從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法
【專利摘要】從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法，包括以下步驟：（1）原料準備：將普通油茶葉洗凈、除雜、風干，粉碎；（2）提?。簩⑵胀ㄓ筒枞~粉用乙醇溶液加熱浸提，過濾，濃縮，得濃縮液；（3）分離純化：將濃縮液過大孔樹脂，然后用蒸餾水及乙醇溶液依次洗脫，分別收集、合并洗脫液，得洗脫液混合物；（4）硅膠分離：將洗脫液混合物濃縮后進行硅膠層析，然后用二氯甲烷、甲醇和水的混合溶液進行洗脫，分別收集目標餾分段；（5）液相制備：分別將目標餾分段濃縮后溶解，用液相半制備收集，即成。經(jīng)過鑒定確認了兩種目標產(chǎn)物成分，其得率可達37mg/kg和200mg/kg，純度＞90%；本發(fā)明方法制備工藝簡便，適于工業(yè)生產(chǎn)。
【專利說明】從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種分離聯(lián)芐類化合物的方法，具體涉及一種從普通油茶葉中分離出 兩種聯(lián)芐類化合物的方法。

【背景技術】
[0002] 我國生長的油茶主要有以下幾種：普通油茶（Camellia oleifera Abel)約占總面 積的98 %，其次為浙江省的浙江紅花油茶、云南省的騰沖紅花油茶、廣東省和廣西的南山茶 等。油茶研宄大多著眼于油茶果或其種質資源，每年四五月間打葉產(chǎn)生的大批落葉造成了 很大的資源浪費。
[0003] 研宄表明，油茶葉成分組成復雜，含有脂肪、還原糖、蛋白質、氨基酸、酸、灰分、葉 綠素、茶皂素和黃酮類物質等成分，其活性成分具有抗氧化、抗自由基、抑菌保鮮，及抗癌、 防癌等功效。近年來，油茶活性成分的研宄瓶頸在于提取方法及分離純化技術的落后，不能 很好的實現(xiàn)油茶中活性成分的高效提取或分離。
[0004] 3,5,4'-三羥基聯(lián)芐又名二氫白藜蘆醇，0八5#58436-28-5，分子式為（：14!1 1403，分子 量為230,其結構式如下所示：

【權利要求】
1. 一種從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法，其特征在于：包括以下步 驟： (1) 原料準備：將普通油茶葉洗凈并去除雜質，自然風干，粉碎得普通油茶葉粉備用； (2) 提?。簩⑵胀ㄓ筒枞~粉用體積分數(shù)20?80%的乙醇溶液進行加熱浸提，過濾得提 取液，將提取液濃縮至體積為濃縮前的30?50%，得濃縮液； (3) 分離純化：將步驟（2)所得濃縮液的2. 0?3. 5BV過大孔樹脂，吸附完成后，用2? 6 BV蒸饋水，1?8 BV體積分數(shù)15?25%的乙醇溶液，0. 5?6 BV體積分數(shù)45?55%的 乙醇溶液，0. 5?6 BV體積分數(shù)75?85%的乙醇溶液依次洗脫，分別收集洗脫液，將體積分 數(shù)45?55%和75?85%的乙醇溶液洗脫液合并，得洗脫液混合物； (4) 硅膠分離：將步驟（3)所得洗脫液混合物濃縮后進行硅膠層析，然后選用二氯 甲烷、甲醇和水中二氯甲烷含量以梯度遞減的混合溶液作為洗脫劑先后進行洗脫，分 段收集洗脫液，經(jīng)過液相色譜檢測，合并含有3, 5, 4' -三羥基聯(lián)芐的餾分段，命名為第 一順序組分；合并含有1_(3'，5' -二甲氧基）苯基-2 _[4'' -0-0-D-吡喃葡萄糖基 (6 - 1)-0-a -L-吡喃鼠李糖基]苯乙烷的餾分段，命名為第二順序組分； (5) 液相制備：將步驟（4)所得第一順序組分濃縮后用氮吹儀吹干，用相當于其1?2 倍量mL/g的二甲基亞砜溶解，進行液相色譜檢測，采用液相半制備收集3, 5, 4' -三羥基聯(lián) 芐的餾分，干燥得3, 5, 4' -三羥基聯(lián)芐。
2. 根據(jù)權利要求1所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法，其特征在 于：將步驟（4)所得第二順序組分濃縮后用氮吹儀吹干，用相當于其1?2倍量mL/g的 二甲基亞砜溶解，進行液相色譜檢測，采用液相半制備收集1-(3'，5' -二甲氧基）苯 基-2-[4' ' -0-0 -D-吡喃葡萄糖基（6 - 1)-0-a -L-吡喃鼠李糖基]苯乙烷的餾分，干燥 得1-(3'，5' -二甲氧基）苯基-2-[4'' -0-0-D-吡喃葡萄糖基（6 - 1)-0-a-L-吡喃鼠 李糖基]苯乙烷。
3. 根據(jù)權利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法，其特征 在于：步驟（2)中，所述加熱浸提中每克普通油茶葉粉加入1. 5?6mL體積分數(shù)20?80% 的乙醇溶液，浸提溫度為50?80°C，浸提多1次，每次1?3h。
4. 根據(jù)權利要求3所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法，其特征在 于：步驟（2)中，所述加熱浸提中每克普通油茶葉粉加入2?3mL體積分數(shù)45?65%的乙 醇溶液，浸提溫度為60?70°C，浸提2?4次，每次2h。
5. 根據(jù)權利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法，其特 征在于：步驟（2)中，所述濃縮為減壓濃縮，濃縮的溫度為40?50°C，真空度為0. 08? 0. 09MPa ;步驟（4)中，所述濃縮為減壓濃縮，濃縮的溫度為35?45°C，真空度為0. 08? 0. 09MPa，濃縮后濃縮液中固含量為34?36% ;步驟（5)中，所述濃縮為減壓濃縮，濃縮的溫 度為30?40°C，真空度為0. 08?0. 09MPa，濃縮至溶劑完全蒸發(fā)。
6. 根據(jù)權利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法，其特征 在于：步驟（3)中，用3?4 BV蒸餾水，4?6 BV體積分數(shù)15?25%的乙醇溶液，1?2 BV 體積分數(shù)45?55%的乙醇溶液、1?2 BV體積分數(shù)75?85%的乙醇溶液依次洗脫。
7. 根據(jù)權利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法，其特征 在于：步驟（4)中，所述二氯甲烷、甲醇和水中二氯甲烷含量以梯度遞減的混合溶液中體積 配比依次為7?9:1:0. 1、6?8:1:0. 1、4?6:1:0. 1，洗脫體積分別為0.8?1.2BV、2.5? 3. 5BV、1. 5 ?2. 5BV。
8. 根據(jù)權利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法，其特征 在于：步驟（3)、（4)中，所述洗脫的流速為0. 5?1. 5BV/h。
9. 根據(jù)權利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法，其特征 在于：步驟（3)中，所述大孔樹脂為D-101型大孔樹脂。
10. 根據(jù)權利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類化合物的方法，其特 征在于：步驟（3)中，所述大孔樹脂的用量為9?11L，大孔樹脂填充的徑高比為1:4. 5? 5. 5 ;步驟（4)中，所述硅膠的用量為0. 8?1. 2L，硅膠填充的徑高比為1:4?5。
【文檔編號】C07C39/16GK104496762SQ201510013675
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2015年1月12日 優(yōu)先權日:2015年1月12日
【發(fā)明者】曹清明, 鄔靖宇, 鐘海雁 申請人:中南林業(yè)科技大學