.70-4.50(m，1，NCH)，4.50-4.30(m，1，OCH)，4.10-4.00(m，1，環(huán)丙氨基的NCH)，3.9-3.75(m，1，OCH)，3.70-3.50(m，2，OCH2)，2.20-1.80(m，3，環(huán)庚烷的CH2和CH)，1.24(d，J＝6.6Hz，2CH3)；質(zhì)譜(CI)374(M+1)；[α]20589-3.72°，[α]20578-2.60°，[α]20546-2.23°，[α]20436-9.67°，[α]20365-51.7°(c＝0.269，甲醇)。[見(jiàn)實(shí)施例16-18和20]元素分析C16H21N3Cl2O3·1.3H2O計(jì)算值C，48.32；H，5.98；N，10.57；Cl，17.83；實(shí)測(cè)值C，48.08；H，5.91；N，10.41；Cl，18.13。實(shí)施例34(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-(5，6-二氯-2-氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇將(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(750mg，1.44mmol)溶解于乙醇(10mL)。加入肼水合物(55％，0.41mL，7.2mmol)并將溶液回流2小時(shí)。蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余的白色固體用乙醇-水重新固化，與阮內(nèi)鎳(氫氣下預(yù)平衡)在甲氧基乙醇(20mL)中一起攪拌30分鐘。濾出催化劑，濾液用氫氧化鈉水溶液稍微堿化以徹底除去乙酸根基團(tuán)。中和溶液并蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余的固體從乙醇-水中重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為淡粉色固體(97mg，20％)，m.p.283-284℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.61和7.30(均為單峰，2，芳香CH)，6.65(寬單峰，2，NH2)，5.07(t，J＝4.3Hz，1，OH)，4.80(d，J＝7.0Hz，1，OH)，4.66(d，J＝3.7Hz，1，OH)，4.65-4.50(m，1，NCH)，4.45-4.30(m，1，OCH)，3.90-4.80(m，1，OCH)，3.70-3.40(兩個(gè)m，2，OCH2)，2.20-1.80(m，3，環(huán)庚烷的CH2和CH)；質(zhì)譜(CI)332(M+1)。[見(jiàn)實(shí)施例1-3]元素分析C13H15N3Cl2O3計(jì)算值C，47.01；H，4.55；N，12.65；Cl，21.35；實(shí)測(cè)值C，46.72；H，4.60；N，12.46；Cl，21.08。實(shí)施例35(±)-(1R*，2R*，4S*)-2-(2-環(huán)丙氨基-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-4-(羥甲基)環(huán)戊醇用實(shí)施例32的方法將乙酸(±)-(1R*，2R*，4S*)-4-(乙酰氧基甲基)-2-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)環(huán)戊酯(500mg，1.50mmol)與環(huán)丙胺(0.73mL)反應(yīng)。粗產(chǎn)物在硅膠上色譜分離，用5％甲醇-乙酸乙酯洗脫，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色玻璃狀物質(zhì)，再?gòu)囊宜嵋阴?己烷中重新固化，得到白色粉末(180mg，48％)，m.p.251-253℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.54和7.45(均為單峰，2，芳香CH)，5.04(d，J＝5.1Hz，1，OH)，4.97(t，J＝4.7Hz，1，OH)，4.60-4.50和4.50-4.30(均為m，各1，NCH和OCH)，3.50(m，2，OCH2)，2.80(m，1，CH)，2.35-2.10(m，1，CH)，2.05-1.80(m，3，環(huán)庚烷的CH2和CH)，1.80-1.60(m，1，CH)，0.80-0.50(1m，4，環(huán)丙基的2CH2)；質(zhì)譜(CI)356(M+1)。[見(jiàn)實(shí)施例5-7]元素分析C16H19N3Cl2O2計(jì)算值C，53.97；H，5.34；N，11.80；Cl，19.91；實(shí)測(cè)值C，53.72；H，5.42；N，11.52；Cl，19.64。實(shí)施例36(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丁氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇將(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(500mg，0.958mmol)溶解于無(wú)水乙醇(7mL)并加入環(huán)丁胺(0.41mL，4.8mmol)。將溶液在氮?dú)庀禄亓?8小時(shí)。蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余物在0℃的用氨半飽和的甲醇(20mL)中攪拌18小時(shí)。真空除去揮發(fā)物，剩余物從乙醇-水中結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為白色固體，m.p.250℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.61和7.38(均為單峰，各1，芳香CH)，7.07(d，J＝7.4Hz，1，NH)，5.15(t，J＝3.9Hz，1，OH)，4.81(d，J＝7.3Hz，1，OH)，4.71-4.45(m，與在4.71，J＝3.5Hz的d重疊，總共2，OH和NCH)，4.40-4.30(m，2，OCH和NCH)，3.82-3.80(m，1，OCH)，3.72-3.42(均為m，1每個(gè)，OCH2)，2.32-1.67(三個(gè)m，9，4 CH2和CH)；質(zhì)譜(CI)386(M+1)。[見(jiàn)實(shí)施例5-7]元素分析C17H21N3Cl2O3·0.15H2O·0.05C2H5OH計(jì)算值C，52.49；H，5.56；N，10.74；Cl，18.12；實(shí)測(cè)值C，52.34；H，5.47；N，10.52；Cl，17.99。實(shí)施例37(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇將(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(500mg，0.958mmol)溶解于乙醇(7mL)。加入氮雜環(huán)丁烷(Aldrich，250mg，4.4mmol)并將溶液在氮?dú)庀禄亓?8小時(shí)。向該冷卻的溶液中加入含氨甲醇(0℃飽和的，20mL)并將該溶液再攪拌18小時(shí)。蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余物重新溶解于乙醇(10mL)并加入1N氫氧化鈉(0.96mL)。蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余的固體用水(3mL)研制并過(guò)濾。將固體從乙腈-甲醇中重新固化，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末(146mg，41％)，m.p.221-222℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.78和7.53(均為單峰，1每個(gè)，2芳香CH)，5.05(t，J＝4.3Hz，1，OH)，4.91(d，J＝5.3Hz，1，OH)，4.59(d，J＝3.7Hz，1，OH)，4.45-4.40(m，2，OCH和NCH)，4.25-4.15(m，4，2CH2N)，3.82-3.79(m，1，OCH)，3.66-3.43(均為m，各1，OCH2)，2.40-2.32(m，2，CH2)，2.03-1.95(m，3，CH2和NCH)；質(zhì)譜(CI)372(M+1)。[見(jiàn)實(shí)施例8-10]元素分析C16H19N3Cl2O3計(jì)算值C，51.63；H，5.14；N，11.29；Cl，19.05；實(shí)測(cè)值C，51.45；H，5.10；N，11.27；Cl，18.96。實(shí)施例38(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇將(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(實(shí)施例39，1.00g，1.87mmol)，環(huán)丙胺(Aldrich，1.7mL，24mmol)和無(wú)水乙醇(10mL)在氮?dú)庀禄亓?8小時(shí)。冷卻反應(yīng)液并加入1N氫氧化鈉(1.2mL)。真空蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余的油狀固體在硅膠上色譜分離，用5％甲醇-乙酸乙酯洗脫，得到含白色粉末的部分(200mg)。從1∶1水-乙醇中重結(jié)晶，得到(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，為白色晶體(180mg，40％)，m.p.＞250℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.70(m，1，NH)，7.62和7.39(均為單峰，1每個(gè)，2苯并咪唑CH)，5.77(寬單峰，1，OH)，5.13(d，J＝5.3Hz，1，OH)，4.95-4.80(m，1，CHN)，4.48(t，J＝4.7Hz，1，CH2OH)，4.2-4.0(m，2，2OCH)，3.7-4.0(m，2，OCH2)，2.9-2.65(m，1，OCH)，2.2-1.8(m，3，CH2和CH)；質(zhì)譜(CI)372(M+1)。[見(jiàn)實(shí)施例10-14]元素分析C16H19N3Cl2O3計(jì)算值C，51.63；H，5.14；N，11.29；Cl，19.05；實(shí)測(cè)值C，51.53；H，5.18；N，11.22；Cl，18.97。實(shí)施例39(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-甲基-1，2-環(huán)戊二醇A.(±)-(1S*，2R*，3R*，5R*)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇將(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(實(shí)施例2，3.00g，6.77mmol)溶解于甲醇(100mL)。加入于0℃用氨飽和的甲醇(100mL)并將溶液在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。真空蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余的固體用水制成漿液，過(guò)濾，得到標(biāo)題化合物，為褐色粉末(2.02g，94％)。B.(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-碘-1，2-環(huán)戊二醇氮?dú)庀聦?±)-(1S*，2R*，3R*，5R*)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇(步驟A，2.00g，6.31mmol)溶解于無(wú)水DMF(15mL)，冷卻(冰浴)，同時(shí)用20分鐘滴加甲基三苯氧基碘化鏻(Aldrich，3.27g，6.94mmol)的無(wú)水DMF(15mL)溶液。繼續(xù)在冰浴中攪拌30分鐘，然后在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。真空蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余物在硅膠上色譜分離，產(chǎn)物用2％甲醇-氯仿洗脫，蒸發(fā)溶劑后得到淺黃色粉末(750mg，28％)；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.51，8.08和7.97(全部單峰，各1，3苯并咪唑CH)，5.20(d，J＝6.7Hz，1，OH)，5.04(d，J＝4.9Hz，1，OH)，4.8-4.6(m，1，NCH)，4.3-4.2(m，1，OCH)，3.8-3.7(m，1，OCH)，3.6-3.4(m，2，CH2I)，2.55-2.40(m，CH重疊于溶劑)，2.35-2.30(m，1，CH)，1.75-1.50(m，1，CH)。C.(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-甲基-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯在充有氫氣(50psi)的Parr搖動(dòng)器中將(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-碘-1，2-環(huán)戊二醇(步驟B，0.73g，1.71mmol)的乙醇(200mL)液與5％Pd/C(140mg)和三乙胺(0.24mL)-起搖動(dòng)7.5小時(shí)。濾出(硅藻土)催化劑，將乙醇濾液蒸發(fā)成白色固體。在該固體中加入吡啶(15mL)和乙酐(1.3mL)，所得溶液在室溫下攪拌18小時(shí)。蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余的油狀物溶解于氯仿(50mL)。用碳酸氫鈉水溶液萃取氯仿溶液并干燥(硫酸鈉)。蒸發(fā)氯仿，剩下標(biāo)題化合物，為黃色玻璃狀物質(zhì)(560mg，85％)；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.61，8.15和7.97(全部單峰，各1，3苯并咪唑CH)，5.60-5.45(m，1，OCH)，5.20-4.95(m，2，OCH和NCH)，2.50-2.15(m，3，CH2和CH)，2.09和1.95(均為單峰，各3，2OAc)，1.20(d，J＝6.5Hz，3，CHCH3)。D.(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-甲基-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯將(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-(5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-甲基-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(步驟C，550mg，1.43mmol)溶解于無(wú)水四氫呋喃(15mL)。加入N-溴琥珀酰亞胺(520mg，2.92mmol)并將所得溶液劇烈回流10分鐘。再加入一批N-溴琥珀酰亞胺(100mg)并繼續(xù)回流5分鐘。這時(shí)，TLC(硅膠板，用5％甲醇-氯仿展開(kāi))顯示起始原料已經(jīng)轉(zhuǎn)化成Rf稍高的吸收UV的斑點(diǎn)。通過(guò)冷卻(冰浴)猝滅反應(yīng)，用氯仿(50mL)稀釋。該溶液用水洗滌并干燥(硫酸鈉)。蒸發(fā)后所剩黃色固體在硅膠上進(jìn)行色譜分離，用5％甲醇-氯仿洗脫并在乙酸乙酯中研制，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末(460mg，68％)，m.p.235-236℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.38和7.97(均為單峰，各1，2苯并咪唑CH)，5.75-5.65(m，1，OCH)，5.2-5.0(m，2，OCH和NCH)，2.11(s)與2.2-2.05(m，總共6，OAc與CH2和CH)重疊，1.95(s，3，OAc)，1.22(d，J＝6.3Hz，3，CHCH3)；質(zhì)譜(CI)463(M+1)。E.(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-甲基-1，2-環(huán)戊二醇將(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-甲基-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(步驟D，350mg，0.75mmol)和環(huán)丙胺(Aldrich，0.53mL)在甲氧基乙醇(5mL)中回流5小時(shí)。在冷卻的反應(yīng)混合物中加入1N氫氧化鈉(0.75mL)，真空蒸發(fā)揮發(fā)物。剩余物在硅膠上色譜分離，產(chǎn)物用5％甲醇-氯仿洗脫，從甲醇-乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-甲基-1，2-環(huán)戊二醇，為白色晶體(170mg，64％)，m.p.231-233℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.48和7.39(均為單峰，各1，2苯并咪唑CH)，7.10(m，1，NH)，4.83(d，J＝5.9Hz，1，OH)，4.74(d，J＝5.1Hz，1，OH)，4.5-4.3(m，2，NCH和OCH)，3.7-3.6(m，1，OCH)，2.85-2.7(m，1，CHNH)，2.1-1.8(m，2，CH2和CH)，1.7-1.5(m，1，CH)，1.16(d，J＝5.4Hz，3，CHCH3)，0.8-0.5(m，4，環(huán)丙基的2CH2)；質(zhì)譜(CI)356(M+1)。[見(jiàn)實(shí)施例1和2]元素分析C16H19N3Cl2O2計(jì)算值C，53.95；H，5.38；N，11.80；Cl，19.90；實(shí)測(cè)值C，53.75；H，5.45；N，11.71；Cl，19.98。實(shí)施例40(1R，2S，3S，5S)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇將(1R，2S，3S，5S)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇(500mg，1.26mmol)的叔丁胺(Aldrich，98％，20mL)溶液在保持在148℃(油浴)的Parr高壓氣體儲(chǔ)罐中攪拌48小時(shí)。冷卻高壓氣體儲(chǔ)罐，所得淺黃色溶液用含1N氫氧化鈉的乙醇(1.2mL)稀釋。真空蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余物在硅膠上色譜分離，用10％甲醇-氯仿洗脫，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色油狀物。將該油溶解于無(wú)水乙醇，再濃縮成油狀物。用水(3mL)研制，得到(1R，2S，3S，5S)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，為白色粉末(303mg，61％)，m.p.在116-150℃收縮成玻璃狀物質(zhì)；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.63和7.43(均為單峰，2，芳香CH)，6.15(s，1，NH)，5.08(t，J＝4.3Hz，1，OH)，4.85(d，J＝7.4Hz，1，OH)，4.71(d，J＝3.8Hz，1，OH)，4.7-4.5(m，1，NCH)，4.45-4.3(m，1，OCH)，3.80(m，1，OCH)，3.7-3.4(m，2，OCH2)，2.2-1.85(m，3，環(huán)庚烷的CH2和CH)，1.47(s，9，3CH3)；質(zhì)譜(CI)388(M+1)；[α]20589-4.0°，[α]20578-4.3°，[α]20546-6.0°，[α]20436-22.6°，[α]20365-82.1°(c＝0.420，甲醇)。[見(jiàn)實(shí)施例25-28，30和31]元素分析C17H23N3Cl203·0.40H2O計(jì)算值C，51.63；H，6.07；N，10.62；Cl，17.93；實(shí)測(cè)值C，51.50；H，5.99；N，10.54；Cl，17.96。實(shí)施例41(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇將(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇(750mg，1.44mmol)的叔丁胺(Aldrich，98％，25mL)溶液在保持在90℃(油浴)的Parr高壓氣體儲(chǔ)罐中攪拌6天。真空蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余的固體在乙醇(30mL)中與二甲胺水液(Aldrich，40％，2mL)一起回流1小時(shí)。蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余的固體在硅膠上色譜分離，用10％甲醇-乙酸乙酯洗脫，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色玻璃狀物質(zhì)。用水固化，得到(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，為白色粉末(150mg，26％)；m.p.130-132℃；1H-NMR(DMSO-d6)結(jié)果與實(shí)施例30所述對(duì)映體的一致。[見(jiàn)實(shí)施例1-4]元素分析C17H23N3Cl2O3·0.65H2O·0.07C2H5OH計(jì)算值C，51.18；H，5.94；N，10.47；Cl，17.63；實(shí)測(cè)值C，51.34；H，6.06；N，10.37；Cl，17.58。實(shí)施例42(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇氮?dú)庀聦?±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(2-溴-5，6-二氯-1H-.苯并咪唑-1-基)-1，2-環(huán)戊二基二乙酸酯(750mg，1.44mmol)在乙醇中與異丙胺(1.22mL，Aldrich)一起回流18小時(shí)。加入第二批異丙胺(1.22mL)并繼續(xù)回流24小時(shí)。蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余物重新溶解于乙醇。加入1N氫氧化鈉(1.44mL)并再蒸發(fā)揮發(fā)物。剩余物在硅膠柱上色譜分離，用10％甲醇-氯仿洗脫，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色玻璃狀物質(zhì)。將該玻璃狀物質(zhì)從乙酸乙酯-己烷中結(jié)晶，得到(±)-(1R*，2S*，3 S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，為白色晶體(305mg，57％)；m.p.213-214℃；1H-NMR(DMSO-d6)結(jié)果與實(shí)施例23所述對(duì)映體的一致。[見(jiàn)實(shí)施例1-4]元素分析C16H21N3Cl2O3計(jì)算值C，51.35；H，5.66；N，11.23；Cl，18.95；實(shí)測(cè)值C，51.27；H，5.69；N，11.17；Cl，18.88。
權(quán)利要求
1.式(I)或(I-1)化合物及其可藥用衍生物，
其中R1是H，CH3或CH2OH；R2是H或OH；R3是H或OH；或R2和R3一起形成一個(gè)鍵；R4是氨基，環(huán)丙氨基，環(huán)丁氨基，異丙氨基，叔丁氨基或-NR8R9，其中R8和R9與它們所連接的氮原子一起形成一個(gè)4，5或6員雜環(huán)；R5是H；和R6與R7是氯，但化合物(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇除外，條件是R1、R2和R3中至少一個(gè)是或者包含OH。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R2是OH。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R4是環(huán)丙氨基，異丙氨基或叔丁氨基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中R4是異丙氨基或叔丁氨基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的式(IA)或(IA-1)化合物及其可藥用衍生物，
其中R2是H或OH；R4是氨基，環(huán)丙氨基，異丙氨基，叔丁氨基或-NR8R9，其中R8和R9與它們所連接的氮原子一起形成一個(gè)4，5或6員雜環(huán)；R5是H，和R6與R7是氯，但化合物(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇除外。
6.權(quán)利要求5的化合物及其可藥用衍生物，其中R4是環(huán)丙氨基，異丙氨基或叔丁氨基；R5是H，R6和R7均為氯。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R4是異丙氨基或叔丁氨基。
8.權(quán)利要求1的化合物，選自(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-(5，6-二氯-2-氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2R*，4S*)-2-(2-環(huán)丙氨基-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-4-(羥甲基)環(huán)戊醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丁氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-甲基-1，2-環(huán)戊二醇；(1R，2S，3S，5S)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1S，2R，3R，5R)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1S，2R，3R，5R)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；及(1S，2R，3R，5R)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，以及它們的可藥用衍生物。
9.一種治療受治療者皰疹病毒感染的方法，包括用治療有效量的至少一種式(I)或(I-1)化合物(如權(quán)利要求1定義)或其可藥用衍生物治療患者。
10.權(quán)利要求9的方法，其中皰疹病毒感染是巨細(xì)胞病毒感染。
11.權(quán)利要求9或10的方法，其中所說(shuō)化合物選自(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-(5，6-二氯-2-氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2R*，4S*)-2-(2-環(huán)丙氨基-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-4-(羥甲基)環(huán)戊醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丁氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-甲基-1，2-環(huán)戊二醇；(1R，2S，3S，5S)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1S，2R，3R，5R)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1S，2R，3R，5R)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；及(1S，2R，3R，5R)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，以及它們的可藥用衍生物。
12.權(quán)利要求1化合物之一或多個(gè)在制備治療病毒感染，特別是乙型肝炎病毒和巨細(xì)胞病毒感染的藥物中的用途。
13.一種藥物制劑，含有至少一種式(I)或(I-1)化合物(如權(quán)利要求1定義)或其可藥用衍生物以及至少一種可藥用載體或賦形劑。
14.權(quán)利要求13的藥物制劑，其中所說(shuō)化合物選自(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(1R，2S，3S，5S)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-(5，6-二氯-2-氨基-1H-苯并咪唑-1-基)-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2R*，4S*)-2-(2-環(huán)丙氨基-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基)-4-(羥甲基)環(huán)戊醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丁氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(1-氮雜環(huán)丁基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3R*，5R*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3R*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(環(huán)丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-甲基-1，2-環(huán)戊二醇；(1R，2S，3S，5S)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[2-(叔丁氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇；(±)-(1R*，2S*，3S*，5S*)-5-[5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑-1-基]-3-(羥甲基)-1，2-環(huán)戊二醇，以及它們的可藥用衍生物。
15.一種制備式(I)和(I-1)化合物(如權(quán)利要求1定義)本身或與其鏡像對(duì)映體的結(jié)合物，及其可藥用衍生物的方法，包括(A)使式(II)化合物或其鏡像對(duì)映體
與a)式R4CO2H化合物反應(yīng)，其中R4是H，C1-4烷基或C1-4全氟烷基，或與式R4C(OR)3化合物反應(yīng)，其中R4是H，C1-4烷基或C1-4全氟烷基及R是C1-4烷基，生成其中R4是H的式(IA)或(IA-1)化合物，或與b)溴化氰反應(yīng)，生成其中R4是NH2的式(IA)或(IA-1)化合物；(B)a)將其中R4是氫的式(IA)或(IA-1)化合物轉(zhuǎn)變成另一種其中R4是離去基團(tuán)的式(IA)或(IA-1)化合物，或b)將其中R4是Cl、Br或I的式(IA)或(IA-1)化合物轉(zhuǎn)變成另一種其中R4是氨基或如上定義的取代氨基-NR8R9的式(IA)或(IA-1)化合物，或(C)將式(III)化合物
(其中R4，R5，R6和R7定義如上)或其官能等價(jià)物與式(IV)化合物反應(yīng)，
其中R1，R2和R3定義如上，L是離去基團(tuán)，生成其中R4是氫，鹵素或-NR8R9的式(IA)或(IA-1)化合物，以及任意將式(IA)或(IA-1)化合物轉(zhuǎn)化成其可藥用衍生物。
全文摘要
含有連接在替代通常糖基位置的碳環(huán)上的取代苯并咪唑堿的抗病毒核苷類(lèi)似物。在式(I)和(I-1)中，R
文檔編號(hào)C07D403/04GK1164855SQ95196148
公開(kāi)日1997年11月12日 申請(qǐng)日期1995年9月11日 優(yōu)先權(quán)日1994年9月9日
發(fā)明者L·B·湯森, S·M·達(dá)盧吉 申請(qǐng)人:惠爾康基金會(huì)集團(tuán)公司, 密執(zhí)安大學(xué)評(píng)議會(huì)